摘要: 目的 探究自噬在高糖高脂引起H9C2心肌细胞系凋亡中的影响。方法 不同浓度高糖高脂(HGHL)处理H9C2心肌细胞不同时间,HE染色并测量心肌细胞表面积;流式细胞计量术检测细胞活性和凋亡率,确定心肌细胞肥大及凋亡的最适浓度和时间;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬指标LC3II、自噬信号通路p62/SQSTM1(p62)、Beclin-1、LAMP2蛋白表达以及自噬抑制剂氯喹预处理后cleaved caspase-3蛋白表达。结果 HGHL处理后H9C2心肌细胞肥大呈浓度和时间依赖性,36 h最显著(P﹤0.001);细胞凋亡呈浓度和时间依赖性增高,36 h凋亡率约50%(P﹤0.001);与对照组相比,HGHL诱导24 h时LC3II蛋白水平显著增加(P﹤0.01),Beclin-1、LAMP2蛋白水平显著下降(P﹤0.05),而p62蛋白水平显著升高(P﹤0.01);与对照组以及干预组相比,氯喹预处理1 h后cleaved caspase-3蛋白表达显著增加(P﹤0.01)。结论 HGHL诱导H9C2心肌细胞肥大并促进其凋亡。HGHL通过同时抑制自噬形成和降解,使自噬体异常堆积,导致细胞凋亡。这表明抑制自噬可能是促进细胞凋亡的重要原因。
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