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    2022年 第42卷 第6期    刊出日期:2022-06-05
    上一期   
    研究论文
    基于CRISPR/Cas9系统高效编辑小鼠miR let-7a
    周岚 张生贵 胡祖梁 王添贤 岳鹏鹏 于鸿浩
    2022, 42(6):  857-863. 
    摘要 ( 51 )   PDF (4334KB) ( 41 )  
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    目的 构建靶向小鼠miR let-7a的高效CRISPR/Cas9系统。方法 根据小鼠miR let-7a的两个编码位点let-7a-1和let-7a-2的编码序列各设计了两对dual-sgRNAs导向序列,通过sgRNA表达载体的构建、小鼠N2a细胞的共转染、药物筛选、阳性细胞PCR产物测序以及TA克隆测序分析等实验步骤完成了4对dual-sgRNAs导向序列的打靶效力分析。结果 所构建的4对打靶载体在细胞中发挥了作用,打靶位点均出现了碱基插入或缺失,药筛阳性细胞打靶位点RCR产物Sanger法测序峰图在4个靶点位置均有套峰出现。TA克隆测序结果表明本研究设计的4对 dual-sgRNAs导向序列的打靶效率分别为42.10%、62.5%、52.63%和47.37%。 结论 本研究所设计的4对dual-sgRNAs导向序列均可以有效介导Cas9 蛋白切割小鼠 miR let-7a,形成突变效应。为后续miR-let-7a 作用靶点的深入挖掘,阐明其发挥抑癌功能的作用机制提供了基础。
    肝细胞癌中EZH2基因相关的表观遗传调控机制
    赵钰珊 冀梦蝶 董昱诚 郭鑫 宋博渊 陈阳
    2022, 42(6):  864-870. 
    摘要 ( 35 )   PDF (4130KB) ( 26 )  
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    目的 结合肝细胞癌公共数据分析与生物实验,初步探索肝细胞癌中EZH2基因的表观遗传调控机制。方法 首先,使用TCGA公共数据分析EZH2基因表达与肝细胞癌进展和预后之间的关系。随后,使用ATP细胞活性检测法、结晶紫法分析EZH2抑制剂GSK343对肝细胞癌细胞系HepG2细胞活性和增殖的影响。之后,分析TCGA公共数据样本中EZH2高表达组和低表达组之间的差异表达基因。其后,使用ENCODE中的ChIP-seq公共数据分析EZH2下游靶基因转录起始位点上的组蛋白修饰特征。最后,用RT-qPCR检测受到EZH2调控的下游靶基因的基因表达。 结果 EZH2基因表达与肝细胞癌1~3期的病程进展显著相关(P<0.05);生存分析表明EZH2基因高表达与肝细胞癌预后不良显著相关 (P<0.05);EZH2抑制剂能够显著抑制肝细胞癌细胞系HepG2的体外细胞活力和增殖能力(P<0.05);EZH2结合的基因转录起始位点上富集组蛋白修饰H3K27me3;163个基因在其转录起始位点附近存在EZH2结合信号,同时这些基因也在EZH2高表达组和低表达组之间显著差异表达;实验验证ADRA1A是EZH2的下游靶基因。结论 在肝细胞癌中EZH2基因可以通过表观遗传调控影响其下游靶基因的表达。
    外周血miR-200c水平对移植异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病发生的预测作用
    武坤 聂波 李云涛 杨金荣 程沈菊 李艳红 史明霞
    2022, 42(6):  871-875. 
    摘要 ( 29 )   PDF (527KB) ( 14 )  
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    目的 探讨外周血miR-200c水平对移植异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生的预测作用。方法 选择2014年1月至2018年10月在院血液科行异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)患者的51例患者作为研究对象,根据移植后是否发生aGVHD原则分为实验组(发生aGVHD)33例、对照组(未发生aGVHD)18例。抽取肘部外周血5mL,RT-qPCR检测两组miR-200c,分析两组miR-200c表达差异。结果 两组患者均移植成功,且恢复造血功能,恢复时间为18d,其中33例发生aGVHD。18例为发生aGVHD,发生率为64.71%;实验组在移植前、移植后7 d、14 d、及72 d时,miR-200c表达均低于对照组(P<0.05);aGVHD发生后外周血中miR-200c显著低于发生前(P<0.001);与aGVHD I度相比,aGVHD II度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.05),与II度相比,aGVHD III度患者外周血中miR-200c表达下调(P<0.001);miR-200c高表达组患者2年总生存率高于低表达组(P<0.05);miR-200c对aGVHD疾病产生诊断价值较好。结论 miR-200c水平降低与异基因造血干细胞移植后aGVHD的发生相关;随着aGVHD严重程度升高miR-200c表达水平降低,miR-200c低表达患者生存率较差。可作为早期诊断和预测aGVHD的标志物。
    小鼠乳腺癌干细胞免疫相关分子表达和免疫浸润的分析
    李昱阳 李钊璇 罗云萍 陈翀
    2022, 42(6):  876-882. 
