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2017年 第37卷 第4期    刊出日期：2017-04-05

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子宫内膜癌专题

关注子宫内膜癌处理中的热点问题

金滢 潘凌亚

2017, 37(4):  435-435. 

摘要 ( 619 )   PDF (250KB) ( 428 )  

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高效孕激素治疗子宫内膜复杂不典型增生及子宫内膜癌的预后分析

李艳 陈明 金滢 单莹 潘凌亚

2017, 37(4):  436-442. 

摘要 ( 851 )   PDF (763KB) ( 438 )  

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目的 探讨子宫内膜复杂不典型增生及高分化子宫内膜癌患者经高效孕激素治疗后的肿瘤学预后及生育结局。方法 回顾性收集了2000年1月1日－2011年12月31日之间在北京协和医院就诊的子宫内膜复杂不典型增生及高分化子宫内膜癌（无子宫肌层浸润）患者的临床病理资料。所有患者接受口服醋酸甲羟孕酮（250-500mg/天）或醋酸甲地孕酮（160-480mg/天），持续至少6个月。结果 患者中位年龄32岁（21－41岁）。在55例患者中，41例（75%）获得完全缓解，中位时间为6（3-24）个月。完全患者率在肥胖患者中较非肥胖患者低（4/12 [33%] 比37/43 [86%]; P=0.001）。获得完全缓解的患者中10例（24%）复发。5年无复发生存率为71%。在33例有生育愿望的患者中，17例（52%）妊娠。结论 采用高效孕激素进行保留生育功能的治疗是有效和安全的。肥胖与预后不良相关。

年轻早期子宫内膜癌患者保留卵巢的安全性及预后

王永学 金滢 李艳 潘凌亚

2017, 37(4):  443-447. 

摘要 ( 948 )   PDF (648KB) ( 686 )  

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目的 探讨年轻的I期子宫内膜癌患者保留卵巢的安全性及预后。方法 回顾性分析北京协和医院2005年1月至2011年12月间接受手术治疗的年龄≤45岁的I期子宫内膜癌患者的临床病理资料。根据术中是否保留卵巢分为保留卵巢组和切除卵巢组，比较分析两组的临床病理特征及预后。结果 研究共纳入患者72例，其中保留卵巢组25例（34.7%），切除卵巢组47例（65.3%）。保留卵巢组患者与切除卵巢组患者相比更年轻（P=0.007），并且接受淋巴结切除的比例明显低于保留卵巢组患者（P<0.001）。两组患者在分期、肿瘤分级、肌层浸润深度以及术后辅助治疗方面均无统计学差异（P>0.05）。72例患者的中位随诊时间为89个月（7～131月），共有5例患者复发，没有患者死亡。Kaplan-Meier生存曲线及log rank检验显示两组的无复发生存时间无差异（P=0.194）。COX风险回归分析发现保留卵巢对无复发生存期无影响（HR=3.08，95%CI 0.54-18.44）。结论 年轻的早期子宫内膜癌患者保留卵巢是安全的，对患者的无复发生存时间无显著影响。

子宫内膜癌腹水细胞学阳性的危险因素和预后意义

宋晓 金滢 李艳 单莹 王永学 尹婕 曾靖 韩甜甜 潘凌亚

2017, 37(4):  448-453. 

摘要 ( 1093 )   PDF (698KB) ( 650 )  

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目的 探讨子宫内膜癌患者腹水细胞学阳性的危险因素和预后意义。方法 收集2005年1月1日至2010年12月31日北京协和医院收治的486例初治子宫内膜癌患者的临床资料进行回顾性分析，单因素及多因素分析腹水细胞学阳性对预后的影响。 结果 ①子宫内膜癌患者中腹水细胞学检查阳性率为4.8%。②非子宫内膜样癌（P=0.000）、FIGO分期（2009）为III-IV期（P=0.000）、子宫深肌层受累（P=0.001）、宫颈间质浸润（P=0.018）是子宫内膜癌腹水细胞学阳性的影响因素。③子宫内膜癌腹水细胞学阳性患者的5年无进展生存率（70.9% vs 90.0%） 、5年总生存率（72.2% vs 96.0%）均低于腹水细胞学阴性患者；单因素分析腹水细胞学阳性对无进展生存时间和总生存时间的影响，差异均具有统计学意义（P=0.005，P=0.000）；④多因素分析显示腹水细胞学阳性并不是无进展生存时间、总生存时间的独立危险因素（RR=3.812，95%CI 0.897-16.200，P=0.070；RR=3.426，95%CI 0.800-14.673，P=0.097）。结论: 子宫内膜癌的腹水细胞学阳性，与非子宫内膜样的病理类型、FIGO分期（2009）、深肌层浸润、宫颈间质浸润相关。腹水细胞学阳性不是子宫内膜癌的独立预后影响因素。

子宫内膜癌淋巴结转移的危险因素及预后分析

曾靖 李艳 金滢 单莹 王永学 尹婕 韩甜甜 宋晓 潘凌亚

2017, 37(4):  454-462. 

