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2015年 第35卷 第7期    刊出日期：2015-07-05

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研究论文

光动力疗法对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期和凋亡的影响

宗丽菊 王颉 刘洪丽 冯进波 张友忠

2015, 35(7):  867-872. 

摘要 ( 1086 )   PDF (1747KB) ( 103665 )  

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目的 探讨光动力疗法PDT对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期及凋亡的影响。方法 以四甲基吡啶卟啉TMPyP为光敏剂的PDT处理Ishikawa细胞，显微镜观察细胞形态；细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的存活率；流式细胞术检测细胞周期；使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞的凋亡；蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、NF-κB P65及磷酸化NF-κB P65的表达。结果 PDT可以改变Ishikawa细胞的形态；降低细胞存活率（P＜0.05），并与光敏剂TMPyP的浓度和激光能量密度有关；PDT引起细胞S期阻滞（P＜0.05）；诱导Ishikawa细胞发生凋亡（P＜0.05）；降低 Bcl-2蛋白的表达和NF-κB P65的磷酸化水平（P＜0.05）。结论 PDT可能通过下调Bcl-2、NF-κB的活性引起Ishikawa细胞S期阻滞和细胞凋亡。

HLA-DQ遗传多态性与乙肝病毒感染结局相关

侯思慧 李青岭 胡筠 彭洪 郭进军

2015, 35(7):  873-878. 

摘要 ( 850 )   PDF (625KB) ( 27920 )  

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目的 探讨中国汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DQ基因单核苷酸多态性（rs9275572和rs9275319）与乙肝病毒感染结局的关系。方法 用Taqman 探针对纳入的921例样本进行HLA-DQ rs9275572和rs9275319位点多态性的检测，921例血样本包括310例HBV相关慢性肝病者(CLD)，295例乙肝感染后自发清除者(SC) 和316例健康对照者(HC)。结果 1）Rs9275572 AG基因型有利于乙肝感染后病毒自发清除（OR，1.82，95%CI, 1.26~2.62; 显性基因模型：OR, 1.84, 95% CI, 1.30~2.61）。2）SNP rs9275319位点与乙肝易感性及感染后病毒的自发清除关系密切，携带rs9275319 C等位基因是一个保护因素（CLD vs HC：等位基因模型OR，0.494，95%CI， 0.332~0.735，显性模型OR，0.47，95%CI， 0.31~0.72；CLD vs SC：等位基因模型OR，1.610，95%CI，1.065~2.434，显性模型OR，1.57，95%CI，1.01~2.48）。3）单体型T-G/T-A与乙肝易感性及感染后病毒自发清除相关。结论 HLA-DQ基因多态性与乙肝易感性及感染后病毒的自发清除密切相关。

二甲双胍激活AMPK通路减轻饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应

杨蕾 李蓉 李岱 敬媛媛 杨利 陶安阳 周庆菊 赵红燕

2015, 35(7):  879-883. 

摘要 ( 937 )   PDF (786KB) ( 514 )  

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目的 观察二甲双胍对饱和脂肪酸（SFA）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应中炎性因子的影响及探讨其可能机制。方法 SFA干预RAW264.7巨噬细胞建立体外炎性模型；实验分为对照组、SFA干预组、二甲双胍+SFA干预组、AMPK抑制剂Compound C+二甲双胍+SFA干预组；实时定量PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达，ELISA法检测TNF-α和IL-6蛋白的分泌，Western blot分析腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）的磷酸化水平。 结果 与对照组比较，SFA干预组RAW264.7巨噬细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均显著升高（P<0.05）；与SFA组比较，二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达水平及蛋白分泌水平均降低（P<0.05），而细胞AMPK的磷酸化水平增强（P<.05）；与二甲双胍+SFA干预组比，Compound C+二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均升高，AMPK磷酸化水平降低（P<0.05）。 结论 二甲双胍激活AMPK降低饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性因子TNF-α、IL-6的分泌。

siRNA沉默Cdkl5对原代皮质神经元Mecp2及其下游靶基因表达的影响

杨文旭 潘虹

2015, 35(7):  884-888. 

摘要 ( 858 )   PDF (785KB) ( 719 )  

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目的 探讨CDKL5在Rett综合征中与MeCP2相互作用的机制。方法 体外培养孕18d SD胎鼠皮质神经元，通过小RNA干扰技术（siRNA）敲低Cdkl5，分为干扰组（Cdkl5 shRNA）和对照组（control shRNA）。用Real time-PCR及Western blot法评估Cdkl5在mRNA和蛋白水平被敲低的效率；Cdkl5表达降低后Mecp2和Mecp2相关的下游靶基因表达变化。对Cdkl5 shRNA 转染后神经元用CCK8法检测吸光度值评估神经元活力；用Real time-PCR和Western blot法检测凋亡基因caspase3 和凋亡活性蛋白cleaved-caspase3评估神经元凋亡状态。结果 干扰组与对照组比较，Cdkl5在mRNA水平下降73%，在蛋白水平下降75% (p<0.05)；Mecp2在mRNA和蛋白水平升高约2倍 (p<0.05)；Bdnf XI在mRNA水平明显下降，Psd95在mRNA水平明显上升(p<0.05)。结论 建立稳定的Cdkl5基因敲低的原代皮质神经元模型，并初步提示CDKL5可能通过对MeCP2的调控诱导了下游靶基因的变化。

卵巢移植对去势大鼠海马神经元和雌激素膜受体GPR30表达的影响

刘芳 黑长春 孔斌 常青 郑小敏 吴凯 周文献 朱万平 赵承军

2015, 35(7):  889-893. 

摘要 ( 562 )   PDF (1089KB) ( 429 )  

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目的 观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元形态、尼氏体数量和雌激素膜受体GPR30表达的变化，评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法 成年雌性SD大鼠分为对照组、去势组和卵巢移植组。对照组行假手术，去势组行双侧卵巢切除，卵巢移植组在切除双侧卵巢7d后，肾被膜下移植出生3d内乳鼠的卵巢。于移植后的7 、14 、21 和28d，尼氏染色观察海马神经元形态、尼氏体数量；免疫组织化学法和Western blot检测GPR30蛋白的表达。结果 去势组随去势时间延长，海马神经元排列散乱，胞体皱缩，核固缩深染，神经元尼氏体数量减少(P<0.05)，GPR30表达减少(P<0.05)。卵巢移植组随移植时间的延长，细胞形态逐渐好转并与正常形态接近，海马神经元内尼氏体数量和GPR30蛋白表达逐步恢复，并接近对照组。结论 卵巢移植可以逆转去势所致神经元形态改变，并提高GPR30蛋白的表达，促进海马神经元蛋白合成功能的恢复。

ATF4重组慢病毒抑制C2C12细胞增殖并促凋亡

夏飞 伍志盟 李美玲 邓莉 胡勤 郭风劲

2015, 35(7):  894-899. 

摘要 ( 1100 )   PDF (1728KB) ( 473 )  

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目的 构建人活性转录因子4(ATF4)慢病毒，探讨C2C12细胞成骨分化过程中ATF4基因慢病毒修饰对其增殖和凋亡的影响。方法 构建ATF4重组慢病毒载体质粒，然后与2个包装质粒共转入293T细胞中包装成ATF4慢病毒（LV-ATF4）；用病毒感染C2C12细胞，并用流式细胞仪（FCM）检测BMP2诱导C2C12细胞分化时对其增殖凋亡的影响，免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达，电子显微镜观察凋亡细胞的形态学结构变化。结果 成功构建和包装了ATF4重组慢病毒。FCM检测结果表明，BMP2+LV-ATF4处理组S期细胞（14.89%）低于BMP2+LV-GFP组(30.64%)(P＜0.05)；BMP2+LV-ATF4处理组细胞凋亡率（31.06%）高于BMP2+LV-GFP组（11.39%)(P＜0.05）；凋亡相关蛋白的表达与FCM结果一致。 结论 在BMP2诱导C2C12细胞成骨分化时，LV-ATF4慢病毒可促进C2C12细胞的凋亡，抑制其增殖。

动脉移植BMSCs对脊髓缺血再灌注损伤大鼠脊髓细胞凋亡和caspase9基因的影响

陈珊珊 金华

2015, 35(7):  900-905. 

摘要 ( 771 )   PDF (1038KB) ( 456 )  

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目的 探讨肾下腹主动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血再灌注损伤脊髓细胞凋亡、caspase9表达及功能恢复的影响。方法 将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、移植组，每组8只。假手术组仅行手术操作；缺血再灌注组阻断肾下腹主动脉120min后开放，恢复脊髓再灌注5min后经动脉留置管推注1mL培养基；移植组恢复再灌注5min后推注100万BMSCs悬液1mL。术后1、3和7d对大鼠进行BBB评分；用RT-PCR、Western blot检测术后7d大鼠缺血节段脊髓内caspase9基因和蛋白表达，TUNEL观察细胞凋亡。结果 缺血再灌注组和移植组大鼠BBB评分于术后1d、3d和7d均显著低于假手术组（P<0.01），移植组术后3d、7d BBB评分高于缺血再灌注组（P<0.01）；移植组和缺血再灌注组损伤脊髓 caspase9 mRNA和蛋白表达水平较假手术组增加（P<0.01），缺血再灌注组增加更为显著（P<0.01）。缺血再灌注组和移植组损伤脊髓内出现大量凋亡细胞，而移植组凋亡细胞数少于缺血再灌注组（P<0.01）。 结论 肾下腹主动脉移植BMSCs可通过抑制缺血再灌注损伤脊髓caspase9表达，减轻脊髓局部细胞凋亡，改善其神经功能恢复。