    摘要 ( 29 )   PDF (1658KB) ( 22 )  
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    目的 分析小鼠乳腺癌干细胞(BCSCs)中免疫相关分子的表达和肿瘤组织中免疫细胞的浸润。方法 用成球培养的方法在体外富集小鼠乳腺癌细胞系 4T1 和 4T07 的肿瘤干细胞(CSCs);用实时定量 PCR 检测BCSCs中免疫检查点与抗原递呈相关基因的表达;用小鼠乳腺癌原位移植瘤模型和流式细胞测量术分别检测脾脏和肿瘤组织中各类免疫细胞的比例。结果 用成球培养的方法可以成功富集小鼠乳腺癌干细胞4T1和4T07;与贴壁培养的肿瘤细胞相比,小鼠BCSCs中免疫检查点和抗原递呈相关基因的表达有明显差异(P < 0.05)。体内的结果表明,与贴壁肿瘤细胞来源的肿瘤组织相比,肿瘤干细胞来源的肿瘤组织中浸润更多的 CD4+ T和 CD8+ T 细胞(P < 0.05),但是 CD11b+ F4/80+ 的巨噬细胞浸润更少(P < 0.05)。结论 小鼠BCSCs中免疫检查点与抗原递呈相关基因的表达有改变,且在体内可招募更多的 T 细胞到肿瘤组织中去。
    葡聚糖结合蛋白的原核表达及检测深部真菌感染的应用
    朱李茹 黄友明 章宏祥 周发友 唐晓磊
    2022, 42(6):  883-889. 
    摘要 ( 21 )   PDF (1031KB) ( 43 )  
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    目的 验证葡聚糖特异性的结合蛋白用于检测深部真菌感染(IFI)患者血清中(1,3)-β-D-葡聚糖的应用价值。方法 通过构建美洲鲎葡聚糖结合蛋白(GBP)活性区域——pET30a-GBP252-668表达质粒,诱导表达并纯化获得GBP252-668重组蛋白。随后通过棋盘法构建双GBP252-668夹心法,并以此检测IFI患者血清中(1,3)-β- D-葡聚糖。同时与G试验(G-Test)进行检测性能的比对。 结果 成功纯化获得分子量约为46ku的GBP252-668重组蛋白,并确定最佳包被浓度和检测浓度分别为8和16 g/L,以此构建了GBP252-668夹心法。对48名深部真菌感染患者和48名健康人血清进行检测,根据受试者工作特征曲线( ROC)可得其灵敏度为 91.67%,特异度为89.58%。其灵敏度与G-Test相当,特异性高于同批次G-Test:79.17%。 结论 双GBP夹心法是一种较为有潜力的侵袭性真菌检测方法,其灵敏度与G-Test相当,特异性高于同批次G-Test,有望开发为一种新型的侵袭性真菌感染检测试剂盒。
    非酒精性脂肪肝病模型小鼠的肝脏病理变化及肝细胞获取方法
    史冬雪 原佳琪 丁宝锋 王小爽 余佳
    2022, 42(6):  890-895. 
    摘要 ( 32 )   PDF (4215KB) ( 26 )  
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    目的 检测非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠的肝脏病理变化,并探索一种获得大量高活性、高纯度的NAFLD小鼠原代肝细胞的实验方法。方法 60只小鼠随机分为正常组(正常饲料,CD)和高脂组(高脂饲料,HFD),分饮食饲养20周。定期检测小鼠的体质量,苏木精-伊红(HE)染色和天狼猩红染色观察肝脏组织病理特点。高脂饮食15周时,原位灌注Ⅳ型胶原酶6-8mL消化得到混合肝细胞,铺于40%的Percoll分离液上,进行密度梯度离心获得纯化的肝细胞,台盼蓝染色确定细胞的活性,显微镜观察其形态。 结果 随着建模时间的延长,HFD组小鼠的体质量逐渐增加,且增幅显著高于CD组;HFD组小鼠肝脏脂肪变性程度增加,在第20周伴随出现了纤维化;建模15周时,每只 NAFLD 小鼠可获得5×107~7×107个肝细胞,细胞存活率≥85%,细胞纯度≥95%,细胞呈圆形或椭圆形,其边缘平滑,且聚团少;通过精准控制温度、降低胶原酶浓度、使用低速离心和低速密度梯度离心等优化条件后,获得的细胞数量和质量均有显著提高。 结论 成功构建了NAFLD小鼠模型,并揭示了不同疾病阶段肝脏的病理特点。探索了一种高效、稳定的获取NAFLD小鼠原代肝细胞的方法。所得肝细胞的数量和活性都符合大多数实验的要求。
    稳定表达CDC50A的卵巢癌细胞株的建立及鉴定
    韩甜甜 尹婕 曾靖 金滢 李艳 潘凌亚
    2022, 42(6):  896-901. 
    摘要 ( 21 )   PDF (3052KB) ( 17 )  
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    目的 以分子克隆技术建立稳定表达人细胞周期调控蛋白50A(CDC50A)的SKOV3细胞株。方法 通过分子克隆技术将CDC50A定向连接到表达载体pLVX-IRES-GFP上。pLVX-CDC50A-GFP表达质粒经慢病毒包装,稳定转染SKOV3,建立稳定表达CDC50A的SKOV3细胞株,通过流式细胞测量术、免疫印迹、免疫荧光分析其Flag标签蛋白表达。结果 通过电泳及酶切鉴定证实了pLVX-CDC50A-GFP表达载体的构建,荧光显微镜定性观察病毒感染效率,流式细胞测量术检测感染效率为86.5%,免疫印迹法只检测到pLVX-CDC50A-GFP表达质粒的SKOV3细胞株有Flag标签蛋白表达,阴性对照组无蛋白表达。结论 成功构建了CDC50A的表达载体,并通过慢病毒感染建立了过表达CDC50A的SKOV3细胞株,为开展CDC50A在卵巢癌中的机制研究奠定了基础。
    优化近乎PAM-less腺嘌呤碱基编辑器提升编辑效率
    周小钰 王晓月
    2022, 42(6):  902-907. 
    摘要 ( 23 )   PDF (2335KB) ( 33 )  
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    目的 探究替换近乎PAM-less 腺嘌呤碱基编辑器(ABE)不同元件对其编辑效率的影响。方法 在SpRY-ABEmax中,以Tad-8e替换ABEmax构建SpRY-ABE8e,在此基础上将Cas9蛋白变体SpRY与Tad-8e之间的连接肽3xGGS-XTEN-3xGGS改为长度缩短的PAPAPA连接肽。将ABEs和sgRNA表达质粒共转染人胚肾细胞HEK 293T,24 h后加入1.5μg/mL嘌呤霉素并于72 h后通过流式分选表达绿色荧光蛋白的细胞,提取细胞基因组并使用PCR扩增技术在预期产生编辑的位点进行扩增,采用sanger测序并使用Beat工具预估各个位点编辑效率情况。结果 与对照组SpRY-ABEmax相比, SpRY-ABE8e编辑效率提升,编辑窗口也扩大(P<0.05);通过使用长度缩短的连接肽可以在保持编辑效率提升的同时限制SpRY-ABE8e的编辑窗口。结论 可通过替换PAM-less ABE不同元件来提升编辑效率,这将为今后基因治疗提供更多的工具选择。
    绞股蓝皂苷减轻脂多糖诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12损伤
    姜秀芳 耿亚楠 阳盛洪 魏平 赵名 朱玲玲
    2022, 42(6):  908-912. 
    摘要 ( 18 )   PDF (761KB) ( 18 )  
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    目的 探讨绞股蓝皂苷对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤的保护作用及其机制。方法 LPS处理PC12细胞建立神经元炎性损伤模型;实时定量PCR检测炎性因子表达,CCK-8法检测细胞活力,蛋白印迹检测NF-κB蛋白。结果 不同剂量(0, 100, 300和1000 ng/mL)的LPS刺激PC12细胞12h后,TNF-α,IL-6和IL-1β mRNA水平随剂量的增加而逐渐升高。LPS导致细胞活力下降到85.7%,不同浓度绞股蓝皂苷(30, 100 μg/mL)预处理细胞6 h后,30和100 μg/mL绞股蓝皂苷能够使细胞活力分别恢复至96.2%和97.9%。绞股蓝皂苷预处理后,LPS诱导的TNF-α,IL-6和IL-1β的mRNA水平升高都受到不同程度的抑制。LPS刺激导致NF-κB通路信号蛋白p65的磷酸化(p-p65)水平上调,但绞股蓝皂苷预处理能够使升高的p-p65下调。结论 绞股蓝皂苷通过抑制NF-κB信号通路减轻LPS诱导的PC12细胞炎性反应,从而起到保护神经元损伤的作用。
    LncRNA SNHG14调控miR-142-5p对寡聚态Aβ诱导的鼠源神经细胞系PC12损伤的影响
    沈杰 严洁 钟明 庞睿娟 罗永杰
    2022, 42(6):  913-919. 
