基础医学与临床 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (10): 1039-1043.
彭清林 张 婷 范东升 郑 伟 谢喜秀 许于飞 许雪梅
Qing-lin PENG, Ting ZHANG, Dong-sheng FAN, Wei ZHENG, Xi-xiu XIE, Yu-fei XU, Xue-mei XU
摘要: 目的 优化人乳头瘤病毒(HPV)18型晚期基因L1并在昆虫细胞中表达,获得HPV 18 L1病毒样颗粒(VLP),制备豚鼠抗血清。方法 联合利用昆虫细胞偏性密码子、C末端截短32个氨基酸、降低mRNA二级结构等策略优化HPV 18 L1基因,合成后克隆入pFastBac1载体,构建重组病毒,感染sf9昆虫细胞72h后进行Western blot表达鉴定,密度梯度离心法纯化后进行纯度鉴定及形态学鉴定,获得HPV 18 L1 VLP,联合弗氏佐剂免疫豚鼠制备抗血清。结果 HPV 18 L1优化基因在昆虫细胞中可有效表达,纯化的HPV 18 L1蛋白纯度达90%以上,电镜观察可见直径约为50nm的VLP,豚鼠免疫血清中HPV 18 L1 VLP 特异性抗体滴度达5.12×105。结论 HPV 18 L1优化基因可在昆虫细胞中高效表达并组装成VLP,制备的高滴度抗血清为HPV 18 L1 VLP疫苗的进一步研究打下基础。
中图分类号: