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    2013年 第33卷 第8期    刊出日期:2013-08-05
    研究论文
    唐氏综合征胎儿全基因组miRNA表达谱特征及其染色体分布
    李武县 梁勤东 董晋豫 王秦 戴勇 涂植光 徐勇
    2013, 33(8):  935-940. 
    摘要 ( 1063 )   PDF (1004KB) ( 740 )  
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    目的 研究唐氏综合征(DS)胎儿全基因组miRNA表达谱及其编码基因的染色体分布特征。方法 采用Illumina深度测序技术对6例DS胎儿(DS组)和6例正常胎儿脐带血(对照组)单个核细胞小RNA测序比对分析,确定DS全基因组miRNA表达谱及其编码基因的染色体分布特征。结果 两组共检测到395种miRNA,编码于316个miRNA基因。其中149种miRNA在两组中的表达具有显著性差异(DS组中6种上调,143种下调),有51种miRNA特异性表达于对照组。21号染色体编码的14个miRNA基因在DS组中有1个(miR-802)高表达,4个(let-7c、miR-99a、miR-125b和miR-155)低表达,余下9个在两组样本中均未表达。两组样本miRNA基因表达的染色体分布趋于一致,但miRNA基因表达丰度的分布却不尽相同:DS组主要分布于8、16、17和21号染色体,对照组主要分布于3、8、14、16、17和22号染色体。结论 DS胎儿脐带血单个核细胞具有其特定的miRNA表达谱和染色体分布特征,表达丰度差异分布的染色体编码miRNA可能在DS各临床性状的形成过程中具有重要作用。
    人骨髓间充质干细胞体外成骨与成脂分化过程中FGF1及其受体表达的变化
    董平 焦虎 李秋晨 吕晓岩 尹艳花 肖苒
    2013, 33(8):  941-946. 
    摘要 ( 781 )   PDF (1941KB) ( 673 )  
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    目的 研究人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成骨与成脂分化过程中成纤维细胞生长因子1(FGF1)及其受体(FGFRs)的动态表达,探讨FGF1在hBMSCs成骨与成脂分化过程中的作用。方法 密度梯度离心法分离hBMSCs,取第3代细胞分别进行成骨和成脂诱导分化并染色鉴定。通过Real-time PCR方法检测成骨和成脂标志基因以及FGF1/FGFRs的表达,免疫荧光染色法检测诱导分化前后FGF1的表达。Real-time PCR及油红O染色鉴定外源性FGF1对hBMSCs成骨与成脂分化的影响。结果 体外诱导hBMSCs成骨和成脂分化后茜素红和油红O染色结果呈阳性;FGF1和FGFRs在诱导过程中呈动态表达;免疫荧光染色结果表明FGF1主要在细胞质中分布,成骨诱导3 d后在细胞核中的表达增加;相比对照组,加入外源的FGF1组7 d后脂滴数量明显减少,成脂标志基因表达受到抑制(P<0.01),而加入外源的FGF1 3 d骨桥蛋白(OPN)表达升高(P<0.05)。结论 FGF1能够抑制hBMSCs的成脂分化,并且可能通过促进骨桥蛋白表达而提前hBMSCs的成骨矿化。
    重组腺病毒Ad-IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响
    王秦 成凤 匡文斌 董晋豫 马婷婷 熊海玉 涂植光
    2013, 33(8):  947-954. 
    摘要 ( 1112 )   PDF (1537KB) ( 1083 )  
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    目的 探讨重组腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3增殖、周期和凋亡的影响。方法 采用重组人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴细胞,感染48 h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad-IL-12),同时设未感染组(SKOV3)和Ad-GFP空载感染组(SKOV3/Ad-GFP)作为对照。RT-PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法检测卵巢癌细胞增殖,流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡,RT-PCR和Western blot检测抗凋亡蛋白BCL-2、Survivin的表达。结果 重组腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴细胞,分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比,SKOV3/Ad-IL-12组G1期细胞显著增加,凋亡率显著升高(P<0.05),SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和Survivin显著下调(P<0.05)。结论 人IL-12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞,分泌IL-12 P70蛋白,并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖。
    贝前列素促进野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺动脉细胞凋亡
    刘亚 田红燕 闫晓丽 王文平 范粉灵
    2013, 33(8):  955-959. 
    摘要 ( 904 )   PDF (1118KB) ( 805 )  
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    目的 探讨前列环素对肺动脉细胞凋亡的影响。方法 30只大鼠,随机分为对照组、野百合碱(MCT)组及贝前列素组。MCT组及贝前列素组腹腔注射60 mg/kg MCT,对照组腹腔注射等体积生理盐水;第2天起,贝前列素组每天200mg /kg贝前列素灌胃。所有大鼠饲养21d后,观察肺动脉血流动力学及右心肥厚、肺组织HE和TUNEL染色分别观察肺动脉重塑和肺动脉细胞凋亡,实时定量PCR及Western blot观察肺动脉内Bax,Bcl-2和PDKmRNA和蛋白水平的改变。结果 贝前列素组大鼠的平均肺动脉压力,右心肥厚指数及肺动脉管壁厚度均明显低于MCT组(P<0.05)。贝前列素组大鼠肺动脉细胞凋亡较MCT组增加,肺动脉组织中Bax mRNA和蛋白水平均高于MCT组, 而Bcl-2与PDK mRNA和蛋白水平均显著降低。结论 贝前列素可以通过促进肺动脉细胞凋亡改善野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉重塑。
    PLGF通过激活Rho/ROCK信号通路介导人脑微血管内皮细胞间紧密连接开放
    王淳 李波 方文刚 陈誉华
    2013, 33(8):  960-965. 
    摘要 ( 882 )   PDF (1071KB) ( 747 )  
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    目的 探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法 利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性。结果 25 ng/ml PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P<0.05);增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少;此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P<0.05),并激活细胞内Rho激酶活性。结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性。
    5-Aza-CdR抑制HepG2细胞DLK1基因表达及细胞生长
    黄铀新 罗耀玲 刘瑶
    2013, 33(8):  966-970. 
    摘要 ( 107 )   PDF (643KB) ( 556 )  
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    目的 在探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对DLK1基因及肝癌细胞系HepG2增殖、侵袭的影响。方法 不同浓度的5-Aza-CdR 及PBS作用HepG2细胞后,RT-PCR、Western blot检测DLK1基因及蛋白的表达水平;MTT、Transwell和流式细胞术检测HepG2细胞的生长、侵袭力及细胞周期的变化。结果 HepG2细胞经5-Aza-CdR处理后,DLK1 mRNA、蛋白表达量降低;MTT试验显示细胞生长速度依5-Aza-CdR浓度出现不同程度减慢;流式结果表明G1期细胞减少,S期细胞增加,出现S期阻滞;Transwell证实侵袭能力显著降低( P< 0.05)。结论 去甲基化药物5-Aza-CdR能有效地抑制DLK1基因的表达,从而抑制肿瘤细胞HepG2生长、增殖、侵袭能力。
    神经断离处移植间充质祖细胞延缓骨骼肌萎缩
    赵文勇 万立华 粟永萍 冉新泽
    2013, 33(8):  971-975. 
    摘要 ( 121 )   PDF (1131KB) ( 512 )  
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    目的 探讨间充质祖细胞(MPC)移植于神经断离处延缓失神经性骨骼肌萎缩。 方法 取GFP转基因C57小鼠后肢长骨进行MPC培养及鉴定。选取C57小鼠36只,随机分为MPC移植组、神经断离组及对照组,MPC移植组坐骨神经断离处注入5μL MPC悬液,神经断离组注入等量PBS,对照组不作处理。观察小鼠后肢活动能力,术后2和4周测量腓肠肌湿重、肌纤维横截面积维持率及观察超微结构,用Western blot检测α-actin、MHC及RT-PCR检测Myogenin 、MyoD 的表达。结果 术后2和4周,MPC移植组腓肠肌湿重及肌纤维横截面积维持率显著高于神经断离组(P < 0.05);术后4周,MPC移植组肌细胞核、线粒体、内质网的退变及肌肉纤维化程度明显低于神经断离组,α-actin、MHC、 Myogenin 、MyoD表达强度显著高于神经断离组(P < 0.05)。结论 异体间充质祖细胞体内移植可有效延缓失神经肌肉萎缩。
    5-氮杂胞苷对结肠癌细胞CHD5基因表达及细胞增殖活性的影响
    赵蕊 严启滔 吕静野 黄海丽 马文丽
    2013, 33(8):  976-980. 