    摘要 ( 19 )   PDF (961KB) ( 12 )  
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    目的 探讨lncRNA SNHG14靶向miR-142-5p对寡聚态Aβ诱导的鼠源神经细胞系PC12损伤的影响。方法 将PC12细胞分为对照组、模型组、模型+si-NC组、模型+si-SNHG14组、模型+miR-NC组、模型+miR-142-5p组、模型+si-SNHG14+ anti-miR-NC组、模型+ si-SNHG14+anti-miR-142-5p组。RT-qPCR检测SNHG14和miR-142-5p水平。CCK-8和流式细胞术测量细胞增殖抑制率和凋亡率。ELISA检测培养液中TNF-α、IL-6和IL-10水平。双荧素酶报告实验确定SNHG14和miR-142-5p的靶向关系。结果 AD患者血浆中SNHG14呈高表达(P<0.05),miR-142-5p呈低表达(P<0.05)。与对照组比较,模型组细胞SNHG14水平、增殖抑制率、凋亡率显著升高(P<0.05),miR-142-5p水平显著降低(P<0.05),培养液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.05),IL-10水平显著降低(P<0.05)。与model+si-NC组比较,model+si-SNHG14组细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低(P<0.05),培养液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05),IL-10水平显著升高(P<0.05)。与model+miR-NC组比较,model+miR-142-5p组细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低(P<0.05),培养液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05),IL-10水平显著升高(P<0.05)。miR-142-5p是SNHG14的直接靶点。与model+si-SNHG14+ anti-miR-NC组比较,model+ si-SNHG14+anti-miR-142-5p组细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高(P<0.05),培养液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.05),IL-10水平显著降低(P<0.05)。结论 沉默SNHG14通过靶向促进miR-142-5p表达能够减轻寡聚态Aβ诱导的神经细胞损伤。
    核转录因子NFYB和NFYC促进红系终末分化
    余东林 杨希 阴佳滢 刘雪会 吕湘
    2022, 42(6):  920-926. 
    摘要 ( 20 )   PDF (4513KB) ( 28 )  
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    目的 利用单细胞转录组数据分析挖掘红系终末分化的潜在转录因子,并重点对预测得到的核转录因子NFYB和NFYC在红系终末分化中的表达和功能进行探究。方法 使用人骨髓红系终末分化单细胞转录组数据,结合SCENIC分析预测分化阶段特异性转录调控因子。利用公共测序数据集重点分析预测出的NFYB和NFYC在人与小鼠红系终末分化不同阶段中的表达;流式分选小鼠胎肝体外红系终末分化各阶段的细胞,检测Nfyb和Nfyc的表达水平。在小鼠胎肝红系分化体系中使用慢病毒感染,分别敲低Nfyb和Nfyc,检测红系终末分化及脱核的变化。结果 通过SCENIC分析预测出NFYB和NFYC是红系终末分化早期的调控因子,在人与小鼠的红系终末分化早期表达较高,晚期则降低。在小鼠胎肝体外红系分化体系中分别敲低Nfyb和Nfyc,均可显著抑制红系终末分化及脱核。结论 NFYB和NFYC促进红系终末分化过程。
    冈田酸诱导人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y损伤
    路亚岚 周澧 韩云林 王克维 秦川
    2022, 42(6):  927-932. 
    摘要 ( 20 )   PDF (4763KB) ( 22 )  
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    目的 探索冈田酸(OA)诱导神经元微管蛋白相关蛋白(Tau)异常磷酸化对人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)细胞损伤的影响。方法 将OA按照不同浓度(20和40 nmol/L)和/或时间(0、12、24、48和72 h)处理SH-SY5Y细胞;光学显微镜下观察细胞形态学;透射电子显微镜观察细胞超微结构;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot检测p-Tau和caspase3蛋白的表达;RT-qPCR检测细胞细胞凋亡抑制家族蛋白(IAPs)的mRNA表达。结果 与对照组相比,OA显著增加SH-SY5Y细胞Tau蛋白磷酸化(P<0.001),促进细胞损伤凋亡(P<0.001),损伤线粒体结构,同时也可显著上调IAPs表达(P<0.05)。结论 OA诱导的SH-SY5Y细胞的Tau蛋白异常磷酸化可导致细胞损伤凋亡,抑制内源凋亡通路或上调IAPs可能作为阿尔兹海默病(AD)防治的重要靶标。
    高通量筛选NMNAT1抑制剂及其肿瘤杀伤作用
    沙务嘎 李隽
    2022, 42(6):  933-939. 
    摘要 ( 23 )   PDF (3122KB) ( 56 )  
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    目的 利用在大肠杆菌体系诱导表达的人源NMNAT1蛋白筛选其抑制剂,寻找治疗肿瘤的新药物。 方法 利用酶切连接体系将人源NMNAT1基因插入pET21b(+)载体,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株过表达蛋白,对重组蛋白进行纯化,通过3段式酶联荧光法在2280种天然化合物中筛选具有抑制NMNAT1活性的化合物,并在细胞水平验证其对肿瘤细胞的杀伤效果。结果 纯化得到较高纯度和活性的人重组NMNAT1蛋白;筛选出6种高效的NMNAT1抑制剂;其中一种抑制剂Fraxetin能降低乳腺癌细胞NAD+含量,促进细胞凋亡,与敲低NMNAT1后RNA-seq分析得出的细胞凋亡通路增强一致。结论 Fraxetin是NMNAT1强效抑制剂,能够促进乳腺癌细胞凋亡。
    下调lncRNA RHPN1-AS1抑制人膀胱癌细胞系T24增殖和迁移
    白冰 张海芳 杨庆良 秦悦 周晨龙 宋歌 王颖
    2022, 42(6):  940-944. 
    摘要 ( 17 )   PDF (904KB) ( 13 )  
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    目的 探讨干扰lncRNA RHPN1-AS1对膀胱癌细胞系T24生物学行为的影响及作用机制。方法 用RT-qPCR检测膀胱癌组织与癌旁组织中RHPN1-AS1、miR-149-3p的表达;分别将si-NC、si-RHPN1-AS1、si-RHPN1-AS1与anti-miR-NC、si-RHPN1-AS1与miR-149-3p inhibitor转染至T24细胞;用RT-qPCR检测细胞中RHPN1-AS1、miR-149-3p的表达平;MTT法、平板克隆形成实验、划痕实验、流式细胞测量术分别检测细胞增殖、迁移能力及细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验检测RHPN1-AS1与miR-149-3p的靶向关系;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。 结果 与癌旁组织比较,膀胱癌组织中RHPN1-AS1的表达水平升高(P<0.05),miR-149-3p的表达水平降低(P<0.05);与si-NC组比较,转染si-RHPN1-AS1可明显降低细胞增殖能力、划痕愈合率及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),减少克隆形成数(P<0.05),提高凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实RHPN1-AS1可靶向结合miR-149-3p;与si-RHPN1-AS1+anti-miR-NC组比较,转染si-RHPN1-AS1与miR-149-3p inhibitor可明显提高细胞增殖能力、划痕愈合率及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),增加克隆形成数(P<0.05),降低凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05)。结论 干扰RHPN1-AS1表达可通过上调miR-149-3p从而抑制膀胱癌细胞增殖、迁移及促进细胞凋亡。
    临床研究
    抑郁症状增加中国老年人跌倒风险
    刘延丽 赵瑞雪 潘燕 马雅军 赵暾 蒋晓燕 李淑娟
    2022, 42(6):  945-949. 
    摘要 ( 25 )   PDF (343KB) ( 13 )  
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    目的 探讨抑郁症状是否为中国老年人跌倒的潜在危险因素。方法 数据取自如皋长寿和衰老研究的子队列,通过简版老年抑郁量表(GDS-15)评估老年人抑郁情况,收集并记录研究对象于2014年基线及2017年随访时的跌倒发生情况。根据抑郁情况,将研究对象分为“抑郁”组和“非抑郁”组,比较组间一般资料及跌倒发生情况;应用logistic回归分析抑郁是否增加老年人跌倒风险。结果 横断面研究纳入1548例研究对象,跌倒的发生率为8.3%。“跌倒”组研究对象年龄较大、受教育程度较低以及认知障碍者所占比重更高;与“非抑郁”组相比,“抑郁”组女性、务农、受教育程度较低、非在婚、不吸烟、不饮酒以及认知障碍者所占比例更高;在调整混杂因素后,抑郁与老年人基线及3年后跌倒发生风险增高均相关(P<0.05)。结论 在中国社区老年人群中,抑郁症状是跌倒的潜在危险因素。
    小剂量艾司氯胺酮联合右美托咪定在老年患者椎体成形术中麻醉中的应用
    任海强 李雷 杨旺燕 杜鹃 姜丹丹 闫莉 傅润乔
    2022, 42(6):  950-954. 