摘要 ( 1238 )   PDF (972KB) ( 1033 )  

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目的：探讨子宫内膜癌腹膜后淋巴结转移的高危因素及淋巴结转移对于预后的影响。方法：回顾性分析2005年1月至2010年12月期间在北京协和医院妇产科进行诊治的289例行腹膜后淋巴结切除的子宫内膜癌患者的临床病理资料，对影响子宫内膜癌腹膜后淋巴结转移的高危因素和影响子宫内膜癌患者预后的因素进行统计分析。结果：（1）289例患者中位发病年龄55岁，I期224例（77.5%），II期13例（4.5%），III期45例（15.6%），IV期7例（2.4%）。289例行盆腔淋巴结切除，30例（10.4%）有盆腔淋巴结转移；96例行腹主动脉旁淋巴结切除，11例（11.5%）有腹主动脉旁淋巴结转移。复发21例（7.3%），死亡11例（3.8%），中位随访时间37个月，中位无瘤生存时间34个月。（2）单因素分析显示术前CA125≥35u/L、非子宫内膜样癌、组织学分级为G3、深肌层浸润、肿瘤≥2cm、宫颈间质受累、腹腔冲洗液细胞学阳性及阴道或宫旁受累是淋巴结转移率的高危因素（P＜0.05）。多因素分析显示术前CA125值≥35U/ml、低分化、肌层浸润深度≥1/2是淋巴结转移的独立危险因素（P＜0.05）。（3）Kaplan-Meier单因素分析显示，腹腔冲洗液细胞学阳性、阴道或宫旁受累、附件受累及淋巴结转移缩短无瘤生存时间（P＜0.05）；非子宫内膜样癌、低分化、肌层浸润深度≥1/2、腹腔冲洗液细胞学阳性、附件受累及淋巴结转移缩短总生存时间（P＜0.05）。COX回归多因素分析显示，腹膜后淋巴结转移是5年无瘤生存率的独立预后因素（未转移者92.1% vs 转移者65.3%，P=0.002，95%CI 0.078-0.552）；虽不是5年总生存率的独立预后因素，但无淋巴结转移者的5年总生存率有高于淋巴结转移者的趋势（未转移者96.1% vs 转移者70.0%，P=0.086，95%CI 0.039-1.238）。结论：本研究发现，（1）肿瘤分化程度和肌层浸润深度对淋巴结转移有预测意义，能够指导内膜癌患者是否进行淋巴结切除术，为个体化治疗奠定理论基础。（2）淋巴结转移患者仍然有较无淋巴结转移者预后更差的趋势，因此对于淋巴结转移的患者需要进行辅助治疗，减少复发风险。

术前诊断为子宫内膜不典型增生的子宫内膜癌患者的处理

单莹 金滢 李艳 王永学 曾靖 韩甜甜 宋晓 潘凌亚

2017, 37(4):  463-467. 

摘要 ( 670 )   PDF (584KB) ( 363 )  

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目的：分析和总结术前诊断为子宫内膜不典型增生的子宫内膜癌患者的临床特点及治疗方法。 方法：2005年1月至2010年12月北京协和医院妇产科行全子宫切除术后病理诊断为子宫内膜样癌的患者共计404例，其中44例术前子宫内膜活检病理提示子宫内膜不典型增生（AEH），回顾性分析这些患者的临床特点，采用SPSS 13. 0 统计学软件统计分析。 结果：44例术前诊断为AEH的患者中，39例患者（89%）未行子宫内膜癌分期术，子宫切除术后病理均为高分化子宫内膜样癌（100%），14例（32%）年轻患者保留了双侧卵巢，9例（20%）患者给予辅助放疗。中位随诊时间52个月，无复发病例。和绝经后患者相比，绝经前患者术后深肌层浸润（1/22及4/22）及淋巴血管间隙浸润（0/22及3/22）更少，但无统计学差异。比较AEH组和术前诊断为子宫内膜样癌的患者（EC组），AEH组高分化子宫内膜样癌的比例明显高于EC组（P=0.000）；辅助化疗率和复发率明显低于EC组（P＝0.03和0.019）。 结论：术前诊刮为AEH的子宫内膜癌患者预后好，年轻患者充分评估后可以考虑保留卵巢，绝经后患者AEH伴发子宫内膜样癌的风险增高，且更容易合并深肌层浸润、淋巴血管间隙受累等高危因素。