    摘要 ( 118 )   PDF (862KB) ( 672 )  
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    目的 研究甲基化转移酶抑制剂5 -氮杂-2-脱氧胞苷(5-氮杂胞苷,AZA)对人肿瘤相关基因CHD5(染色质解旋酶DNA结合蛋白5)在结肠癌细胞中的基因转录的诱导作用以及其对细胞增殖的影响。方法5μmol/L 5-氮杂胞苷分别作用于Lovo和SW480细胞,连续作用72h后,用荧光定量PCR(qPCR)检测两种结肠癌细胞株中CHD5 mRNA的表达,重亚硫酸盐测序(BSP)法分析启动子区的甲基化状况,MTT法分析5-氮杂胞苷对Lovo和SW480细胞增殖的影响。结果5μmol/L 5-氮杂胞苷处理Lovo和SW480细胞72h后,Lovo和SW480细胞中CHD5基因的发生了去甲基化,其mRNA重新表达,细胞生长受到抑制。结论5-氮杂胞苷能够逆转CHD5基因的甲基化状态,调控CHD5 mRNA表达,并能有效地抑制结肠癌细胞的增殖。
    靶向COL1A1基因的 shRNA对乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭与迁移的影响
    余海浪 马文丽 周珏宇 孟伟 石嵘 郑文岭
    2013, 33(8):  981-985. 
    摘要 ( 124 )   PDF (1140KB) ( 520 )  
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    目的 探讨Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)基因沉默对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭与转移的影响。方法 设计2条shRNA 干扰载体及1 条阴性对照载体, 分别稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。用Western blot法筛选抑制效率最高的细胞进行细胞平板集落形成实验、细胞黏附实验、细胞迁移及侵袭实验,观察COL1A1基因对MDA-MB-231细胞粘附、运动及侵袭能力的影响。结果 转染pshRNA-COL1A1-2干扰载体的MDA-MB-231细胞COL1A1蛋白表达降低最明显,抑制率达66.98%±2.08%,选择该组细胞作为有效干扰组进行后续实验。pshRNA-COL1A1转染组细胞的集落形成率显著低于空白对照组和阴性质粒pshRNA-scramble转染组(P<0.05);细胞黏附实验中pshRNA-COL1A1转染组细胞的吸光度值较对照组明显降低(P<0.001); 转染pshRNA-COL1A1质粒组细胞的穿膜细胞数也显著低于空白对照组和阴性质粒pshRNA-scramble转染组(P<0.001)。结论 COL1A1基因沉默可在体外抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附、侵袭和迁移。
    HCV 5'UTR靶向性人工M1GS核酶的胞内抗病毒活性
    张文军 黄志文 李喜芳 张成成 刘映乐
    2013, 33(8):  986-991. 
    摘要 ( 144 )   PDF (882KB) ( 594 )  
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    目的 基于大肠埃希菌核糖核酸酶P的催化性RNA亚基(M1 RNA),人工构建一种抗丙肝病毒(HCV)的新型靶向性核酶,并进一步鉴定其胞外靶向切割活性及胞内抗病毒作用。方法 首先采用计算机软件对HCV基因组保守区——5'非翻译区(5' UTR)的序列与结构进行分析,以确定候选靶位。针对靶位的侧翼序列,设计与之互补的引导序列(GS),然后通过PCR将其共价连接至M1 RNA的3'末端,从而构建靶向性的M1GS核酶。结果 针对HCV 5' UTR第67位的胞嘧啶成功构建了一种M1GS核酶——M1GS-HCV/C67。该人工核酶不仅在体外可对靶RNA片段产生特异性切割,在HCV感染的宿主细胞内也能够显著抑制HCV核心蛋白的表达(p<0.05),并使上清液HCV RNA的拷贝数减少约800倍(p<0.01)。结论 M1GS-HCV/C67这种新型靶向性核酶具有良好的体外抗HCV活性,其成功构建为HCV感染的治疗研究提供了另一种潜在途径。
    力达霉素在体内外抑制小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0移植成瘤
    甄永占 赵毓芳 骆广玲 章广玲 刘学军 李冉 阚泉
    2013, 33(8):  992-997. 
