基础医学与临床 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (1): 137-143.doi: 10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0137
顾炜, 祝剑平, 吴品雯*
GU Wei, ZHU Jianping, WU Pinwen*
摘要: 目的 研究丙泊酚是否通过抑制miR-141-3p的表达,减轻低氧诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12炎性反应和细胞凋亡的分子机制。方法 将PC12细胞分为对照组、低氧组、(5、10、20)μmol/L丙泊酚+低氧组、anti-miR-con+低氧组、anti-miR-141-3p+低氧组、miR-con+20 μmol/L丙泊酚+低氧组、miR-141-3p+20 μmol/L丙泊酚+低氧组。流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡;Western blot检测活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达;相关试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;活性氧荧光探针DCFH-DA法测定活性氧(ROS)含量;ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;RT-qPCR检测miR-141-3p表达。结果 与对照组比较,低氧组PC12细胞的凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和miR-141-3p表达量均升高,SOD活性减弱(P<0.05)。与低氧组比较,5、10、20 μmol/L丙泊酚+低氧组PC12细胞的凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA含量、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和miR-141-3p表达量均随丙泊酚浓度的增加呈降低趋势,SOD活性随丙泊酚浓度的增加呈升高趋势(P<0.05)。Anti-miR-141-3p+低氧组PC12细胞的miR-141-3p表达量、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和细胞凋亡率均比anti-miR-con+低氧组降低,SOD活性比anti-miR-con+低氧组增加(P<0.05)。miR-141-3p+20 μmol/L丙泊酚+低氧组PC12细胞的miR-141-3p表达量、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA含量、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和细胞凋亡率均高于miR-con+20 μmol/L 丙泊酚+低氧组,SOD活性低于miR-con+20 μmol/L 丙泊酚+低氧组(P<0.05)。结论 丙泊酚可能通过抑制miR-141-3p的表达,减轻低氧诱导的PC12细胞炎性反应、氧化应激和细胞凋亡。
中图分类号: