13C-葡萄糖钳夹实验评估小鼠胰岛素敏感性
曹可欣, 刘卓航, 姜懿珅, 孙旭, 陈洁
2025, 45(4):
442-449.
doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2025.04.0442
摘要
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计量指标
目的 建立13C同位素标记的高胰岛素正血糖钳夹模型用以评估小鼠胰岛素敏感性。方法 高脂喂养建立小鼠胰岛素抵抗模型,检测胰岛素下游信号蛋白激酶,即Akt的磷酸化水平;使用葡萄糖耐量试验,胰岛素耐量试验和丙酮酸耐量试验检测小鼠血糖的变化,计算三者曲线下面积以量化血糖水平在2 h内的总体变化;通过小鼠颈静脉插管手术和13C同位素标记的高胰岛素正血糖钳夹实验,监测小鼠血糖并计算葡萄糖灌注速率;收集小鼠尾静脉血清进行液相色谱串联质谱分析,计算葡萄糖清除速率和肝脏糖异生速率;抑制小鼠糖原分解后,检测Akt的磷酸化水平以评估胰岛素信号传导;进行钳夹实验并计算葡萄糖灌注速率,收集小鼠尾静脉血清进行液相色谱串联质谱分析,计算葡萄糖清除速率和肝脏糖异生速率。结果 高脂喂养小鼠血糖水平升高(P<0.001),并伴随肝脏,肌肉中的p-Akt 水平减少。葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验和丙酮酸耐量试验显示,高脂喂养的小鼠血糖明显增高(P<0.05),曲线下面积升高(P<0.001)。高脂喂养的小鼠在13C标记的钳夹实验后血糖趋于稳定,与对照组相比,其葡萄糖灌注速率下降(P<0.001),葡萄糖清除速率下降(P<0.000 1),肝脏糖异生速率上升(P<0.01)。用药物抑制糖原分解后,与对照组相比,小鼠血糖水平升高(P<0.001),并伴随肝脏、肌肉中的p-Akt 水平减少,胰岛素信号通路受损。13C标记的钳夹实验表明,处理组小鼠葡萄糖灌注速率下降(P<0.01),葡萄糖清除速率下降(P<0.000 1),肝脏糖异生速率上升(P<0.01)。结论 建立了一种改良的高胰岛素正血糖钳夹实验模型,可以评估小鼠体内胰岛素的敏感性。