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2017年 第37卷 第6期    刊出日期：2017-06-05

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研究论文

ADAR2通过编辑MAVS基因的3’UTR降低其在细胞中的表达

李涛 李京源 朱席琳 伍晓盼 刘英

2017, 37(6):  747-751. 

摘要 ( 772 )   PDF (878KB) ( 646 )  

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目的 探讨ADAR2在细胞中对线粒体抗病毒信号蛋白MAVS表达的影响及其机制。方法 用RT-qRCR检测ADAR家族在细胞中的表达、ADAR2质粒过表达效果以及MAVS的表达；焦磷酸测序验证ADAR2对MAVS的3’UTR区域位点的编辑；双荧光素酶报告质粒检测荧光素酶的相对表达；Western blot检测ADAR2和MAVS蛋白的表达。结果 ADAR家族中ADAR1 丰度最高，其次ADAR2也有表达，而ADAR3的表达量很低，几乎检测不到（P < 0.05）；ADAR2对MAVS的3’UTR区域上的chr20:3869744位点发挥RNA编辑作用（P < 0.001）；MAVS的3’UTR编辑位点上，编辑型G比正常型A的荧光素酶活性显著降低（P < 0.01）；在转录和翻译水平，ADAR2都显著降低了MAVS的表达（P < 0.05）。结论 ADAR2通过编辑MAVS的3’UTR上的chr20:3869744位点，使其发生A→G的替换,进而抑制了MAVS基因的表达。

添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系

王淑莉 陈慧 陆必超 张建民 何维

2017, 37(6):  752-757. 

摘要 ( 910 )   PDF (1000KB) ( 526 )  

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目的 从添加细胞因子角度，优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案。方法 在固相化抗TCR γδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上，添加其他的γ链受体家族细胞因子，包括IL-7、IL-15或IL-21，单独或联合使用、长期使用或短时添加，通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达，计算γδ T细胞扩增效率；乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt’s淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性。结果 单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞，但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平；IL-2与 IL-15联合使用，可促进γδ T细胞表达CD69，从而显著提高其扩增效率（P<0.05）；而IL-2与 IL-21联合使用，可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达，增强其对Daudi细胞的细胞毒活性（P<0.001）；IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性，但是会影响其扩增效率；而仅在效应前短时间添加IL-21，同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性（P<0.05）。结论 在用固相化TCR γδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中，使用IL-15，而在回输效应前短时间添加IL-21，显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性，此为目前最优化的γδ T细胞体外扩增培养方案。

利用斑马鱼研究长春碱与肿瘤耐药基因表达的关系

胡荣英 孙琮杰 金璐 何思佳 周艳华 舒莉萍 何志旭

2017, 37(6):  758-762. 

摘要 ( 659 )   PDF (810KB) ( 632 )  

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目的 通过研究长春碱（VBL）对斑马鱼早期发育过程中abcb4肿瘤耐药基因表达的影响，为进一步建立抗肿瘤药物多药耐药筛选的斑马鱼模型奠定重要的实验基础。方法 将长春碱稀释成不同浓度梯度的药液,在受精后0.5~1.5 h (0.5~1.5 hpf) 的斑马鱼胚胎上完成药物暴露实验，计算出长春碱 IC50的数值。设置长春碱为实验组，胚胎培养以水为空白对照组，分别作用于0.5~1.5 hpf的斑马鱼胚胎，观察24~120 hpf的斑马鱼胚胎发育情况，记录死亡、孵化及畸形的胚胎数目；收集不同组别的斑马鱼胚胎，通过实时荧光定量PCR和胚胎整体原位杂交的方法，检测斑马鱼胚胎中abcb4基因的表达量。结果 计算出长春碱在斑马鱼胚胎中的IC50为3.08 ?mol/L；与对照组比较，实验组的斑马鱼胚胎abcb4基因的mRNA水平明显升高（P＜0.05）；通过胚胎整体原位杂交的方法，在120 hpf斑马鱼胚胎的小肠部位发现有abcb4基因阳性杂交信号，且实验组斑马鱼胚胎在脑和心脏部位发现abcb4基因阳性杂交信号。结论 长春碱能明显增加斑马鱼早期胚胎中abcb4肿瘤耐药基因的表达水平，提示使用斑马鱼可以复制肿瘤耐药模型。

气道内高压力促进3种气道重塑相关因子的表达

吴晓娟 余倩 李敏超

2017, 37(6):  763-767. 