    摘要 ( 19 )   PDF (343KB) ( 15 )  
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    目的 探讨艾司氯胺酮联合右美托咪定用于老年患者行椎体成形术(PVP)中静脉镇痛、镇静的麻醉效果。方法 选择2021年3月至2021年11月行椎体成形术的72例、年龄70~90岁老年患者,按照随机数字表法将其分为对照组(SF-DEX , n=36)和实验组(EK-DEX, n=36), 实施安定镇痛麻醉。所有患者静脉泵注右美托咪定0.5 μg/kg(10 min)。俯卧位后,SF-DEX组静注舒芬太尼5 μg(1 μg/mL),然后持续右美托咪定0.5 μg/(kg·h)维持至手术结束前5 min;EK-DEX组静注负荷量艾司氯胺酮0.1 mg/kg(1 mg/mL),然后持续泵注0.1 mg/(kg·h)至手术结束前5 min。分别记录在给药前(T1)、手术开始(T2)、灌注骨水泥(T3)、术毕(T4)4个时点的循环指标(SAP、DAP、MAP、HR)、呼吸指标(SpO2)、BIS变化、疼痛程度(VAS评分)、镇静状态(Ramsay评分)及血压波动幅度、是否心律失常、 SpO2下降幅度等情况。结果 SF-DEX组在T3较T1时SAP、MAP 明显降低(P < 0.05);T2、T3时Ransay评分均升高(P < 0.05);EK-DEX组在T2、T3时 VAS评分明显低于SF-DEX组(P < 0.05);EK-DEX组在T3时 Ransay评分明显高于SF-DEX组(P < 0.05)。两组术后未见低血压,心率减慢,氧饱和度降低等不良反应及并发症。结论 应用小剂量艾司氯胺酮联合小剂量右美托咪定能够在老年甚至高龄患者椎体成形术(PVP)围术期产生良好镇静镇痛效果,无明显并发症,是一种安全可行的方法。
    孕中期血清唐氏综合征筛查与不良妊娠结局关联
    王战勇 徐静 梁燕 岳育红
    2022, 42(6):  955-959. 
    摘要 ( 19 )   PDF (331KB) ( 7 )  
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    目的 研究孕中期唐氏综合征筛查与不良妊娠结局关联;甲胎蛋白(AFP),β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG),游离雌三醇(uE3)单个指标与不良妊娠发生的关联。方法 采用连续性入组方法选取2014年3月31日至2021年4月29日之间在北京朝阳医院进行唐氏综合症筛查的孕妇进行回顾性队列研究。结果 在7 682例孕妇中,筛查高风险者492例,占6.40%;共有100例孕妇出现了不良妊娠结局(1.30%)。筛查高风险孕妇中有21例发生不良妊娠结局,发生率为4.27%,显著高于筛查低风险者(1.10%)。调整了糖尿病史、遗传病家族史、吸烟、饮酒后,与低风险值相比,筛查高风险者发生不良妊娠结局的可能性高达4.022倍(95%CI:2.405-6.442));21三体风险值越高,不良妊娠结局的发生率越高(P<0.001)。筛查高风险组在胎儿畸形、染色体异常、胎停育的发生率显著高于低风险组(P<0.05)。AFP原始数值每升高1 ng/mL,发生不良妊娠结局的可能性上升到1.019倍;AFP 中位数倍数值(MOM)每升高1,发生不良妊娠结局的可能性上升到2.258倍;uE3原始数值每升高1 ng/mL或uE3 中位数倍数值每升高1,发生不良妊娠结局的可能性均可下降一半。结论 孕中期唐氏综合征筛查高风险与胎儿畸形、染色体异常、胎停育等不良妊娠有提示作用;AFP高水平和uE3低水平可增加不良妊娠结局的发生。
    短篇综述
    薯蓣皂苷防治原发性骨质疏松的研究进展
    谢兴文 钟建春 李鼎鹏 黄睿 李宁 郭云龙 翟伯宇
    2022, 42(6):  960-963. 
    摘要 ( 43 )   PDF (367KB) ( 33 )  
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    薯蓣皂苷具有较强的抗感染、抗病毒、降脂、抗癌、降糖、抗血栓、抗衰老和保肝等作用活性,可通过延迟氧化应激保护心脏细胞免受缺血/再灌注损伤,成为治疗冠心病和心绞痛的补充及替代临床药物之一。近年来的研究表明,薯蓣皂苷通过抑制RANKL诱导的破骨细胞分化和促进成骨细胞分化来防治OP。本文综述了薯蓣皂苷在抑制破骨细胞、促进成骨及相关信号通路方面防治骨质疏松的研究进展,以期为薯蓣皂苷与药食同源在OP防治中的临床应用提供思路。
    炎性细胞因子在肌萎缩侧索硬化诊断治疗中的研究进展
    李晓光 杨璐 刘旭东 贾鑫淼 程燕飞 崔丽英
    2022, 42(6):  964-968. 
    摘要 ( 41 )   PDF (359KB) ( 43 )  
    相关文章 | 计量指标
    肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种多个基因参与的复杂疾病,涉及多种机制。神经炎性反应是其中机制之一,有许多炎性细胞因子参与,其有可能作为生物标志物及治疗靶点应用于临床。突变基因编码的许多蛋白质可损害免疫系统功能,导致免疫功能失调,驱动中枢神经系统和外周免疫系统的炎性反应。炎性细胞因子种类较多,水平变化较大,受疾病阶段、类型及共病影响,目前在ALS中的结果尚不一致,无单一炎性细胞因子可做为特异标志物。炎性细胞因子做为治疗监测标志物及靶点有一定前景。
    功能基因筛选和鉴定策略的研究进展及其优缺点
    刘旭 常德 王俊锋
    2022, 42(6):  969-974. 