贵州地区汉族人群GDF5基因单核苷酸多态性与成人终身高的关系

赵甜 朱惠娟 龚凤英 李乃适 单广良 潘慧 班博

2015, 35(7):  906-910. 

摘要 ( 905 )   PDF (649KB) ( 496 )  

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目的：探讨生长分化因子5（growth differentiation factor 5,GDF5）基因rs143383、rs143384、rs6060369和rs224331位点单核苷酸多态性(SNPs)与贵州地区汉族人群成人终身高的相关性。方法：对贵州地区1069例汉族健康体检者进行体格检查及问卷调查，收集抗凝血标本并提取DNA。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 方法检测GDF5基因的SNPs，并分析其与身高的相关性。结果：成年女性中，GDF5基因rs143383、rs143384、rs6060369和rs224331基因型分布可分别解释身高变异的1.4%、0.9%、1.1%和1.0% (P＜0.05)；在GDF5基因rs143383 和rs143384位点，携带 GG基因型的个体平均身高均为最高，分别比AG和AA基因型个体高1.7cm (P＜0.01)、2.3cm (P＜0.05) 和1.6cm (P＜0.05)、2.1cm ( P＜0.01)；在GDF5基因rs6060369位点携带CC基因型的个体平均身高分别比CT和TT基因型个体高1.7cm (P＜0.05) 和2.2cm (P＜0.01)。但是在成年男性中未发现GDF5基因上述SNPs位点与身高的相关性。结论： GDF5基因单核苷酸多态性与贵州地区成年汉族女性身高有关，GDF5基因可能是影响中国汉族成人女性身高个体差异的基因。

miR-146a在大鼠神经病理性疼痛模型中的表达及其作用机制

王之遥 申乐 赵欣 黄宇光

2015, 35(7):  911-915. 

摘要 ( 705 )   PDF (786KB) ( 537 )  

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目的 研究miR-146a对神经病理性疼痛的调控机制。方法 将大鼠随机分为：1)Na?ve组(n=12)；2)假手术组(n=12)：进行大鼠双侧假手术；3)双侧慢性压迫损伤（bCCI）组(n=12)：建立大鼠双侧坐骨神经结扎模型。在建模前1d及后第3、7和14d监测机械刺激诱发痛、热刺激诱发痛行为学指标；实时定量PCR法检测背根神经节（L4-L6）miR146-a及TNF-α受体相关因子6（TRAF6）、白介素1受体相关激酶（IRAK1）的mRNA表达水平；Western blot法检测TRAF6及IRAK1蛋白表达。结果 bCCI大鼠双足热刺激诱发痛痛阈、机械刺激诱发痛痛阈较Na?ve组、假手术组显著降低(p<0.05)。术后第14d bCCI组miR-146a表达水平较Na?ve组显著下降(p<0.05)。bCCI组TRAF6、IRAK1的mRNA表达水平较Na?ve组升高(p<0.05)；TRAF6、IRAK1蛋白表达水平较假手术组和Na?ve组均显著增加(p<0.05)。结论 神经病理性疼痛大鼠背根神经节miR-146a表达水平下调，miR-146a可能通过过度激活其靶基因TRAF6和IRAK1发挥作用。

慢性乙型肝炎患者血清中sICOS和sPD-1升高及意义

王东生 杜琴 刘彦信 张国元 郑德先

2015, 35(7):  916-920. 