摘要 ( 153 )   PDF (628KB) ( 326 )  

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目的 探讨机械通气情况下气道内不同压力水平对气道重塑相关因子表达的影响。方法 手术室经全麻行机械通气的42例慢性阻塞性肺疾病（COPD）作为COPD组和33例无基础肺疾病患者作为对照组。机械通气根据吸气峰压（PIP）水平又分为高、中、低压力组（分别为24、22和20 cmH2O），呼气末正压均为5 cmH2O。机械通气前及3 h后收集支气管肺泡灌洗液（BALF）。 酶联免疫吸附法和Western blot法检测BALF中气道重塑相关因子成纤维生长因子2（FGF-2）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白表达水平。结果 1)机械通气前COPD组BALF 中的FGF-2、TGF-β1和MMP-9蛋白水平明显高于对照组（P<0.01）。2)机械通气后对照组在高压力刺激下FGF-2、TGF-β1和MMP-9表达水平升高（P<0.05）；而COPD组压力刺激下上述3种蛋白表达升高更明显（P<0.05），且高压力组>中及低压力组（P<0.05）。3)相关性分析显示，COPD组BALF中FGF-2、TGF-β1、MMP-9表达水平与气道压力成正相关（P<0.01）。结论 机械通气时气道内的持续高压力可能通过作用于气道上皮细胞内压力敏感通道进而提高气道重塑因子FGF-2、TGF-β1、MMP-9的表达水平，COPD患者尤为显著。

DLX1联合BMP9促进人骨肉瘤细胞向成骨分化

吕凤香 康权 仇超 董姿杏 罗庆

2017, 37(6):  768-774. 

摘要 ( 186 )   PDF (2003KB) ( 299 )  

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目的 探讨DLX1联合BMP9可否影响人骨肉瘤细胞MG63的成骨分化。 方法 用构建有DLX1和BMP9基因的重组腺病毒AdDLX1和AdBMP9，单独或联合感染MG63细胞，分为DLX1组（AdDLX1+AdRFP感染组）、DLX1+BMP9组（AdDLX1+AdBMP9感染组）、BMP9组（AdBMP9+AdRFP感染组）、RFP组（AdRFP感染组）。用RT-PCR和Western blot验证DLX1和BMP9的表达情况，Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力；碱性磷酸酶（ALP）染色和读数分析细胞早期成骨能力，茜素红染色检测细胞晚期成骨能力，Western blot检测骨桥蛋白（OPN）蛋白表达水平。 结果 AdDLX1和AdBMP9感染MG63细胞后，DLX1和BMP9的表达水平上调（P＜0.05）；与RFP组相比，DLX1组、DLX1+BMP9组和BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降（P＜0.05），DLX1+BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降更为明显（P＜0.05）；ALP活性、钙盐沉积和OPN蛋白表达在DLX1+BMP9组和BMP9组增加（P＜0.05），且DLX1+BMP9组较BMP9 组显著增强（P＜0.05）。 结论 DLX1与 BMP9联合作用可抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭，同时可诱导骨肉瘤细胞向成骨分化。

跨膜蛋白66过表达减轻大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生

杨炯 王挺 杨怡 李枚岭 王强 陈垦 杨大春

2017, 37(6):  775-780. 

摘要 ( 162 )   PDF (1792KB) ( 483 )  

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目的：研究跨膜蛋白66（TMEM66）在大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生中的作用。方法:将SD大鼠随机分为对照组，左侧颈动脉球囊损伤组和TMEM66过表达组（n=10）。HE染色检测各组血管内膜增生情况。Western blot、q-PCR及IHC分别检测颈动脉血管中TMEM66的表达。CCK8和划痕实验分别检测TMEM66过表达后原代培养血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖和迁移。结果：颈动脉球囊损伤血管中TMEM66的表达量较对照组显著下降(P＜0.05)。球囊损伤后血管内膜明显增生，慢病毒特异性转染TMEM66过表达可显著逆转血管内膜增生(P＜0.05)。上调TMEM66能够改善PDGF所诱导的VSMC增殖和迁移(P＜0.05)。结论：TMEM66可以改善大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生。

长链非编码RNA-1700020I14Rik对高糖培养下肾系膜细胞纤维化的影响

李爱玲 彭睿 孙艳 彭惠民 易红 张政

2017, 37(6):  781-785. 

摘要 ( 190 )   PDF (785KB) ( 418 )  

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目的 探索长链非编码RNA表达质粒构建的方法，研究lncRNA-1700020I14Rik对肾系膜细胞纤维化的影响。方法 从小鼠肾系膜细胞中提取RNA并反转录为cDNA作为模板，PCR法扩增目的片段，构建入载体pcDNA3.1(+)中。通过脂质体3000转染方法，将载体转染至高低糖培养的小鼠肾系膜细胞中。RT-qPCR法检测1700020I14Rik的表达水平；Western blot检测肾脏纤维化标记蛋白Col-4、FN及TGF-β1表达水平。结果 1700020I14Rik在高糖培养的肾系膜细胞中显著性下调（P < 0.01）。与转染空质粒组相比，转染表达质粒的肾系膜细胞中1700020I14Rik表达水平升高（P < 0.01），且促使Col-4、FN以及TGF-β的表达水平下降（P < 0.05）。结论 pcDNA3.1(+)-1700020I14Rik表达质粒能高表达1700020I14Rik，长链非编码RNA-1700020I14Rik可以缓解高糖培养下肾系膜细胞的纤维化发展。

下调骨细胞TGF-β/Smad4信号可抑制小鼠BMSCs成骨及破骨分化

代光明 任磊 陈虹 刘文 陈宇 何小强 刘伟 涂小林 黄伟

2017, 37(6):  786-791. 

摘要 ( 254 )   PDF (1304KB) ( 714 )  

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目的 检测骨细胞TGF-β/Smad4信号通路对骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨和破骨分化的作用，并初步探讨其相关机制。方法 用条件性基因敲减Cre/loxp技术特异性敲减骨细胞Smad4，获得下调骨细胞TGF-β/Smad4信号通路的小鼠；体外分离骨细胞并与野生型小鼠骨髓间充质细胞（BMSCs）共培养；碱性磷酸酶（ALP）染色、茜素红（alizarin red）染色检测早期成骨分化和晚期钙盐沉积，酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨细胞；real-time PCR检测成骨分化特异标志物Runx2、Osterix（OSX）、ALP、osteocalcin和破骨分化特异标志物RANKL和OPG 的mRNA表达水平。Western blot检测成骨分化特异标志物Runx2和osteocalcin和破骨分化特异标志物RANK蛋白表达水平。结果 下调骨细胞TGF-β/Smad4信号能够抑制BMSCs成骨转录因子Runx2、Osterix(P<0.01)、成骨分化特异标志物ALP和osteocalcin(P<0.01)以及破骨分化特异标志物RANK(P<0.01)的表达；增加破骨分化抑制物OPG的表达(P<0.05)；而RANKL的表达无明显变化；最终下调了RANKL/OPG的比值(P<0.05)。结论 终末分化的骨细胞调控骨的代谢，下调其TGF-β/Smad4信号可抑制BMSCs成骨和破骨细胞的分化。

miR-449b介导5-氟尿嘧啶/顺铂抑制肝癌细胞的迁移

侯彭姣 邓艳春 梁娜 刘长征

2017, 37(6):  792-796. 

摘要 ( 186 )   PDF (1054KB) ( 533 )  

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目的 研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对microRNA-449b（miR-449b）在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法 收集肝癌病人的组织样本，提取总RNA，用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达；5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞，检测miR-449b的表达；在肝癌细胞中过表达miR-449b或用5-氟尿嘧啶和顺铂分别处理肝癌细胞，利用细胞划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力变化；设计拯救实验，探究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b表达,参与肝癌细胞迁移能力调控；软件预测结合Westernblot实验，鉴定miR-449b的功能靶基因。结果 miR-449b在肝癌患者组织中表达下调（P<0.001）；5-氟尿嘧啶和顺铂诱导肝癌细胞内源性miR-449b的表达上调（P<0.001）；过表达miR-449b可以抑制肝癌细胞的迁移（P<0.001）；敲低miR-449b的表达可以抑制5-氟尿嘧啶和顺铂对肝癌细胞迁移能力的抑制作用（P<0.05）；catenin-δ是miR-449b的直接靶基因。结论 5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b的表达抑制肝癌细胞的迁移。

3家系成骨不全基因突变及临床表型分析

辛世杰 徐雪姣 毛会英 熊丰 朱岷

2017, 37(6):  797-801. 

摘要 ( 232 )   PDF (1037KB) ( 354 )  

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目的 对3家系成骨不全（OI）测序及其临床表型和突变分析，提高对成骨不全的诊断和认识。方法 收集临床资料，提取患者及家属血标本；高通量测序，一代测序验证和结果分析。结果 先证者1，FKBP10，EXON6,c.1016G>A,p.R339Q,纯合突变，父、母分别为此位点杂合突变。先证者2，COL1A1，EXON9，c.671G>A,p.G224D ,杂合突变，父亲为此位点杂合突变，母亲基因无变异。先证者3，COL1A1，EXON30，c.2010delT,p.P670fs,杂合突变，母亲此位点杂合突变，父亲基因无变异。 结论 FKBP10新位点突变可能导致了XI型成骨不全及其新表型的发生；证实了COL1A1两位点突变和成骨不全之间的关系。

人脂肪间充质干细胞来源的外排体促进大鼠创伤性脑损伤后神经功能恢复

陈云飞 马百涛 薛春玲 韩钦 魏俊吉 赵春华 常健博

2017, 37(6):  802-807. 

