摘要: 目的 探讨5-脂氧合酶活化蛋白(5-lipoxygenase activating protein,FLAP)抑制剂MK886对食管癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 用不同浓度2.5、5、10、20、40、80μmol/L的MK886干预体外培养的KYSE-150和TE-3细胞; xCELLigence RTCA系统实时测定细胞增殖抑制率,同时确定半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。FCM法检测不同浓度药物处理后的食管癌细胞的细胞周期变化水平。蛋白质印迹法检测不同浓度药物处理后细胞凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。结果 MK886对KYSE-150和TE-3细胞的增殖抑制率随着浓度增加而增强(P<0.05)。KYSE-150处理的IC50浓度为29.11μmol/L,TE-3处理的IC50浓度为27.47μmol/L。MK-886处理浓度增加到25μmol/L,食管癌细胞G0/G1期滞后增加明显(P<0.001),MK-886处理浓度增加到50μmol/L,食管癌细胞G2/M期增加明显(P<0.005)。蛋白质印迹检测MK-886处理后食管癌细胞随着浓度增加,PAPR蛋白表达水平无明显差异,Caspase-9表达水平没有增强,Cleaved caspase-3表达水平增强(P<0.001),LC-3A/B-Ⅱ蛋白表达水平增强(P<0.001)。结论 MK886能抑制人食管癌细胞KYSE-150和TE-3的增殖,引起凋亡,其机制与改变细胞周期和Casepase-3凋亡机制有关,但是高浓度的药物处理会引起食管癌细胞的自噬反应,给临床用药提供一定理论参考。
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