摘要 ( 576 )   PDF (768KB) ( 400 )  

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目的：检测慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中可溶性可诱导共刺激分子(sICOS)和可溶性程序性死亡蛋白1(sPD-1)的蛋白水平，并初步探讨其意义。方法：收集80例CHB患者和30例健康对照者，外周血单个核细胞(PBMCs)和血液上清。根据HBsAg和HBeAg测定值，将CHB患者分为HBeAg(-)和HBeAg(+)两组；并将HBeAg(+)组分为免疫耐受期和免疫清除期。用ELISA 法检测以上研究对象外周血上清中sICOS和sPD-1蛋白浓度。用实时荧光定量PCR检测PBMCs中ICOS、PD-1和PD-1Δex3的表达。结果：与对照相比，sICOS在CHB患者中均增高(p<0.05)；而sPD-1仅在HBeAg(+)组显著增高(p<0.01)，其中免疫清除期比免疫耐受期患者增高更明显(p<0.05)。 CHB患者的 sPD-1与AST呈正相关(p<0.01)；且HBeAg(+)组的sPD-1与ALT呈正相关(p<0.01)； CHB患者的 sICOS与HBV-DNA呈弱的负相关性(p<0.05)。活化前，两组CHB患者的ICOS mRNA表达水平均降低(p<0.05)；结论：sICOS和sPD-1在CHB患者的血清中均异常增高，提示sICOS和sPD-1可能参与了CHB的发生发展。

血栓素受体参与子痫前期的发病

胡继芬 何芳杰 陈丽红 吴建波

2015, 35(7):  921-924. 

摘要 ( 671 )   PDF (834KB) ( 550 )  

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目的 探讨血栓素受体（TPr）与子痫前期发病机制的关系。方法 用免疫组化和实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）的方法检测36例子痫前期孕妇(病例组)和34例正常妊娠孕妇（对照组）胎盘中血栓素合酶(TXS)、血栓素受体(TPr)和非吞噬细胞氧化酶1 (NOX1)的表达，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测胎盘TXA2的表达情况。结果 TXS和TPr蛋白主要表达在细胞滋养细胞、合体滋养细胞和绒毛血管内皮细胞的胞质中，NOX1蛋白主要表达在细胞滋养细胞、合体滋养细胞、绒毛血管内皮细胞及间质细胞的胞质中。子痫前期组胎盘TXS和NOX1蛋白及mRNA表达和TXA2表达均强于对照组（P<0.05）。子痫前期TXA2表达与新生儿体重呈负相关（P<0.01）。TXA2表达与NOX1mRNA表达呈正相关（P<0.05）。结论TXA2可能通过TPr通路导致胎盘产生过量ROS并向母体血液循环释放，参与子痫前期的发病过程。

过表达钙周期蛋白S100A6对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞生物学行为的影响

刘泽群 曹青 陈美红 张晓玲

2015, 35(7):  925-928. 

摘要 ( 811 )   PDF (821KB) ( 439 )  

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目的 探讨过表达钙周期蛋白S100A6对子宫内膜异位症(EMs) 在位子宫内膜间质细胞生物学行为的影响。 方法 体外培养EMs在位子宫内膜间质细胞，将慢病毒载体和表达S100A6的重组慢病毒Lv-S100A6分别处理在位内膜间质细胞，设对照组，用CCK-8法检测细胞增殖，Transwell观察细胞迁移，流式细胞仪观察细胞凋亡。 结果 Lv-S100A6组细胞的增殖活性明显高于干预组以及对照组(P＜0.05)。 Lv-S100A6组细胞的迁移数明显高于干预组以及对照组(P＜0.05)。Lv-S100A6组细胞凋亡率为2.99%明显低于对照组的13.48%和干预组的14.40% (P＜0.05)。 结论 通过上调细胞中S100A6的表达水平，能增加EMs在位子宫内膜间质细胞的增殖能力、促进细胞的迁移并且抑制细胞的凋亡。

原花青素对髓母细胞瘤Daoy细胞增殖和凋亡的影响

马磊 陈维英 施又丹 陈欢 陈倩竹 张力 唐俐 李龙江

2015, 35(7):  929-933. 

摘要 ( 1010 )   PDF (1273KB) ( 443 )  

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目的 探讨原花青素对髓母细胞瘤Daoy细胞增殖和凋亡的影响及初步机制。方法 不同浓度原花青素处理Daoy细胞24、48和72 h，CCK-8检测细胞增殖，Hoechst33258荧光染色法及流式细胞仪分析细胞凋亡，Western blot检测细胞Akt、p-Akt和NF-κB的表达。 结果 原花青素对肿瘤细胞的增殖抑制效应呈浓度时间依赖性，72 h的半数抑制浓度IC50为0.25 mmol/L。0.2 mmol/L原花青素处理细胞24、48和72 h后，可见较多的凋亡细胞，明显的核固缩；细胞凋亡率分别为21.16%±2.49%、36.02%±0.71%、63.79%±1.47%。细胞总Akt水平无明显变化，但p-Akt和NF-κB蛋白表达水平明显降低。结论 原花青素可能通过降低p-Akt和NF-κB的表达，在体外抑制Daoy细胞增殖，并促进其凋亡。

肠源性TPH1、LRP5表达及血清5-HT水平与雄性大鼠增龄性骨量丢失相关

胡庭毅 张健 陈潇 蔡枭 熊科

2015, 35(7):  934-937. 