摘要 ( 187 )   PDF (1259KB) ( 307 )  

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目的：研究人脂肪间充质干细胞（AMSCs）来源的外排体对创伤性脑损伤（TBI）的治疗作用及其可能的机制。方法：分离健康成人脂肪MSCs，通过超滤法提取外排体。将大鼠分成：假手术组，PBS对照组，MSC治疗组，exosomes治疗组。于TBI建模 24h后，治疗组分别沿损伤边缘区局部注射，PBS 30μL， MSC 2ⅹ105个cells/只，exosomes 25μg总蛋白量/只，总体积30μL。在建模前和TBI后1、3、7、10、13、16、和30d测试所有大鼠的mNSS评分和前肢踩空试验。3和7d处死大鼠，提取大鼠脑组织总RNA，实时定量PCR检测大鼠炎性因子TNF-α和IL-1β的表达，30d处死大鼠，tunel-neun双标免疫荧光检测TBI后神经元凋亡。结果：外排体的治疗显著促进神经功能的恢复，治疗效果与MSC治疗效果相当，其机制可能是通过抑制大鼠TBI后急性炎性反应，减少神经元凋亡。

成人及新生儿乙肝疫苗免疫后15年内表面抗体水平的变化

赵欣宇 高培 王怀 王丽 吴疆

2017, 37(6):  808-811. 

摘要 ( 402 )   PDF (474KB) ( 844 )  

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目的 描述和比较北京市15岁及以上人群（以下简称成人）及新生儿乙肝疫苗接种后的15年内抗体水平，为北京市乙肝疫苗接种策略提供参考。方法 2013年8月至2014年2月采用多阶段整群随机抽样方法在北京市1岁以上人群中抽取6705人进行乙肝血清学流行病学调查，选择其中完成3针基因重组乙肝疫苗接种且没有进行加强免疫的成人和新生儿为研究对象，描述和比较成人和新生儿接种乙肝疫苗后15年抗-HBs阳性率和抗-HBs滴度变化。结果 共纳入符合入组标准的新生儿和成人分别为463和129人。基于中国目前15~59岁人群自限性感染率估计为30%，成人接种后0~，5~和10~15年的抗-HBs阳性率仍可分别保持在58.6%，62.5%和48.4%，呈现平稳下降的趋势；对应的抗-HBs滴度中位数分别为288.8，120.6和62.6mIU/mL。新生儿接种人群3个时间段的抗-HBs阳性率分别为83.3%，47.3%和43.5%；抗-HBs滴度中位数分别为71.8，8.9和6.7 mIU/mL；成人接种乙肝疫苗后5到15年，其抗-HBs滴度及阳性率均高于新生儿。结论 成人和新生儿接种乙肝疫苗15年内可获得良好的保护。

空气中SO2和NO2对糖尿病患者影响的病例交叉研究

张瑞明 李润奎 罗凯 徐晶 赵梅朵 裴璐 许群

2017, 37(6):  812-816. 

摘要 ( 250 )   PDF (598KB) ( 442 )  

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目的 采用病例交叉设计研究空气污染物（SO2、NO2和PM10）对糖尿病患者健康结局的影响。方法 收集南京市2008年1月1日至2011年12月31日空气污染物数据、气象数据以及糖尿病患者死亡数据。用双向时间分层病例交叉设计，调整气象因素影响后，研究空气中SO2、NO2、PM10与糖尿病患者死亡之间的关系。同时，对年龄、性别和季节因素进行分层分析。结果 空气中SO2、NO2平均每增加10μg/m3，糖尿病患者死亡的OR值及其95%可信区间（95% CI）分别为1.031（1.005，1.058）和1.042（1.012，1.074）；空气污染物中NO2和SO2对老年人影响较大，且在冬季存在显著的有害效应。结论 空气中NO2和SO2可能对糖尿病患者死亡产生影响。

经核苷（酸）类药物治疗的慢性乙型肝炎HBsAg定量分析

张梦阳 叶素素 刘晓清 许少侠 周宝桐 侍效春 徐虹 韩扬 张丽帆 邓国华

2017, 37(6):  817-820. 

摘要 ( 220 )   PDF (614KB) ( 312 )  

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目的 总结分析慢性乙型肝炎（CHB）患者使用核苷（酸）类药物（NAs）进行抗病毒治疗后，HBsAg水平的动态变化规律。方法 回顾性收集2012年7月30日至2016年12月30日在北京协和医院进行血清乙型肝炎表面抗原定量（qHBsAg）检测的CHB患者资料，分析随访192周过程中每24周的qHBsAg、HBV DNA和HBeAg定量的数据。采用化学发光微粒子免疫分析法检测qHBsAg和定量HBeAg，采用PCR和COBAS Amplicor检测HBV DNA。结果 共纳入60例患者，HBeAg阳性组基线HBV DNA高于阴性组（P＜0.05），在48周后均降至检测下限以下。HBeAg阳性组与HBeAg阴性组基线qHBsAg分别为（3.43±0.73）log10IU/mL，（3.08±0.47）log10IU/mL。除48周外，所有随访时间点HBeAg阳性组qHBsAg均高于HBeAg阴性组（P＜0.05）。HBeAg阳性组在抗病毒治疗后，HBeAg定量有显著下降（P＜0.05）。结论 CHB患者在接受长期NAs治疗过程中，实现HBsAg转阴这一临床治愈目标较为困难，长期应用NAs治疗十分必要。

微波硫灯、热辐射灯、日光灯和LED灯对雄性抑郁大鼠生殖功能的影响

竹梅 侯倩伶 狄贯腾 冯敏 王莎莉

2017, 37(6):  821-827. 

