基础医学与临床 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (10): 1035-1038.
蔡炯 钟彦伟 李方 王世真
Jiong CAI, Yan-wei ZHONG, Fang LI, Shi-zhen WANG
摘要: 目的 包装和纯化携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,为阿尔茨海默病的基因治疗创造条件。 方法 用Lipofectamine 2000将pSNAV2.0-Abeta-scFv质粒转染BHK-21细胞并用G418筛选稳定细胞系。培养稳定细胞系用辅助病毒HSV1-rc/ UL2感染包装携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒。用氯仿-PEG/NaCl-氯仿法和离子交换层析法纯化重组腺相关病毒,SDS-PAGE和PCR方法检测纯化的病毒。用地高辛标记探针测定重组腺相关病毒的物理滴度。利用水迷宫测试重组病毒对转基因阿尔茨海默病小鼠模型的治疗效果。结果 带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒的纯度为98%,物理滴度为1×1012vg/ml。经过治疗的小鼠模型潜伏期明显缩短。 结论 利用HSV1系统成功包装和纯化了携带Aβ单链抗体基因的腺相关病毒,动物实验表明对阿尔茨海默病具有治疗作用。