    摘要 ( 135 )   PDF (1483KB) ( 681 )  
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    目的 研究力达霉素(LDM)体内外抗小鼠骨髓瘤的作用及机制。方法 用MTS法检测细胞增殖,PI单染结合流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,用Western blot 检测细胞周期和凋亡相关蛋白水平,用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0移植成瘤模型观察力达霉素在不同剂量下的治疗效果。结果力达霉素通过降低NF-κB、Bcl-2和Survivin的表达抑制SP2/0细胞增殖,并诱导其凋亡,通过上调P27蛋白的表达,使细胞周期阻滞于G2/M期。同时力达霉素对小鼠SP2/0细胞移植瘤的生长有显著抑制作用,且呈剂量依赖性。结论 力达霉素在体内外均具有显著抗小鼠骨髓瘤作用,具有一定的临床应用前景。
    肝星状细胞通过SDF-1/CXCR4轴诱导肝癌细胞上皮间质转分化并促进其侵袭
    李四光 常远鸿 刘凯歌
    2013, 33(8):  998-1003. 
    摘要 ( 122 )   PDF (1351KB) ( 750 )  
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    目的 探讨肝星状细胞是否通过SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭的作用和可能机制。方法 通过Western blot 和Real time RT-PCR,检测肝星状细胞LX02和肝癌细胞系SDF-1、CXCR4表达。Transwell实验检测星状细胞LX02或外源性SDF-1干预对肝癌细胞HepG2以及CXCR4基因沉默后的HepG2侵袭的影响,Western blot 检测上皮标志E-Cadherin和间质标志vimentin的表达变化。结果 肝星状细胞LX02中趋化因子SDF-1高表达,4株人肝细胞癌细胞系均有CXCR4高表达,其中HepG2细胞表达最强。星状细胞或SDF-1均能诱导肝癌细胞上皮-间质分化并促进其侵袭。通过RNA干扰技术靶向沉默肝癌细胞CXCR4基因,星状细胞或SDF-1均不能增强其细胞侵袭能力,不能诱导肝癌细胞HepG2发生上皮-间质分化。结论 肝星状细胞通过趋化因子SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌上皮-间质转化有关。
    配对盒4基因Arg121Trg多态性与2型糖尿病的相关性
    邓德耀 袁文丽 杨双娟 冯倩 高宗鹰 方芳 李显丽
    2013, 33(8):  1004-1008. 
    摘要 ( 116 )   PDF (1040KB) ( 507 )  
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    目的 探讨配对盒4(Pax4)基因Arg121Trg多态性(rs114202595)与云南省昆明地区2型糖尿病的相关性。 方法 根据口服75g葡萄糖耐量试验(OGTT)将1076例云南省昆明地区人群分为2型糖尿病组(T2DM)、糖耐量减低组(IGT)和健康对照组(NGT),应用高分辨率熔解曲线分析方法(HRM)检测Pax4基因Arg121Trg基因型,观察3组人群中基因型和等位基因的分布情况,同时分析T2DM人群中不同基因型相关临床变量的差异性。结果 1)Pax4基因Arg121Trg GG基因型(Arg/Arg)及A等位基因(Trg121)在T2DM组中的频率分别为0.909和0.047,在IGT组中为0.935和0.035,在NGT组中为0.939和0.03。 2)T2DM组Arg121Trg多态性GA+AA基因型(Arg/Trg + Trg/Trg )人群胰岛素使用率显著高于GG基因型(Arg/Arg)人群(P=0.001),而其他临床变量在T2DM组中两种基因型人群间比较均无明显差异。结论 Pax4基因Arg121Trg多态性A等位基因可能是云南省昆明地区2型糖尿病人群胰岛β功能进展性紊乱的一个分子标记。
    高浓度葡萄糖通过下调自噬增加体外培养雪旺细胞的凋亡
    屈岭 顾蓓 张宏 石玥 梁晓春
    2013, 33(8):  1009-1013. 
    摘要 ( 144 )   PDF (1358KB) ( 570 )  
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    目的 观察高浓度葡萄糖对雪旺细胞自噬活性的影响以及自噬对高糖条件下雪旺细胞增殖活性及凋亡的影响。方法 体外培养RSC96细胞,Western blot和免疫荧光法检测beclin1和caspase-3蛋白表达,MTT检测细胞增殖活性。结果 高浓度葡萄糖组RSC96细胞beclin1的表达减少(P<0.05),细胞增殖活性降低(P<0.05,P<0.01)。自噬被抑制后加剧了高糖对细胞增殖活性的削弱作用(P<0.01),同时增加了高糖促进caspase-3的活化作用(P<0.01)。结论 高浓度葡萄糖通过下调自噬活性增加细胞凋亡。
    骨形态发生蛋白4通过ERK/MAPK信号通路影响人脐静脉内皮细胞的成血管能力
    王琴 仉红刚 卡米拉.阿不里米提 张秋菊 修瑞娟
    2013, 33(8):  1014-1018. 
    摘要 ( 133 )   PDF (1230KB) ( 525 )  
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    目的 研究不同浓度的BMP-4对于脐静脉内皮细胞体外成血管能力的影响并对其作用机制做初步探讨。方法 BrdU参入法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移情况,基质胶法检测细胞体外成血管能力,Western blot检测phospho ERK 1/2表达情况。结果 BMP-4在低浓度时具有抑制HUVEC的增殖,迁移和成血管,然而随着BMP-4浓度的升高,这种抑制作用逐渐减弱,并有恢复至正常水平的趋势。结论 不同浓度的BMP-4对于HUVEC的增殖,迁移及成血管能力具有不同的影响,BMP-4可能是通过ERK/MAPK信号通路影响HUVEC成血管能力的。
    荧光显微镜观察封闭式脊髓窗内的大鼠脊髓微循环
    苑晓晨 李炳蔚 武清斌 荆瀛黎 盛有明 李宏伟 刘淑英 修瑞娟
    2013, 33(8):  1019-1023. 
    摘要 ( 168 )   PDF (1156KB) ( 524 )  
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    目的 探讨应用荧光显微镜通过改进的封闭式脊髓窗,观察大鼠脊髓背侧软脊膜微循环状态的可行性及效果。方法 用8周龄雄性SD大鼠,暴露T9至T11棘突,咬除T10棘突和椎板,暴露硬脊膜;在T9和T11棘突上安装固定器辅助物。用牙科丙烯酸树脂和玻璃片为原料在T10节段安装改进的封闭脊髓窗。采血并离心(2 000×g)收集红细胞, 将100μL压积的红细胞用Dil荧光染料(5mg/L)体外孵育,静脉注射入体内;用罗丹明6G(0.3g/L)静脉注射,体内标记白细胞。大鼠脊柱用微循环观测椎体固定器进行固定。用动物活体荧光成像显微系统进行观测和记录。结果 通过该系统可以观测大鼠软脊膜上微血管的形态和分布特点、血管密度;可以观测到Dil标记的红细胞在血管内的粘附和流速,观察和记录罗丹明6G标记的白细胞在血管壁的粘附滚动。结论 改进式的封闭脊髓窗和微循环观测椎体固定器,可用于对大鼠软脊膜上微血管进行观察和检测。
    网织红细胞血红蛋白含量在筛查女性铁缺乏中的应用
    徐二木 罗丹 徐佳 吴卫 迟书玲 邱玲
    2013, 33(8):  1024-1027. 
    摘要 ( 147 )   PDF (645KB) ( 733 )  
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    目的 探讨网织红细胞血红蛋白含量(CHr)在筛查女性铁缺乏中的应用意义。方法 选取体检中心506例女性体检者作为研究对象分为:铁缺乏组(无贫血缺铁组与缺铁性贫血组112例)与对照组(394例)。检测红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞分布宽度(RDW)、血清铁蛋白(SF)、血清铁(SI)及CHr等指标。结果 铁缺乏组CHr为27.2 ± 3.0pg明显低于对照组的30.6 ±1.3pg,(P<0.001)。ROC曲线证实诊断女性铁缺乏CHr的曲线下面积为0.841,明显高于RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC和RDW等指标,( P<0.05)。结论 CHr可以用于女性铁缺乏的筛查及早期诊断。
    慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3的表达降低
    周兰英 蒋乐龙 李定梅 阎青 于红缨 姚志军 向开敏
    2013, 33(8):  1028-1031. 
    摘要 ( 101 )   PDF (541KB) ( 439 )  
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    目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3(TLR3)的表达及其临床意义。方法 分别采集慢性乙型肝炎患者和健康志愿者外周血,荧光定量PCR法检测血清HBV DNA复制水平;使用RT-PCR、流式细胞术以及免疫印迹技术分别检测外周血单个核细胞TLR3的mRNA、蛋白的表达;使用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素β(IFN-β)水平。结果 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中的TLR3表达显著低于健康志愿者,且降低水平与血清HBV DNA复制水平相关;慢性乙型肝炎患者外周血TNF-α、IFN-β浓度显著低于健康志愿者,且降低的水平与血清HBV DNA复制水平相关。结论 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR3的表达与乙肝病毒的复制水平相关。
    胡桃醌通过降低AKT活性抑制肺癌A549细胞增殖
    刘元银 雷淑慧 杨燕 蒋幼凡
    2013, 33(8):  1032-1037. 