摘要 ( 172 )   PDF (1461KB) ( 409 )  

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目的 探讨微波硫灯、热辐射灯、日光灯和LED灯对雄性抑郁大鼠生殖系统的影响。方法 采用慢性、温和、不可预见性刺激（CUMS）方法建立抑郁大鼠模型。对模型大鼠分别给予微波硫灯、热辐射灯、日光灯和LED灯连续光照45 d后，摘取大鼠生殖器官测定其脏器系数比；ELISA检测血清中睾酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（PROG）及催乳素（PRL）含量；HE染色检测睾丸组织形态学变化，Western blot检测睾丸组织中褪黑素受体(Mel 1a)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)以及3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的蛋白表达。结果 与对照组相比，抑郁模型大鼠体重增长缓慢，睾丸、附睾及精囊腺脏器系数均明显降低(P<0.05)，血清中T、E2、PRL及PROG水平显著下降(P<0.05)，睾丸间质充血严重，生精小管萎缩，细胞排列分散，Mel 1a、3β-HSD和P450scc表达下调(P<0.05)。微波硫灯照射可以上调T、E2、PRL和PROG的水平以及Mel 1a、3β-HSD和P450scc的表达(P<0.05)，减轻睾丸组织病理学改变。结论 微波硫灯照射可以改善雄性抑郁大鼠的睾丸结构及功能。

系统评价保护性肺通气在俯卧位手术的应用

于芸 吴蓓 韩如泉

2017, 37(6):  828-833. 

摘要 ( 156 )   PDF (806KB) ( 513 )  

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目的 系统评价保护性与传统肺通气在俯卧位手术的应用。方法 检索PubMed、EMbase、the Cochrane Library及万方数据库等，收集比较保护性及传统肺通气用于俯卧位手术的随机对照研究(randomized controlled trail, RCT)。根据Cochrane系统评价员手册进行文献筛选、提取数据、评价纳入研究的质量，用RevMan软件进行数据分析。结果 纳入9项 RCT，共449例患者。保护性肺通气组术后肺部并发症发生率(RR 0.30, 95% CI 0.12~0.73, P<0.01)、气道峰压更低(MD -3.52, 95% CI -6.93~-0.11, P<0.05)；术中俯卧位时保护性肺通气组氧合指数(PaO2/FiO2)更高(MD 37.28, 95% CI 22.67~51.89, P<0.001)、肺泡-动脉氧分压差更低(MD -45.50, 95% CI -61.35~-29.65, P<0.001)。结论 在俯卧位手术中，低潮气量联合呼气末正压(positive end expiratory pressure, PEEP)或低潮气量同时联合PEEP及肺复张技术的保护性肺通气可减少术后肺部并发症、降低气道峰压、改善氧合，对血流动力学影响小。

Roux-en-Y胃旁路术对肥胖大鼠肾脏糖异生的影响

郭伟 张书平 母松 汪志红 张军

2017, 37(6):  834-838. 

摘要 ( 150 )   PDF (651KB) ( 227 )  

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目的 研究胃旁路术后肥胖大鼠糖代谢及肾脏糖异生的改变。方法 将大鼠分为：对照组、肥胖模型组（高脂饮食诱导）、假手术组和手术组（胃旁路术干预模型组）。术后检测血脂、血糖和胰岛素并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），行葡萄糖耐量实验并计算曲线下面积（AUG）；q-PCR检测肾脏葡萄糖6磷酸酶（G6P）和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）mRNA表达，Western blot检测G6P、PEPCK、p-IRS1和p-Akt蛋白表达。结果 相较肥胖模型组和假手术组，手术组大鼠体质量、血糖、血脂、胰岛素、HOMA-IR和AUG均明显降低（P<0.05）；G6P和PEPCK mRNA表达及蛋白含量明显降低（P<0.05）；p-IRS1和p-Akt蛋白含量明显升高（P<0.05）。结论 胃旁路术能够显著改善肥胖大鼠糖代谢和胰岛素抵抗，其机制可能与肾脏糖异生关键酶表达降低，肾脏糖异生及糖输出减弱有关。

川芎嗪抑制LPS诱导的人II型肺泡上皮细胞炎性反应

胡小勇 周发春

2017, 37(6):  839-844. 