研究论文

辛二酰苯胺异羟肟酸对人肝星状细胞增殖和凋亡的影响

刘幸 田甜 詹玮 余蕾 韩冰 谢汝佳 罗新华 杨勤

2017, 37(4):  468-472. 

摘要 ( 659 )   PDF (1375KB) ( 681 )  

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目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸对人肝星状细胞株LX-2增殖及凋亡的影响及其可能机制。方法 体外应用SAHA作用于LX-2细胞，倒置显微镜观察LX-2 细胞形态，MTT法检测细胞增殖；荧光显微镜及流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率；Western blot检测α-SMA、Ⅰ型胶原、acH3K9、acH3K14和acH3K18蛋白表达。结果 SAHA呈剂量依赖性显著抑制LX-2细胞增殖（P<0.05）；SAHA对LX-2细胞凋亡具有呈时间依赖性的促进作用(P<0.05)；SAHA处理LX-2细胞后，α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显降低(P<0.05)，而acH3K9、acH3K14和acH3K18乙酰化修饰水平明显升高(P<0.01)。结论 SAHA抗肝纤维化的机制可能与下调α-SMA及I型胶原蛋白表达，上调组蛋白acH3K9、acH3K14和acH3K18乙酰化修饰水平有关。

RI-1对MSH2缺陷结直肠癌细胞系的杀伤作用

孔祥玉 王爽 王彦 徐畅 王芹 刘强 杜利清

2017, 37(4):  473-478. 

摘要 ( 227 )   PDF (1849KB) ( 481 )  

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目的 探讨RAD51抑制剂RI-1对MSH2缺陷结直肠癌细胞系的杀伤作用及可能的作用机制。方法 Western blot法筛选MSH2差异表达的结直肠癌细胞系，MTT法检测不同结直肠癌细胞系对RI-1（10、20、30、40或50 μmol/L）的敏感性；构建针对MSH2基因的重组shRNA慢病毒表达载体并感染HT29细胞。RI-1（40 μmol/L）处理细胞，流式细胞术检测细胞凋亡的变化；单细胞凝胶电泳实验分析细胞内DNA损伤情况；细胞免疫荧光法检测γ-H2AX foci的形成。结果 与对照组相比MSH2缺陷的HCT8细胞有明显细胞凋亡现象（P<0.01）；HCT8细胞和HT29Shmsh2细胞尾部DNA含量、尾长和尾距均较对照组明显增加（P<0.05）；HCT8细胞和HT29Shmsh2细胞内γ-H2AX foci的形成数量较对照组明显增加（P<0.01）。结论 RAD51抑制剂RI-1可能通过增加细胞内DNA损伤参与RI-1对MSH2缺陷肿瘤的杀伤作用。

羧胺三唑对RBL-2H3细胞活化脱颗粒的影响

王玉凤 张晓娟 郭泽浩 李娟 郭磊 朱蕾 叶菜英

2017, 37(4):  479-483. 

摘要 ( 264 )   PDF (1235KB) ( 657 )  

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目的 研究羧胺三唑（carboxyamidotriazole ，CAI）对RBL-2H3肥大细胞增殖、凋亡及活化脱颗粒的影响，探索CAI的抗感染作用机理。方法 以C48/80诱导RBL-2H3细胞活化脱颗粒模型，中性红染色法观察细胞脱颗粒的形态学，分别用ELISA法和底物显色法检测细胞培养上清中组胺和β-氨基己糖苷酶的释放水平，CCK-8法测定细胞活力，Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡。结果 与对照组相比，10、20和40 μmol/L CAI能够不同程度抑制C48/80诱导的RBL-2H3细胞脱颗粒反应，20和40 μmol/L CAI能够降低C48/80诱导的组胺释放（P<0.01），40 μmol/L CAI能够降低β-氨基己糖苷酶的释放（P<0.01）。另外，所用各浓度的CAI对细胞增殖和凋亡均无明显影响。结论 CAI能有效抑制RBL-2H3肥大细胞的活化脱颗粒，此作用并不是通过细胞毒发挥作用的。CAI可能部分通过下调肥大细胞的功能活化，发挥其抗感染作用。

筋脉通含药血清对高糖培养大鼠雪旺细胞β-catenin、GSK-3β及髓鞘零蛋白表达的影响

孙莹 梁晓春 刘伟 刘頔

2017, 37(4):  484-487. 

摘要 ( 165 )   PDF (511KB) ( 502 )  

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目的 探讨不同浓度筋脉通含药血清对高糖培养大鼠雪旺细胞（SCs）β-catenin、GSK-3β及髓鞘零蛋白（P0）的影响。 方法 SD大鼠灌胃获得含药血清及正常血清，原代培养雪旺细胞，随机分为正常对照组、高糖组、筋脉通5、10和20倍干预组，72 h后分别用CCK、real-time PCR和Western blot法检测各组SCs细胞增殖活性及β-catenin、GSK-3β和P0的mRNA与蛋白表达。结果 与正常组相比，高糖组SCs细胞增值率显著降低（P<0.01），β-catenin和P0 mRNA与蛋白表达显著降低（P<0.01），而GSK-3βmRNA表达显著上升（P<0.05）。中药筋脉通干预后使高糖培养的SCs细胞β-catenin、P0的mRNA及蛋白表达显著回升（P<0.01），而GSK-3βmRNA表达显著回降（P<0.01），且与浓度相关。结论 高糖可引起SCs细胞损伤，中药筋脉通可以通过调节β-catenin、GSK-3β水平抑制该作用。

表皮生长因子促进子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa增殖

张静 田甜 刘静 崔竹梅 刘元波

2017, 37(4):  488-492. 

摘要 ( 163 )   PDF (816KB) ( 663 )  

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目的 研究表皮生长因子（EGF）对子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa增殖的影响，并探讨雌激素受体α(ERα)和Ack1在其调控机制中的作用。方法 无雌激素环境下,EGF作用于Ishikawa细胞，CCK-8法检测子宫内膜腺癌细胞增殖；Western blot检测细胞ERα及Ack1磷酸化；用酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼处理细胞后，检测Ishikawa细胞增殖和ERα及Ack1磷酸化状态。结果EGF可增强Ishikawa细胞增殖(P<0.05)，并促进ERαTyr-537特异位点磷酸化和Ack1磷酸化;用达沙替尼后，细胞增殖能力下降(P<0.05)，ERαTyr-537特异位点磷酸化和Ack1磷酸化水平下调。结论 EGF促进Ishikawa细胞增殖，其机制可能与诱导ERαTyr-537特异位点磷酸化和激活Ack1激酶通路有关。

敲除Dock180抑制大鼠H9C2心肌细胞增殖和促凋亡

胡苏蕾 李刚 扶艳波 邓琴 刘成

2017, 37(4):  493-499. 

摘要 ( 159 )   PDF (1326KB) ( 564 )  

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目的 探讨敲除细胞浆移动蛋白1（Dock180）对大鼠H9C2心肌细胞株增殖和凋亡的影响及其机制。方法 用CRISPR/Cas9系统构建single guide RNA (sgRNA) Dock180质粒，并将其包装成敲除Dock180重组慢病毒再进行筛选，建立敲除Dock180的H9C2心肌细胞稳定株。实验分为A:阴性慢病毒组（Cas9）、B:敲除Dock180组、C:阴性慢病毒低氧组、D:敲除Dock180低氧组。RT-PCR检测各组细胞Dock180 mRNA表达水平，Western blot检测相关蛋白的表达水平，MTT检测细胞增殖率，流式细胞术检测细胞凋亡率。 结果 B组和D组Dock180 mRNA和蛋白无表达；分别较A组和C组， B组和D组p-ERK1/2、Bcl-2蛋白和细胞增殖率均降低(P <0.01)，Bax蛋白和细胞凋亡率均增加(P<0.05，P<0.01)；较A组，C组Dock180 mRNA和蛋白表达降低，p-ERK1/2、Bcl-2蛋白和细胞增殖率均降低，Bax蛋白和细胞凋亡率均增加(P<0.05，P<0.01)；较B组，D组p-ERK1/2、Bcl-2蛋白和细胞增殖率均降低，Bax蛋白和细胞凋亡率均增加(P<0.05，P<0.01)。结论　敲除Dock180可抑制H9C2心肌细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用可能通过p-ERK1/2、Bax和Bcl-2分子介导。

肾脏纤维化大鼠模型尿液中差异表达基因筛选及生物信息学分析

张尚 石变华 孙佳增 刘彦信 郑德先 史娟

2017, 37(4):  500-505. 