    摘要 ( 27 )   PDF (359KB) ( 39 )  
    相关文章 | 计量指标
    筛选和鉴定功能基因是研究各种生物学表型发生分子机制的关键步骤,也是人类后基因组时代主要研究内容之一。传统遗传学、全基因组关联分析、表达谱差异、基因组测序、生物信息学等基于正向遗传学的筛选方法和cDNA文库、RNA 干扰、CRISPR/Cas9技术、插入突变、模式生物等基于反向遗传学的筛选策略已被应用于功能基因的筛选,各种技术方法各有优缺点,常可联合使用,优势互补。
    西藏自治区医院检验科文献发表现状
    边珍 尼玛顿珠 秦绪珍
    2022, 42(6):  975-978. 
    摘要 ( 19 )   PDF (506KB) ( 7 )  
    相关文章 | 计量指标
    目的 分析西藏自治区检验科近40年来科研论著发表情况,总结自治区科研发展现状。方法 以作者单位“西藏”、“检验科”作为检索词,在万方数据库中搜索1980年至今发表的文献,采用EXCEL软件从年度分布、来源期刊、机构分布情况、科研基金、第一作者为藏族文章比例、关键词词频等方面进行统计分析。 结果1980年至2020年以西藏为主题,检验科总共发表297篇文献,文献数量自2001年后逐年增长;核心期刊不足30%;文献发表的单位以西藏两大三级甲等医院为主;1%的文献受到了各级科研基金的资助;第一作者为藏族的文章比例仅占28%。结论 近几十年来西藏检验科文献发表数量有了明显改进,但还需要进一步提升。
    碘与代谢综合征相关性的研究进展
    许晓双 闵行 叶月 郭梦然 甄东户
    2022, 42(6):  979-982. 
    摘要 ( 25 )   PDF (331KB) ( 39 )  
    相关文章 | 计量指标
    代谢综合征(Mets)是一系列心血管疾病的高危因素。碘营养状态的改变可直接介导胰岛素抵抗的发生,影响糖脂代谢及血压水平的调节,亦可通过调节甲状腺功能间接参与Mets的发病过程。探索碘在Mets发生发展中的作用,可为预防和治疗Mets提供新的思路。
    饮食作用的肠道菌群-免疫轴与高血压相关性的研究进展
    王振花 李潮生
    2022, 42(6):  983-987. 
    摘要 ( 22 )   PDF (353KB) ( 22 )  
    相关文章 | 计量指标
    不同膳食结构可以改变肠道菌群,影响其代谢产物,进而调节免疫参与高血压发生发展。近年来,以肠道菌群为靶点,通过调节免疫炎性反应影响血压的膳食干预开始被探索,以期为高血压的防治提供新靶点和新思路。
    医学教育
    机器人辅助全膝关节置换术设计结合3D打印高仿真教学模型模拟手术在研究生教学中的应用
    黄莹 罗文浩 范彧 林进
    2022, 42(6):  988-993. 
    摘要 ( 14 )   PDF (2008KB) ( 49 )  
    相关文章 | 计量指标
    全膝关节置换术(TKA)是骨科研究生学习的难点、重点。TKA手术精准度要求高,研究生对手术理解困难,加之手术操作难度大、学习周期长,而研究生实际操作机会少,TKA在研究生教学中开展受限。目前,随着机器人辅助手术和3D打印技术在临床中的应用,有望解决这一问题。本文提出借助机器人辅助系统完成手术设计并结合3D打印高仿真教学模型进行模拟手术,并应用于研究生教学中,旨在探讨其解决上述临床教学矛盾的可行性。
    Q-TRUST临床沟通课程在急诊科新员工培训中的效果
    刘安雷 朱华栋 彭华 郭娜 韩红 杨惊 李毅
    2022, 42(6):  994-998. 