    摘要 ( 162 )   PDF (777KB) ( 648 )  
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    目的 探讨肽酰脯氨酰顺反异构酶(PIN1)抑制剂胡桃醌(Juglone)对肺癌A549细胞增殖的影响及分子机制。方法 用胡桃醌(0、6.25、12.5、25和50 μmol/L)处理A549细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及周期,Real-time PCR检测PIN1、AKT mRNA表达,Western blot检测PIN1、AKT及AKT-pS473蛋白表达。 结果胡桃醌能浓度依赖性抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在G2/M期和S期。与对照组相比,各处理组PIN1 mRNA水平随着胡桃醌浓度增加而降低(P<0.05)。不同浓度胡桃醌处理组PIN1蛋白表达为1.032±0.056、0.892±0.024、0.596±0.023和0.396±0.021,均显著低于对照组的1.280±0.046(P<0.05);AKT-pS473蛋白表达为0.554±0.023、0.464±0.018、0.362±0.015和0.228±0.020,均显著低于对照组的0.626±0.015(P<0.05);48h 处理组PIN1及AKT-pS473蛋白表达分别为0.575±0.036和0.338±0.014,显著低于24h的0.764±0.032和0.436±0.023(P<0.05)。结论 PIN1抑制剂胡桃醌可以抑制肺癌A549细胞的增殖,其机制可能是通过降低AKT-pS473活性来实现的。
    儿童与成人弥漫大B细胞淋巴瘤的Hans、Choi免疫分型和c-myc基因特征
    徐红艳 黄慧 杨文萍 黄传生 钟梅慧
    2013, 33(8):  1038-1042. 
    摘要 ( 372 )   PDF (1127KB) ( 522 )  
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    目的 探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)各年龄组的Hans、Choi免疫分型及c-myc基因特征。 方法 收集60例DLBCL临床病理资料并进行随访,其中儿童组17例、成人组43例。用免疫组化SP法观察CD10、bcl-6、MUM1、FOXP1、GCET1及CD5蛋白表达,根据Hans及Choi免疫分型标准分型;用间期荧光原位杂交法检测c-myc基因。结果 1)Hans分型:儿童DLBCL组GCB型11例,non-GCB型6例;成人组DLBCL中GCB型9例,non-GCB型34例(P<0.05)。2)Choi分型:儿童DLBCL组GCB型13 例,ABC型4例;成人DLBCL组GCB型13例,ABC型30例(P<0.01)。3)c-myc基因:儿童组DLBCL中c-myc基因断裂6例;成人组DLBCL中c-myc基因正常43例(P<0.01)。结论 儿童DLBCL以GCB型为主,预后较好;成人DLBCL以non-GCB或ABC型为主,预后相对较差,儿童DLBCL的c-myc基因断裂明显高于成人。
    HGF及G-CSF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞
    高勇 梅浙川 蒋明德
    2013, 33(8):  1043-1049. 
    摘要 ( 142 )   PDF (1459KB) ( 471 )  
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    目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)以及粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可否诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)分化为肝样细胞。方法 以贴壁法分离、培养大鼠BM-MSCs,流式细胞术鉴定表面标志。实验分为:对照组(10%FBS),0.1μmol/L G-CSF干预组,20ng/mL HGF干预组,HGF联合G-CSF共同干预组(0.1μmol/L G-CSF+20ng/mL HGF),诱导后第7天、14天和21天提取细胞总RNA以及总蛋白后进行RT-PCR和Western blot检测白蛋白(ALB)和甲胎蛋白(AFP)基因mRNA转录和蛋白水平。结果:20ng/mLHGF干预组和HGF联合G-CSF共同干预组P3代BM-MSCs诱导后细胞形态似肝样细胞。BM-MSCs表面标志物:CD34-PE 0.3%,CD45-FITC 0.1%,CD90-FITC 99.6%,CD105-PE99.8%。20ng/mLHGF干预组和HGF联合G-CSF共同干预组检测到白蛋白(ALB)和甲胎蛋白(AFP)基因mRNA转录水平及蛋白水平表达。在第7天、14天、21天,随时间增加ALB表达量递增、而AFP表达量递减,且同一时间两组表达量均有差异(P<0.05)。结论 HGF能诱导大鼠BM-MSCs分化为肝样细胞,G-CSF对HGF诱导大鼠BM-MSCs分化为肝样细胞有协同作用。
    研究短文
    胱硫醚-β-合成酶在SHR脑组织表达下调
    郭雅琼 伏晓琳 鲁彦 李宏宝 郑天珍 刘颖璐 杨圣杰
    2013, 33(8):  1050-1051. 
    摘要 ( 119 )   PDF (397KB) ( 460 )  
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    二甲双胍降低高糖高胰岛素培养的MCF-7细胞中FASN的表达
    贺晓磊 高宇 王丽红 刘晓燕 王英南 何建秋 李桂芳
    2013, 33(8):  1052-1053. 
    摘要 ( 136 )   PDF (407KB) ( 454 )  
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    短篇综述
    RAG基因与B细胞淋巴瘤
    朱威 洪旭林 余佳伟 付琴 毛峥嵘
    2013, 33(8):  1054-1058. 
    摘要 ( 352 )   PDF (876KB) ( 1018 )  
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    重组活化基因(RAG) 在介导抗原受体决定区复杂多样的DNA重组中发挥着重要作用,并可通过1)RAG综合体识别和切断Bcl-2基因致 t(14,18)易位;2)RAG1/2协同诱导激活型胞啶脱氨酶作用引起染色体易位;3)RAG2蛋白降解异常导致V(D)J 异常重排;4)EB病毒感染导致RAG1/2基因的再表达等方面促进淋巴瘤的发生。
    雌激素与基质金属蛋白酶(MMPs)
    王建军 霍洪亮
    2013, 33(8):  1059-1062. 
    摘要 ( 233 )   PDF (487KB) ( 479 )  
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    雌激素对基质金属蛋白酶的影响十分复杂,不同的组织细胞中在不同的环境下,对不同基质金属蛋白酶的作用有抑制和活化两方面效应。另外,雌激素对基质金属蛋白酶的影响还分别体现在信使RNA、蛋白的表达和活化等不同层次。
    抗菌肽在皮肤病治疗中的研究进展
    沈亮
    2013, 33(8):  1063-1066. 
    摘要 ( 159 )   PDF (565KB) ( 522 )  
    相关文章 | 计量指标
    目前研究已证明抗菌肽是皮肤上阻止潜在病原体入侵的最直接力量,基础理论研究主要集中在阳离子抗菌肽的抗菌机制,阴离子抗菌肽涉及较少。抗菌肽对各种皮肤疾病的治疗作用和较低的细菌耐药性已经越来越明确,人工合成抗菌肽也具有光明的应用前景。但是在抗菌肽真正用于疾病治疗之前,必须需要解决一些技术上的障碍。
    体外诱导干细胞向多巴胺神经元分化的研究进展
    李恒 王宏心 朱天瑞 李晓红
    2013, 33(8):  1067-1070. 
    摘要 ( 131 )   PDF (513KB) ( 507 )  
    相关文章 | 计量指标
    由于传统的药物和手术方法不能够延缓帕金森病的发展,细胞移植替代多巴胺神经元的治疗方案受到越来越多的关注。许多体外实验证实不同的诱导方案均可以促进干细胞分化为多巴胺神经元,通过对近几年的体外实验结果进行综述,有利于探讨诱导方法和细胞来源的选择,促进干细胞移植技术转化应用于帕金森氏病的临床治疗。
    树突状细胞在胃癌中的研究进展
    续文婷 杨桢 吕农华
    2013, 33(8):  1071-1074. 
    摘要 ( 118 )   PDF (528KB) ( 628 )  
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    树突状细胞为目前功能最强的抗原呈递细胞,是抗原捕获和抗原递呈途径中的一个关键的细胞群。树突状细胞不仅与胃癌的发生、进展及预后有关,其在胃癌治疗方面的应用也得到了肯定。
    医学教育
    人体解剖教学与临床结合初探
    刘克 刘伟 李文婷 申新华 张恩辉 曹承刚 马超
    2013, 33(8):  1075-1078. 
    摘要 ( 162 )   PDF (595KB) ( 630 )  
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    为配合解剖教学改革,解剖学系在教学中提出了人体解剖教学与临床全方位结合的教学体系,通过转变教学理念、调整教学安排、实行多样化教学方式和与国外一流医学院校交流等措施,并开展了“面向临床的解剖学讲座”,不仅巩固了解剖学教学内容,还强调了所学知识在临床中的应用,初步取得了良好的效果。