摘要 ( 167 )   PDF (894KB) ( 623 )  

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目的 研究大鼠肾脏纤维化(RF)模型尿液中差异表达的基因，并对其进行生物信息学分析。方法 将大鼠分为对照组和纤维化模型组，单侧输尿管结扎术建立大鼠肾脏纤维化模型，收集尿液。提取总RNA，构建测序文库并进行转录组测序。对差异表达的mRNA进行了GO分析和KEGG分析，并对miRNA的前体和lncRNA的家族进行预测和分类。结果 肾脏纤维化模型组的尿液和对照组相比，得到813条表达上调转录本数据以及213条表达下调的转录本数据。结论 利用转录组高通量测序结合相关生物信息学分析，可为肾脏纤维化诊断靶点提供新的可能。

ATP1A1基因沉默抑制U251胶质瘤细胞侵袭及其机制

陈鸿 陈松 霍钢

2017, 37(4):  506-511. 

摘要 ( 157 )   PDF (1450KB) ( 354 )  

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目的 探讨沉默Na+/K+ATP酶A1亚基（ATP1A1）对人U251胶质瘤细胞系侵袭能力的影响及其机制。方法 用shRNA-ATP1A1慢病毒感染人U251胶质瘤细胞，RT-qPCR及Western blot分别检测ATP1A1mRNA和蛋白的表达；MTT法检测细胞体外的增殖；细胞划痕实验及Transwell小室检测细胞的迁移及侵袭能力；Western blot检测基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/ 9)的表达。结果 沉默ATP1A1细胞的ATP1A1 mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制；细胞的增殖和迁移、侵袭能力也显著受抑(P<0.05)；MMP-2和MMP-9的表达也明显降低(P<0.05)。 结论 靶向ATP1A1干扰能够明显抑制胶质瘤U251细胞的体外增殖、迁移及侵袭，其机制可能与MMP-2、MMP-9的下调相关，ATP1A1可能作为胶质瘤治疗的一个潜在靶点。

ATAD2对人胶质瘤细胞系转移及上皮间充质转换的影响

秦彦昌 贾栋 于庆伟

2017, 37(4):  512-517. 

摘要 ( 197 )   PDF (1039KB) ( 443 )  

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目的 探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）对人胶质瘤细胞的影响。方法 用real-time PCR及Western blot检测ATAD2在人胶质瘤细胞系U87MG、U251和正常人星形胶质细胞的表达。U87MG和U251分为对照组（control）、脂质体对照组（mock）、ATAD2 siRNA（转染特异性siRNA）和ATAD2 overexpression（过表达ATAD2）4组，MTT法、Transwell实验观察细胞增殖和侵袭迁移。Western blot检测上皮间质转换标志蛋白上皮钙黏素、神经钙黏素和波形蛋白的表达。结果 U87MG和U251细胞ATAD2高表达。与对照相比，ATAD2 siRNA抑制U87MG和U251细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素及波形蛋白表达，促进上皮钙黏素表达（P<0.05）；ATAD2 overexpression促进细胞增殖、侵袭、迁移、神经钙黏素和波形蛋白表达，降低上皮钙黏素表达（P<0.05）。结论 ATAD2可能通过调节上皮间充质转换进程参与人胶质瘤细胞转移。

筛选KIAA1456抑制卵巢癌细胞增殖的靶向lncRNAs

张应凤 高燕洪 陈怀梅 王佳

2017, 37(4):  518-524. 

摘要 ( 194 )   PDF (1604KB) ( 307 )  

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目的 探索KIAA1456抑制卵巢癌细胞增殖的靶向lncRNAs。方法 细胞免疫荧光检测KIAA1456在卵巢癌细胞HO8910PM中的表达。用基因芯片技术检测过表达KIAA1456后的卵巢癌细胞HO8910PM，与对照HO8910PM卵巢癌细胞之间差异lncRNA基因表达谱，筛选出有明显差异的lncRNAs，并验证。构建KIAA1456-RNAi慢病毒载体，干扰卵巢癌细胞HO8910/PM中KIAA1456的表达，RT-qPCR和Western blot检测KIAA1456干扰效率。用RT-qPCR再次检测KIAA1456沉默后相关lncRNAs的表达变化。 结果 KIAA1456主要表达于HO8910PM细胞的细胞核。过表达KIAA1456后，表达相差1.2倍以上的lncRNA有654条，表现最显著的有下调的SSX8，上调的SNORD14D,SNORA26，lncRNA-ENST00000384488,PCR验证结果与芯片趋势一致。KIAA1456-RNAi慢病毒载体成功干扰了卵巢癌细胞HO8910PM中KIAA1456的表达，KIAA1456下调后，SSX8上调，SNORD14D,SNORA26，lncRNA-ENST00000384488下调。结论 KIAA1456可通过调节SSX8，SNORD14D,SNORA26，lncRNA-ENST00000384488等相关lncRNAs的表达，从而抑制卵巢癌细胞的增殖，为提高卵巢癌的诊断和治疗提供了一个新的靶点。