摘要 ( 178 )   PDF (1164KB) ( 487 )  

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目的 体外探讨川芎嗪（TMP）对脂多糖（LPS）诱导的人II型肺泡上皮细胞（HAECII）炎性反应的保护作用及机制。方法 体外培养HAECII(A549细胞来源)，LPS刺激建立炎性模型，分别加入TMP和前B细胞克隆增强因子(PBEF)抑制剂FK866进行干预。q-PCR和Western blot检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)和PBEF的mRNA和蛋白表达；通过Western blot检测细胞核和细胞质内磷酸化P65蛋白来反映核因子κB（NF-κB）的激活。结果 LPS刺激A549细胞后，TNF-a、IL-1β、IL-8和PBEF mRNA及蛋白表达均较对照组明显增高(P<0.001)，伴随着细胞核和细胞质磷酸化的P65蛋白增高(P<0.001)；TMP干预后，上述炎性因子mRNA和蛋白表达下降，磷酸化P65蛋白表达降低(P<0.05)；FK866干预后，TNF-a、IL-1β和IL-8表达以及磷酸化P65蛋白降低(P<0.01)。结论 TMP可能通过降低PBEF的表达，从而抑制NF-κB的激活，减轻肺泡上皮细胞炎性反应。

沉默/增强Stat1对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响

孙宁 孙宇 张宝帅 杨绍时

2017, 37(6):  845-848. 

摘要 ( 193 )   PDF (595KB) ( 256 )  

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目的 研究沉默/增强Stat1对胰腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 将胰腺癌细胞（BxPC-3）分为：对照(control)组、Stat1组和si Stat1组，分别转染Stat1质粒和特异性干扰Stat1表达的siRNA；Western blot法检测BxPC-3细胞中Stat1、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白的表达；MTT法绘制细胞增殖曲线；Transwell法检测BxPC-3细胞侵袭能力。结果 沉默Stat1表达后，BxPC-3细胞增殖及迁移能力明显增加，且VEGF、MMP-2和MMP-9表达明显增加。而增强Stat1表达后，BxPC-3细胞增殖及迁移能力明显降低（P<0.05）。结论 Stat1可以抑制BxPC-3细胞增殖及迁移能力。且VEGF，MMP-2和MMP-9可能在Stat1抑制肿瘤过程中起一定作用。

核心蛋白聚糖抑制结直肠腺癌细胞HCT116的体外侵袭

冯晨露 张敏 王继霞 孟祥丽 褚秀峰 路平

2017, 37(6):  849-854. 

摘要 ( 186 )   PDF (1423KB) ( 368 )  

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目的 探讨常氧和低氧条件下核心蛋白聚糖（DCN）对结直肠腺癌细胞HCT116体外侵袭的作用及机制。方法 Transwell法检测HCT116细胞体外侵袭能力；Real-time PCR法检测细胞CD133和TIMP-2 mRNA的表达；Western blot检测细胞HIF-1α、CD133和TIMP-2蛋白的表达。结果 1）常氧和低氧环境下，DCN浓度为0、1和3mg/L时HCT116细胞的侵袭数量分别为（241±46）、（168±46）和（51±17）个/视野（P<0.01）及（207±61）、（213±64）、（156±54）和（44±17）个/视野（P<0.01）。2）在常氧条件下，DCN（3mg/L）显著上调HCT116细胞TIMP-2 mRNA和蛋白的表达（P<0.01），而对CD133 mRNA和蛋白的表达无明显作用。3）低氧条件下DCN（3mg/L）显著下调HCT116细胞HIF-1α/CD133/TIMP-2 蛋白的表达（P<0.01），而对CD133mRNA的表达无明显影响。结论 DCN抑制结直肠腺癌细胞HCT116体外侵袭能力，在常氧和低氧条件下可能通过不同机制发挥作用。

饥饿、糖尿病和肥胖状态对小鼠肝脏SOCS2基因表达的影响

崔安芳 马晓磊 黄延红 张向阳

2017, 37(6):  855-859. 

摘要 ( 210 )   PDF (726KB) ( 330 )  

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目的 确定小鼠肝脏SOCS2基因在饥饿、糖尿病和肥胖状态下的表达水平，并初步研究SOCS2对糖异生的影响。方法 动物分3组：C57BL/6J小鼠、对照组（饱食）和实验组（饥饿24 h）；糖尿病模型小鼠db/db及对照小鼠db/m饱食；肥胖模型小鼠ob/ob及其对照C57BL/6J小鼠（饱食）。处死小鼠后提取肝脏RNA做反转录PCR，荧光实时定量PCR检测小鼠肝脏SOCS2及糖异生相关基因在3组小鼠中的表达水平；使用腺病毒表达系统在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2，Western blot检测SOCS2蛋白的表达，葡萄糖生成实验检测糖输出。结果 饥饿使C57BL/6J小鼠肝脏中SOCS2 mRNA水平下调，db/db和ob/ob小鼠肝脏SOCS2基因表达比其对照小鼠均明显下降（P<0.05），调节糖异生的关键基因PGC-1α、PEPCK和G6Pase的mRNA水平均上升。在C57BL/6J小鼠原代肝细胞中过表达SOCS2，得到大小为Mr 23000的蛋白，糖输出受到明显抑制。结论 初步认定SOCS2可抑制C57BL/6J小鼠原代肝细胞糖异生，可能是治疗糖尿病的一个新靶点。