摘要 ( 2318 )   PDF (589KB) ( 418 )  

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目的 观察不同月龄SD雄性大鼠十二指肠TPH1、LRP5表达水平及血清5-HT水平，分析其在增龄中的变化及增龄性骨量丢失的相关性。方法 分别选取2、6、12、15和18月龄大鼠各6只，共30只，按照月龄分组以模拟增龄性模型。分别用RT-PCR法、Westernblot法检测十二指肠TPH1和LRP5的 mRNA和蛋白表达 ，用 ELISA方法检测血清5-HT水平，双能骨密度仪测定大鼠离体股骨骨密度。结果 十二指肠TPH1mRNA和蛋白表达及血清5-HT水平随年龄的增长而增加，与增龄性骨量丢失呈负相关性（P＜0.001）。结论 肠源性5-HT及其关键合成限速酶TPH1表达在增龄性骨量丢失中发挥着重要作用，可能成为老年性骨质疏松潜在治疗干预靶。

LNAzyme特异性阻断丙肝病毒5′-NCR/C基因表达

邓益斌 农乐根 梁祚仁 覃羽华

2015, 35(7):  938-942. 

摘要 ( 620 )   PDF (948KB) ( 406 )  

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目的 探讨针对HCV 5ˊ-NCR/C双靶基因位点的锁核酸核酶对病毒基因复制与表达的特异性抑制作用。方法 实验分对照组和实验组。对照组分别为空白对照组和脂质体对照组。实验组分别为单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组。半乳糖配体介导转染hepG2.9706细胞，用荧光定量PCR检测细胞培养液中HCV mRNA表达;化学发光技术检测细胞培养液中荧光素酶基因表达; 荧光显微镜系统检测细胞内荧光蛋白表达; 四甲基偶氮唑蓝法检测细胞代谢。应用SPSS 19.0统计学软件分析。各组间比较采用重复测量方差分析的SNK检验和Kruskal Wallis H检验。结果 加入锁核酸核酶后,对HCV RNA的复制均显示有较强的抑制作用（F=77.50,P<0.05），单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组的平均抑制率分别为62.12%、61.39%和75.37%; 对荧光素酶的表达有抑制作用（F=48.65，P<0.05）,平均抑制率分别为66.49%、65.06%和73.30%。给药后24、48和96 h, HCV mRNA的平均抑制率分别为52.36%、66.81%和75.05%; 荧光素酶的平均抑制率分别为53.02%、62.98%和79.45%; 细胞内的荧光蛋白表达阳性细胞数均较对照组明显减少（P<0.05）。结论 针对 5ˊ-NCR/C基因位点的LNAzyme能特异性抑制丙型肝炎病毒的复制与表达, 且双基因靶位优于单基因靶位。

CMTM3表达下调参与肥厚性心肌病发病

徐飞 蒋知言 王欣 袁昕 凤玮

2015, 35(7):  943-946. 

摘要 ( 577 )   PDF (525KB) ( 422 )  

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目的 探讨CMTM3在肥厚性心肌病患者的心肌组织中的表达情况及肥厚性心肌病的发病机制。方法 研究对象包括1）. 按每天15mg/kg 剂量腹腔注射异丙肾上腺素（ISO）诱导的心肌肥厚小鼠模型；2）. 2014年1月至2014年6月在本院接受手术的肥厚性心肌病患者32例及3例正常心肌组织。使用半定量RT-PCR，Real-time PCR及Western blotting检测CMTM3在心肌组织转录和蛋白水平的表达。结果 1）.在ISO诱导的心肌肥厚小鼠组织中，Cmtm3 mRNA表达下调。2）.在肥厚性心肌病患者病变的心肌组织中，CMTM3在转录水平和蛋白水平表达均下调。结论 CMTM3低表达致心肌组织增殖肥厚，可能参与了肥厚性心肌病发病。

男性不育患者Y染色体微缺失与性激素水平相关

汪明 乔斌 李雯 李艳

2015, 35(7):  947-950. 