姜黄素降低III型CP/CPPS模型鼠炎性反应因子的表达

程邵龙 赵亮 肖明朝

2017, 37(4):  525-530. 

摘要 ( 177 )   PDF (1674KB) ( 519 )  

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目的 研究姜黄素对III型慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合征（CP/CPPS）模型鼠炎性反应因子表达的影响。方法 将大鼠随机分为假手术组（sham）、CP/CPPS模型组（model）、姜黄素50及100mg治疗组(cur-50 mg，cur-100mg)和p38抑制剂组（SB203580），连续腹腔给药12d后，real-time PCR检测前列腺组织中TNF-α、p38、COX-2的mRNA表达；免疫组化检测TNF-α，COX-2的蛋白表达；Western blot检测p38、p-p38和NF-κB蛋白的表达。结果 CP/CPPS模型组的NF-κB、p-p38、TNF-α和COX-2蛋白，TNF-α、COX-2和p38的mRNA表达较假手术组升高（P<0.01）；cur-100mg组和SB203580组可显著缓解模型组的变化（P<0.01）；cur-100mg组中的COX-2蛋白和mRNA均比SB203580组下降明显（P<0.05）；相较模型组，姜黄素2个组、SB203580组p-p38与NF-κB的表达呈正相关（P<0.01)。结论 姜黄素能够降低CP/CPPS模型鼠NF-κB、TNF-α和COX-2及p-p38等炎性反应因子的表达。

ATG5敲低后抑制人肺癌H1299细胞自噬并增强南蛇藤素诱导的细胞凋亡

曾晓刚 葛明建

2017, 37(4):  531-536. 

摘要 ( 256 )   PDF (1150KB) ( 555 )  

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目的 构建自噬相关基因5（autophagy-related gene 5，ATG5）低表达肺癌细胞株，观察肺癌细胞自噬活性，检测南蛇藤素对肺癌细胞凋亡的影响。 方法 用ATG5 shRNA技术构建ATG5敲低的人肺癌H1299细胞株作为ATG5敲低组，未敲低ATG5的H1299细胞作为对照组；荧光定量PCR和Western blot检测肺癌细胞中ATG5的表达和自噬标志物微管相关轻链蛋白3（Microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3，LC3）及死骨片蛋白1（Sequestosome 1，P62）表达，并转染红色荧光标记的LC3质粒观察LC3斑点聚集情况；经南蛇藤素刺激后，以流式细胞术检测细胞凋亡，最后使用Western Blot检测cleaved caspase-3、Bcl-2和Bax等蛋白的表达。 结果 慢病毒感染组ATG5较对照组mRNA和蛋白表达水平明显降低（P < 0.05）；ATG5敲低后LC3-II水平下降，P62水平上升，并且转染后RFP-LC3斑点聚集减少（P < 0.05）。相比于对照组，南蛇藤素明显促进ATG5敲低细胞凋亡（P < 0.01）；ATG5敲低组中促凋亡分子Bax、cleaved caspase-3表达比对照组明显增加（P < 0.05），抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少（P < 0.05）。 结论 ATG5敲低抑制肺癌细胞自噬后，南蛇藤素能够明显增强人肺癌细胞的凋亡，提示抑制肺癌细胞自噬可能为针对性处理肺癌细胞耐药提供新的思路。

miR-31-5p在急性髓系白血病中的表达下调

曹丽霞 陈连香

2017, 37(4):  537-542. 