    摘要 ( 17 )   PDF (354KB) ( 23 )  
    相关文章 | 计量指标
    目的:探讨Q-TRUST临床沟通课程在急诊科员工培训中的应用效果。方法:选取北京协和医院急诊科2019年10月至2021年9月新入科人员为试验组,2017年10月至2019年9月新入科人员为对照组,每组60人共计120人。对照组采用传统集中培训,试验组采用Q-TRUST临床沟通培训,采集两组学员基本信息,培训后进行沟通理论考核,调取两组培训后2年内科室患者满意度及纠纷投诉结果,通过问卷调查得出试验组培训效果评价。结果:两组学员年龄、学历等均无差异;试验组沟通理论考核成绩(84.10±5.27)分,显著优于对照组的(72.23±4.48)分(P<0.05);试验组培训后患者就医满意度得分为(97.29±1.52)分,医疗投诉例数为15例;对照组培训后患者就医满意度为(90.75±1.56)分,医疗投诉例数为24例,试验组显著优于对照组(P<0.05)。试验组Q-TRUST培训总体效果评分(9.43±0.59)分,符合需求度评分(9.35±0.80)分;表明试验组学员对Q-TRUST培训课程满意,需求评价高。如何快速建立信任得分(9.72±0.45)分,如何告知坏消息(9.58±0.50)分,如何提高谈话效率(9.55±0.22)分,早期识别高危沟通患者(9.47±0.87)。在试验组的反馈中,100%沟通技巧得到提升、93.3%解决纠纷能力得到提升、90%沟通效率及建立信任方面得到了提升、86.7%识别高危患者能力得到提升、83.3%礼仪方面得到提升。
    网络录播课程与在线答疑相结合在研究生医学影像学教学中的应用
    丁宁 张大明 苏童 徐佳 贾雪妍 薛华丹 金征宇
    2022, 42(6):  999-1003. 
    摘要 ( 16 )   PDF (717KB) ( 19 )  
    相关文章 | 计量指标
    目的 前瞻性设计并评估网络录播课程与在线答疑相结合在研究生医学影像学课程教学中的效果,拟为未来影像医学网上课程提供更多的经验。方法 纳入2020年春季学期课程学员19人,以在线问卷调查收集各堂课程前知识技能掌握程度自我评估、各堂课程后自我评估、答疑环节参与程度、现场\在线\录播+答疑课程主观评价,收集数据并进行分析比较。结果 全部16节课程学习后的知识技能掌握程度都显著高于课程前(p<0.01),学生客观考试平均分数为44.2±7.0,学生在答疑环节的参与度平均分数为3.79±0.92,答疑参与度与最终客观题目考试分数之间没有显著相关性。学生对答疑环节必要性的评价平均得分4.47±0.90,学生对传统课堂的主观感受平均分高于远程虚拟课堂,但是两者之间没有统计学意义(p=0.802)。结论 医学影像学录播课程结合在线答疑的网络课堂形式对于提高学员相应知识技能是有明显效果的,线上答疑环节可以提高学生的参与度,调动学习积极性。
    规范化培训体制下专业型医学硕士研究生综合能力的培养
    周梦馨 陈跃鑫 杨波
    2022, 42(6):  1004-1006. 
    摘要 ( 16 )   PDF (309KB) ( 6 )  
    相关文章 | 计量指标
    医学专业型研究生进入了“双轨制”培养模式,为了帮助医学专业型硕士研究生更好地完成住院医师规范化培训和研究生科研学习任务,为社会主义现代化建设培养高素质医学人才,本文将从临床能力培养、科研创新能力培养和综合素质培养三个方面浅谈在住院医师规范化培训制度下医学专业型硕士研究生的综合能力培养措施。
    COVID-19疫情下核医学临床教学的困境与调整
    戴玉慧 陈永辉 景红丽 霍力
    2022, 42(6):  1007-1009. 
    摘要 ( 14 )   PDF (317KB) ( 9 )  
    相关文章 | 计量指标
    分析疫情防控常态化下,核医学实习生、研究生和进修生在临床学习中所面临的困难与挑战,对北京协和医院核医学科实施的一系列临床教学改革措施进行阐述。疫情期间,本科实习生、临床研究生和进修生(“三生”)在临床实践过程面临各种困境,并且产生了恐惧、焦虑以及抑郁等各种心理问题。因此,核医学科以学生需求为导向根据疫情防控要求不断对教学方案做出相应的调整,在安全的前提下,保证了教学的质量和学生的身心健康。
    医学管理
    践行“未来最值钱的三件事”对老年人身心健康的意义
    李斌 刘婷婷 赫莉
    2022, 42(6):  1010-1012. 
    摘要 ( 15 )   PDF (295KB) ( 6 )  
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    “未来最值钱的三件事”是2021年北京两会上提出的与健康相关的议题:第一件是我很健康,因为不会拖累家人;第二件是我能让别人健康,能体现出生命的价值;第三件事是我走在传播健康的路上,生命才更有意义。我们认识的无论本单位的老师们或是其他的前辈,他们都能做到,在给予需要的人帮助时,他们内心非常地满足。离退休在家的老年人能够拥有一个健康的身体,是人人向往的,况且他们还帮助别人更加健康地生活,这种大爱源于他们懂得珍惜当下与感恩将来。