摘要 ( 802 )   PDF (492KB) ( 796 )  

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目的 分析Y染色体微缺失模式及与性激素水平之间关系，为男性不育患者的诊断与治疗提供依据。方法 使用多重PCR技术对798例男性不育患者进行15个序列标签位点的Y染色体微缺失检测，使用电化学发光技术检测性激素，同时检测100名男性作对照。结果 789例男性不育患者中共发现40例Y染色体微缺失，其中27例为无精子症患者，12例为严重少精子症患者。Y染色体最常见缺失区域为AZFc，最常见缺失模式为SY254+SY255。AZF区缺失不育患者组FSH水平明显高于无AZF区缺失不育患者组及男性对照组（P<0.05）。结论 AZFc区为Y染色体最常见的缺失区域，SY254+SY255为最常见缺失模式，FSH水平在AZFc微缺失患者中水平明显升高。

脂多糖诱导的急性肾损伤小鼠模型肾脏中JNK信号通路的激活

覃春美 刘琦 李莹 甘林望 刘建 欧三桃

2015, 35(7):  951-955. 

摘要 ( 203 )   PDF (1441KB) ( 353 )  

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目的 探讨JNK信号通路激活在脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤（AKI）发病中的作用。方法 48只小鼠随机分为对照组和AKI组，分别检测血清尿素氮、肌酐以及胱抑素C，HE染色观察肾组织病理改变，免疫组化、Western blot检测肾组织p-JNK和p-c-Jun蛋白表达部位及强度，ELISA检测血中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素1β（IL-1β）水平。结果 小鼠腹腔注射LPS后血清尿素氮、肌酐、胱抑素C均较对照组均明显升高，肾组织病理损伤呈进行性加重。正常小鼠各时间点可见p-JNK和p-c-Jun在肾小管、肾小球系膜区有微量表达。AKI组小鼠p-JNK及p-c-Jun在肾小管等部位大量表达。与对照组相比，AKI组p-JNK和p-c-Jun蛋白水平在1h后即开始升高，以造模4 h时增高最明显，30h时逐渐下降。与之相应，血中TNF-α和IL-1β水平亦明显升高，于4h达峰值后逐渐下降。结论JNK信号通路激活在LPS诱导的AKI发病中起重要作用，JNK信号通路活化后可诱发TNF-α和IL-1β等炎性因子的表达，继而介导AKI的发生和发展。

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者轻度认知功能障碍的MoCA评估

王前 刘丽梅 林永忠

2015, 35(7):  956-958. 

摘要 ( 141 )   PDF (444KB) ( 516 )  

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目的 探讨简易精神状态检查量表(MMSE)、蒙特列尔认知评估量表(MoCA)评估阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）患者轻度认知功能障碍（MCI）的可行性。方法 用便携式多导睡眠仪、MMSE及MoCA对51名OSAS患者和35名单纯鼾症者进行睡眠监测和认知功能的评价。结果 OSAS组MoCA评分结果为21.1±3.0,显著低于对照组 25.0±2.6（P＜0.01）；MMSE评分结果在OSAS组与对照组中分别为27.8±1.8及28.1±1.7,无差异。结论 MoCA对于OSAS患者MCI的早期诊断敏感性优于MMSE，对于MMSE测试结果正常但高度怀疑存在MCI者，MoCA是一种简便可行的筛查工具。

岩藻多糖抑制小鼠心肌梗死后的心脏重构

王晓玲 陈曼华

2015, 35(7):  959-962. 

摘要 ( 168 )   PDF (515KB) ( 414 )  

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目的：观察裙带菜提取物中岩藻多糖对小鼠心肌梗死后心脏重构的影响。方法：将小鼠随机分为假手术组、心肌梗死模型组（采用冠状动脉左前降支结扎建立该模型）、低浓度或高浓度岩藻多糖处理组（心肌梗死术后每日灌胃给予200或500mg/kg岩藻多糖处理）。每日观察小鼠死亡情况，3周后采用超声心动图检测心功能，病理染色检测心肌梗死面积和，用RT-PCR检测心肌SOD、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）以及炎性因子TNFα、IL-1β和TGFβ mRNA表达，Western blot检测eNOS信号通路相关蛋白。结果：岩藻多糖能明显改善心肌梗死小鼠的心功能（p＜0.05）、减少梗死面积（p＜0.05），提高生存率（p＜0.05）。与对照组相比心肌iNOS和炎性因子TNFα、IL-1β及TGFβ mRNA表达明显下降（p＜0.05），SOD mRNA的表达明显增高（p＜0.05）；岩藻多糖能激活eNOS信号通路。结论：岩藻多糖能减轻小鼠心肌梗死，其作用机制可能与其抗炎、抗氧化及激活eNOS信号通路有关。

技术与方法

高效液相色谱法测定血清碘海醇浓度方法的建立和应用

王宝宝 武元 付强 弓孟春 石希敏 景红丽 李方 陈朝英 宋红梅 秦岩 李雪梅

2015, 35(7):  963-967. 