摘要 ( 181 )   PDF (1179KB) ( 582 )  

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目的 探讨miR-31-5p在急性髓系白血病中的表达变化，及其对白血病细胞功能的影响。方法 用real-time PCR方法检测miR-31-5p在白血病人及正常人外周血单个核细胞中的表达；用miR-31-5p模拟物转染人急性髓系白血病细胞系THP-1细胞，通过CCK-8试验和流式细胞术检测细胞增殖和单核系分化；用荧光报告基因和Western blot方法检测靶基因HuR的表达; 用RNAi方法干扰内源性 HuR的表达，并检测THP-1细胞的增殖和单核系分化。结果 miR-31-5p在急性髓系白血病病人外周血单个核细胞中的表达显著低于正常对照（p<0.05）；在THP-1细胞中过表达miR-31-5p可以抑制细胞增殖，并促进细胞向单核方向分化成熟；HuR为miR-31-5p的靶基因；干扰THP-1内源的HuR表达也会对THP-1的增殖和单核分化产生调控作用。结论 miR-31-5p在急性髓系白血病发生中可通过靶向抑制HuR发挥抑癌基因功能。

研究短文

肺癌组织跨膜型TNF-α较分泌型TNF-α增多

杨鹏 杨斌 林明春 肖礼红 朱小灯 郝川

2017, 37(4):  543-544. 

摘要 ( 156 )   PDF (611KB) ( 389 )  

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AZD2281上调人成髓细胞瘤Daoy细胞系自噬和凋亡相关蛋白表达

张琪 曲宝清 张翠萍 孙异临

2017, 37(4):  545-547. 

摘要 ( 191 )   PDF (844KB) ( 385 )  

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短篇综述

G蛋白偶联受体激酶2活性和表达的调控及其在恶性肿瘤中的作用

徐周纬 严尚学 吴华勋 陈镜宇 张影 魏伟

2017, 37(4):  548-552. 

摘要 ( 260 )   PDF (575KB) ( 787 )  

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G蛋白偶联受体激酶2（GRK2）属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，广泛分布于各种组织中，能够特异性的使活化的G蛋白偶联受体（GPCRs）发生磷酸化及脱敏，从而终止GPCRs介导的信号转导通路。GRK2不仅能够调节GPCRs和非GPCRs，其自身活性和表达也可受到多种因素的调节。GRK2具有多种不同的生理及病理作用，其涉及的许多信号通路与恶性肿瘤的发生发展密切相关。

Sirt3与心血管疾病和长寿关系的研究进展

朱林 巩会平 马艳艳 ELOY YINWANG 杜贻萌

2017, 37(4):  553-556. 

摘要 ( 234 )   PDF (486KB) ( 510 )  

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Sirt3 是一种依赖 NAD+的去乙酰化酶。它与线粒体多种生物功能紧密相连，其中包括营养素氧化、ATP 生成、活性氧自由基(ROS)清除及线粒体稳态等。Sirt3 在心血管疾病的发生和发展中扮演重要角色,人类寿命延长与Sirt3也密切相关。

单核细胞/高密度脂蛋白比值在冠心病诊断和预测预后的研究进展

黄朝发 韦怡春 李菊香

2017, 37(4):  557-560. 

摘要 ( 253 )   PDF (472KB) ( 451 )  

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绝大部分冠心病为冠状动脉粥样硬化所致，目前认为，动脉粥样硬化是一种慢性炎性反应疾病。单核细胞和高密度脂蛋白比值（MHR）是近年新兴的一种炎性反应标记物，其获取简单，检测价格低廉，与冠心病短期和长期的心血管事件发生率及死亡率相关，可作为冠心病预后的预测因素。

外排体在非小细胞肺癌中的研究进展

李凯迪 李文哲 朱凌 杨延莲 梁乃新 李单青

2017, 37(4):  561-566. 

摘要 ( 178 )   PDF (675KB) ( 602 )  

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外排体是一种由细胞产生并主动分泌的囊泡样结构，内含蛋白质、核酸和脂质类物质，主要功能为在细胞间传递相应物质以完成细胞间的通信，并且可以调节微环境的免疫反应。研究表明外排体对肺癌的发生和发展均有重要作用。外排体的蛋白质和microRNA在作肺癌的诊断、预后和预测的生物标志物，以及在肺癌的免疫治疗和抗肿瘤药物的靶向递送方面都有巨大潜能。

膝关节置换术的围术期区域镇痛方式选择

车璐 唐帅 黄宇光

2017, 37(4):  567-570. 