小檗碱调节睡眠剥夺大鼠肠道菌群结构以及Th17/Treg细胞平衡

王慧 张艳鹤 杨记康 梁宝慧

2017, 37(6):  860-864. 

摘要 ( 273 )   PDF (734KB) ( 353 )  

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目的 研究小檗碱对睡眠剥夺大鼠肠道菌群以及辅助性T细胞17（Th17）和调解性T细胞（Treg）细胞的影响。 方法 将大鼠随机分为对照组、模型组、低和高剂量小檗碱组（BBR1和BBR2，100和200 mg/kg，灌胃10 d干预）。小站台水环境法建立睡眠剥夺模型。检测大鼠直肠内容物中细菌数量，流式细胞计量技术分析大鼠肠道Th17/Treg细胞比值，并检测肠道白介素17（IL-17）、RAR相关孤儿受体（ROR）C和叉头框蛋白P3（Foxp3）表达。 结果 模型组大鼠肠道内产气荚膜梭菌数量增加（P<0.05），而其他检测菌群数量降低（P<0.05）；Th17/Treg细胞比值升高（P<0.05）；IL-17和RORC表达升高（P<0.05），Foxp3表达降低（P<0.05）。小檗碱处理降低产气荚膜梭菌数量（P<0.05），增加其他检测菌群的数量（P<0.05）；降低Th17/Treg细胞比值（P<0.05）；下调IL-17和RORC表达（P<0.05），上调Foxp3表达（P<0.05）。结论小檗碱能够拮抗睡眠剥夺诱导的大鼠肠道菌群结构和Th17/Treg细胞失衡。

临床药师干预临床抗菌药物使用后的效果分析

盛垚 冯华 李景云

2017, 37(6):  865-869. 

摘要 ( 161 )   PDF (738KB) ( 341 )  

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目的 探讨临床药师干预结合指标管理在临床使用抗菌素中的作用。方法回顾临床药师干预后（2016年1月至2016年11月）与干预前（2015年同期）医院住院及门诊患者抗菌药物的使用率、使用强度、微生物检验样本送检率和清洁手术预防用抗菌药物的情况，并进行统计学分析。结果：与干预前相比，干预后住院患者抗菌药物使用率（50.02%）及门诊患者抗菌药物总使用率（25.72%）均低于干预前（P＜0.05，分别为52.55%和30.05%）；抗菌药物使用强度50.59%也低于干预前的使用强度62.39%（P＜0.05）。同时，微生物样本送检率（27.49%）高于干预前13.96%，（P＜0.05）；清洁切口抗菌药物使用率每月均呈下降趋势；抗菌药物的品种选择、给药时机、给药时间的合理率均呈上升趋势。结论 临床药师的专业干预更有利于抗菌药物临床应用工作日常化、规范化和专业技术化，促进用药合理性和医院药学的发展。

短篇综述

ABCA1在脂质沉积中的研究进展

邓资翔 左中

2017, 37(6):  870-873. 

摘要 ( 260 )   PDF (576KB) ( 421 )  

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ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)是一种以ATP为能源进行物质转运的膜蛋白，肝脏X受体(LXRs)、维甲酸X受体(RXRs)、固醇调节元结合蛋白(SREBPs)和microRNAs等因子对其表达有重要影响。ABCA1作用于脂质沉积的多个信号通路，上调其表达可负向调控脂质沉积过程，为代谢性疾病带来了新的治疗方向。

泌尿外科机器人手术模拟训练平台的应用进展

郑国洋 文进 李汉忠

2017, 37(6):  874-879. 

摘要 ( 166 )   PDF (960KB) ( 314 )  

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随着泌尿外科机器人手术技术的发展，模拟训练平台在泌尿外科医生培训的作用也越来越重要。目前用于泌尿外科机器人手术训练的模拟平台有VR模拟器、AR模拟器等虚拟模拟器和dry-lab、wet-lab等物理机械模拟器。各种类型的模拟平台都已被多项研究在不同程度上进行了现实性和有效性的验证，对泌尿外科医生机器人手术技能的训练和提高有重要作用，但也需进一步研究开发更为有效精确的操作模块，整合多种模拟平台的优势，设置更为合理的学习曲线。

神经干细胞治疗脑创伤的研究进展

张笑 魏俊吉 王任直

2017, 37(6):  880-883. 