摘要 ( 151 )   PDF (845KB) ( 453 )  

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目的 建立利用高效液相色谱法（HPLC）测定血清碘海醇浓度的方法，为碘海醇血浆清除率临床应用及推广提供方法学支持。方法 设定色谱条件，对HPLC测定血清碘海醇浓度的方法进行方法学验证。对33例慢性肾脏病（CKD）儿童同时进行碘海醇清除率与99mTc-DTPA血浆清除率测定，并采用最新Schwartz公式估算肾小球滤过率（eGFR）。以99mTc-DTPA血浆清除率为参照，分析碘海醇清除率及eGFR与参照方法的相关性和一致性。结果 在设定HPLC色谱条件下，碘海醇浓度在10～1000mg/L范围内线性良好（R2 =0.9998）。批间测量和批内测量相对标准偏差（RSD%） <5%，平均回收率(R%）>96%。碘海醇血浆清除率、eGFR与99mTc-DTPA血浆清除率的相关系数（r）分别为0.95和0.63，偏差分别为（6.24±10.81）ml/(min?1.73m2) 和（12.11±22.96）ml/(min?1.73m2)。结论 建立了测定血清碘海醇浓度的HPLC法；初步探索并验证了碘海醇血浆清除率评价儿童肾功能的准确、可行。

临床园地

食道双支架置入治疗食管气管瘘临床初探

马洪明 邹珩 张洁莉 蔡存良 张楠 王洪武 罗凌飞

2015, 35(7):  968-971. 

摘要 ( 156 )   PDF (632KB) ( 443 )  

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目的 探讨全裸金属支架联合被膜金属支架（双支架置入）封堵食管气管瘘的疗效和安全性。方法 对10例食管气管瘘患者，在X线透视下向食管内放置双支架。结果 10例患者的原发病均为肺癌，共有10个瘘口，口径0.5～5.0 cm。每例均成功置入裸支架及被膜金属支架各1枚，术中及术后未出现严重并发症。治疗效果：临床完全缓解7例 （70%），部分缓解3例（30%），有效率为100%。结论：全裸金属支架联合被膜金属支架（双支架置入）是一个安全有效的治疗手段。

研究短文

二甲基鞘氨醇抑制人RA-FLS增殖及IL-6和IL-8的分泌

袁红霞 邱振宇 周盾

2015, 35(7):  972-973. 

摘要 ( 91 )   PDF (692KB) ( 358 )  

相关文章 | 计量指标

法舒地尔抑制Ang II诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖

郭冰冰 路明 李文杰

2015, 35(7):  974-975. 

摘要 ( 141 )   PDF (489KB) ( 382 )  

相关文章 | 计量指标

上调miRNA-205增强鼻咽癌细胞系CNE1的增殖和黏附

尹中普 孙晓

2015, 35(7):  976-977. 

摘要 ( 104 )   PDF (579KB) ( 354 )  

相关文章 | 计量指标

糖尿病肾病患者蛋白尿中C3a致肾小管上皮细胞转分化

陈忠锋 夏楠楠 何兵

2015, 35(7):  978-979. 

摘要 ( 251 )   PDF (497KB) ( 371 )  

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短篇综述

肥胖状态下不同组织细胞与自噬关系的研究进展

冯欢欢 宋向凤

2015, 35(7):  980-984. 

摘要 ( 151 )   PDF (1001KB) ( 482 )  

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近年来越来越多的关注投向肥胖与自噬之间关系的研究，肥胖状态下机体不同组织细胞中的自噬发挥不同的作用。脂肪细胞特异性自噬基因Atg7和Atg5被敲除后脂滴积累减少，胰岛素抵抗得到改善；肝细胞中增加自噬可以提高其代谢功能：胰岛β-细胞中自噬缺陷可损伤细胞功能：适宜的自噬水平对维持骨骼肌内环境的稳态至关重要。

黏蛋白-2与肠黏膜屏障损伤的研究进展

王娜 唐雪婵

2015, 35(7):  985-988. 

摘要 ( 1132 )   PDF (481KB) ( 1032 )  

相关文章 | 计量指标

黏蛋白-2(MUC2)是肠黏液层主要成分，覆盖于肠上皮细胞顶端，主要由杯状细胞分泌，在润滑肠道、为肠内抗菌蛋白及共生菌群提供黏附位点、抵御肠内致病菌及有害物质入侵等方面发挥着重要功能。近年来MUC2在肠道黏膜屏障损伤中的作用研究日趋受到学者重视，这也可能是肠黏膜屏障损伤的一个重要治疗突破口。

NLRP3炎症小体与溃疡性结肠炎的研究进展

史济华 许乐

2015, 35(7):  989-992. 