摘要 ( 155 )   PDF (499KB) ( 387 )  

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高质量的围术期疼痛管理对于全膝关节置换术（TKA）后的快速康复和改善功能恢复都十分重要。随着区域麻醉技术的发展和超声在麻醉镇痛领域的应用，股神经阻滞、坐骨神经阻滞和收肌管阻滞等区域麻醉技术以其可靠的镇痛效果和较少的全身不良反应在术后镇痛中的应用比例逐渐提高。局部切口浸润的应用也越来越广泛。无论采用哪种方法，重要的临床需求都是改善功能锻炼期间的镇痛效果和充分保留下肢运动功能。临床实践一直在探索一种安全、持久、有效和无运动神经阻滞的镇痛方法，或多种方法的联合应用，因此，现阶段仍鼓励为TKA患者提供多模式镇痛。

脊柱脊髓手术围术期镇痛管理进展

陈志刚 岳红丽 赵岩 韩如泉

2017, 37(4):  571-575. 

摘要 ( 180 )   PDF (660KB) ( 326 )  

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继血压、脉搏、呼吸和体温之后，疼痛被确认为“第五生命体征”。脊柱脊髓手术的术后疼痛属神经病理性疼痛的范畴。剧烈疼痛可影响患者全身多个系统。因此，脊柱脊髓手术的术后镇痛极为重要。

细胞外组蛋白负面作用研究进展

尹艳伟 孟令波

2017, 37(4):  576-579. 

摘要 ( 208 )   PDF (540KB) ( 609 )  

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释放到细胞外空间的组蛋白，可以引起致死性的败血症、缺血再灌注损伤、创伤、胰腺炎、凝血和血栓形成等。此外，血清组蛋白升高与自身免疫疾病、神经系统疾病及肿瘤等疾病的病理及病理生理过程中有关。因此，细胞外组蛋白可以作为人类多种疾病的生物标志物及治疗靶点。

医学教育

护理本科生医学统计学考试试卷质量测评

徐涛 姜晶梅 韩少梅 薛芳 韩伟

2017, 37(4):  580-583. 

摘要 ( 203 )   PDF (517KB) ( 494 )  

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目的 本研究对北京协和医学院2014级护理本科生的统计学期末考试试卷进行评价分析，为评定护理本科生的教学效果和教学质量提供依据。方法 运用教育测量学理论和教育统计学方法对试卷进行评价，采用难度、区分度、信度（Cronbach α系数）和覆盖度对60份医学统计学期末考试试卷进行质量分析。结果 该试卷的总分平均为（67.8±12.5）分，最低分38分，最高分95分。选择题、填空题、判断题和计算题的失分率分别为33.8％、37.2％、22.5％和24.8％。难题、较难题、中等难度题、较易题和易题各占30.0%、13.3%、20.0%、20.0%和16.7%，平均难度为0.68。试卷的整体区分度为0.30，30道考题中有28道考题（93.3%）的区分度优秀或良好。试卷的信度为0.71。结论 这份考卷具有较好的区分度、信度和总体覆盖度，平均难度也适中，适于护理本科生进行期末测评。此外要从多方面让同学们认识到统计学在医学科学研究中的重要性，增加学习的积极性。

医学生灾难管理认知现状的调查及思考

赵一 潘周娴 曹逸涵 赵峻 张靖承 霍蓝青

2017, 37(4):  584-587. 

摘要 ( 158 )   PDF (576KB) ( 474 )  

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目的 调查现今中国医学院校灾难医学课程的开展情况以及医学生对灾难管理的认知情况。方法 采用调查问卷的形式，让来自全国14所医学院校的医学生就灾难管理的能力进行自我评估，并调查其所在医学院校灾难医学课程的开展情况以及其对灾难管理的学习兴趣。结果 目前国内开设灾难医学课程的学校很少，已开设的相关课程的授课质量也不高，医学生普遍缺乏对灾难管理的系统认识，但对于学习灾难管理知识很感兴趣。结论 需设计高质量的灾难医学教育课程，并在国内医学院校推广，这既符合医学生的需求，又能切实提高医学生及医务工作者在面对灾难事件时的应对能力。

住院医师规范化培训基地管理干部胜任力培训探讨

罗林枝 潘慧 张宇 李琦 赵峻 张抒扬

2017, 37(4):  588-590. 

摘要 ( 157 )   PDF (431KB) ( 389 )  

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在建设高水平住院医师规范化培训基地的过程中，管理干部的胜任力培训是重要的组成部分。管理干部的胜任力内涵分为3个层面，即管理干部的知识胜任力、工作胜任力和解决问题胜任力。对管理干部胜任力的培训，需要对3个层面的胜任力进行分解与分析，并按照特定的培训流程实施。