摘要 ( 221 )   PDF (555KB) ( 456 )  

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内源性神经干细胞通过迁移，激活的方式分化为神经元及胶质细胞，并改善神经功能，但创伤导致的复杂的微环境使内源性神经干细胞的增殖和分化受到限制。外源性神经干细胞可在宿主内存活并通过旁分泌功能改善局部微环境，促进内源性神经干细胞的增殖和分化，恢复神经元之间的连接功能，从而促进神经组织再生和功能修复。

卡培他滨联合化疗双周方案研究进展

马守东 孙国贵 张弘纲

2017, 37(6):  884-888. 

摘要 ( 338 )   PDF (598KB) ( 665 )  

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卡培他滨作为口服化疗药物，具有安全、有效和使用方便的特点，已经广泛应用于包括食管癌、胃癌、大肠癌、乳腺癌和卵巢癌等多种实体肿瘤的化疗。既往用药主要为3周方案，即每周期化疗口服卡培他滨14d，停药7d。作为对传统化疗方案的改良，卡培他滨双周方案显示出毒副反应降低、患者耐受性好、住院时间短等特点，值得临床应用推广。

医学教育

多元概化理论在医学生毕业客观结构化临床考试中的应用

罗林枝 赵峻 李琦 张宇 石羽茜 潘慧

2017, 37(6):  889-893. 

摘要 ( 212 )   PDF (595KB) ( 478 )  

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目的 评估以标准化病人（standardized patient，SP）为基础的客观结构化临床考试(objective structured clinical examination，OSCE)在医学生临床技能考试的信度。方法 用多元概化理论对临床医学生毕业考试OSCE中SP为基础的临床技能考核结果进行分析。结果 本次OSCE总的相对概化系数为0.886，绝对概化系数为0.883，说明本次考核的信度较高。结论多元概化理论能客观、科学地评价毕业考试OSCE中SP考站的考试结果，其分析结果对于提高及改进临床技能考核质量有较大帮助。

基于自主学习模式下的形态学多媒体网站的开发和应用

戴申倩 仇文颖 陈咏梅 钱晓菁 申新华 刘克 刘伟 李文婷 张迪 马超

2017, 37(6):  894-898. 

摘要 ( 158 )   PDF (2428KB) ( 445 )  

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目的 针对现代高等教育网络化发展的趋势和我校学生自主学习能力较强等特点，北京协和医学院自2013年开始建立了包括人体解剖学、神经解剖学和组织胚胎学等在内的形态学多媒体教学网站。方法 根据教学的内在需求开发，运用ASP脚本，配以Mysql数据库，完成了从界面上以版块为引导；形式上以教学大纲、课件和实验教学视频为内容的能满足新型自主学习网站建设。结果 通过问卷调查，有45%的学生使用网站的频率达到3次/周以上，并且“课程内容”栏目的使用频率最高（79%），作为自主学习平台的学习效果已经达到。结论 经过近4年时间的探索和试验，多媒体教学网站已经成为形态学课程的重要组成部分，作为一种新的教学模式和课堂教学的拓展，不仅受到基础学院师生们的普遍欢迎，而且在临床教学中得到广泛采用。

中美生理学教材的对比分析

闫莉 王婧

2017, 37(6):  899-902. 

摘要 ( 346 )   PDF (943KB) ( 598 )  

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教材乃教学之本。本文选择具有代表性的美国基础医学生理学课程的经典教材Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology与国内生理学教材进行比较，从教材的基本知识框架和内容编排、图表应用及其与临床相结合的程度等方面分析其各自的特点，为广大生理学教育工作者和医学生在教材的选择上提供依据，以期为广大生理学教材编写和课程建设提供参考。

CBL教学法对医学生胚胎学教学效果的影响

仇文颖 徐园园 钱晓菁 陈咏梅

2017, 37(6):  903-906. 

摘要 ( 200 )   PDF (661KB) ( 380 )  

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目的 探讨以讨论课形式进行的CBL（案例式教学）教学方式对胚胎学教学效果的影响。方法 将临床病例引入胚胎学讨论课，对近3年本校胚胎学期末考试中经过案例讨论的题目与非讨论题目进行比较; 通过网络问卷对课程结束后学生的相关知识掌握情况进行测试并比较。结果 各年级胚胎学期末考试总得分率没有统计学差异，但讨论课题目得分显著高于非讨论课题目得分（p<0.01）；其中主观讨论题得分率显著高于非讨论题。网络测试显示，答题正确率在课程结束1、2、3年后逐渐降低，但讨论过的题目得分率高于非讨论题目。结论 CBL教学法能够促进医学生对胚胎学知识的短期以及长期掌握。