摘要 ( 236 )   PDF (488KB) ( 539 )  

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溃疡性结肠炎是肠道慢性炎性反应性疾病，遗传易感性、肠道菌群和黏膜免疫功能失调在溃疡性结肠炎的发生发展过程中起重要作用。目前研究显示NLRP3基因与溃疡性结肠炎的易感性相关，NLRP3炎症小体可维持肠道内环境稳定，对实验性结肠炎具有保护作用，其功能缺陷可能导致对溃疡性结肠炎易感。NLRP3炎症小体有可能成为溃疡性结肠炎治疗的新靶点。

医学教育

MOOCs在医学教育领域中的现状分析和展望

梁乃新 杨华夏 李琦 赵峻 潘慧

2015, 35(7):  993-996. 

摘要 ( 121 )   PDF (631KB) ( 451 )  

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目的 分析医学教育领域中慕课课程（MOOCs）现状和展望发展趋势。 方法 检索PubMed、CNKI、Google Scholar和Coursera等网络资源，以MOOCs和医学教育为关键词，总结MOOCs在全球医学教育领域中与医学生、医学考试和新型医学教育方法的融合现状。结果 全球范围内仅有很少的医学院校的医学专业课程与MOOCs相融合的案例，在理论和实践层面的探索均少有报道。结论 医学教育需要从MOOCs的崭新角度全方位进行认识和推动。

北京协和医院超声医学科毕业后继续教育教学需求调查

张一休 郭为衡 欧阳云淑 孝梦甦 李建初 潘慧 姜玉新

2015, 35(7):  997-1000. 

摘要 ( 158 )   PDF (427KB) ( 371 )  

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目的 调查超声医学科医师对毕业后继续教育的教学需求。方法 2014年7月对北京协和医院超声医学科95名医师发放调查问卷，对检查者信心、检查难度、教学需求进行评分。结果 共获得94份有效问卷。超声医师对于进行超声检查具有中等程度的自信心，认为“将超声结果与患者的临床诊治过程相结合”难度较大，对教学的总体满意度中等，不同医师的教学需求有差别。结论 明确学习目标和教学需求利于有目的得进行超声教学。

以人类脑计划为契机探索构建医学研究生神经生物学课程新体系

罗层 王文挺 解柔刚 徐晖 邢俊玲

2015, 35(7):  1001-1003. 

摘要 ( 139 )   PDF (468KB) ( 312 )  

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近年来脑科学研究迅猛发展，各个国家相继推出“人类脑计划”。神经生物学作为脑科学研究的主干学科承载着对脑的结构和功能进行综合研究的重任。神经生物学研究生教育是培养脑科学领域高水平、高素质专业人才的重要途径，合理的课程设置是实现良好培养目标的重要环节，将直接影响所培养研究生的学术水平、创新能力及科研道德素养。本文结合第四军医大学神经生物学教研室近两年的实践经验，构建了一套集科学道德、理论教学、实验过程及技能培训于一体的全方位的神经生物学研究生课程新体系，为培养高素质的创新型人才奠定了坚实的基础。

临床医学毕业考之客观结构化临床考试的实施效果调查

涂文记 杨萍 潘慧 高小惠 管远志 赵峻

2015, 35(7):  1004-1007. 

摘要 ( 186 )   PDF (469KB) ( 453 )  

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探讨北京协和医学院毕业考试过程存在的问题，对考生进行问卷调查。问卷从考试的必要性、设计、组织及实施、标准化病人的表现、考核临床综合能力的效果、对今后学习的帮助、考试的公平性合理性客观性、及考试存在的问题和建议等方面进行了调查，客观结构化临床考试是一个相对公平、有效的临床技能综合评估方式，得到师生的认可，但在具体组织和实施方面需要更加关注专业性和细节性，建立客观结构化临床考试标准化流程。

器官系统神经科学模块化教学初探

王文挺 邝芳 罗层 邢俊玲 徐晖 胡三觉

2015, 35(7):  1008-1010. 

摘要 ( 128 )   PDF (457KB) ( 425 )  

相关文章 | 计量指标

神经科学是研究神经系统的综合性整合学科，人才的培养需要与之相适应教学模式。第四军医大学神经生物学教研室和人体解剖学组织胚胎学教研室联合开展模块化教学，采用理论、讲座、实验和PBL等多种方式，教师联合备课和穿插授课，探索适合神经科学的整合授课模式，提高了学员学习能力，也促进了教师授课能力和知识结构的提高。