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2019年 第39卷 第4期    刊出日期：2019-04-05

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研究论文

CCR2抑制剂延缓输尿管结扎小鼠肾纤维化

吴清凤 孙世仁 段梦露 陈阳 宁晓暄

2019, 39(4):  461-466. 

摘要 ( 331 )   PDF (4297KB) ( 522 )  

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目的 探究趋化因子受体2（CCR2）抑制剂（RS504393）在小鼠肾纤维化中的作用及其机制。方法 将小鼠随机分为假手术组（sham组，单侧输尿管分离术）、UUO模型组（单侧输尿管结扎术）和给药组(UUO+RS504393，术前3天开始灌胃给予RS504393 25 mg/kg，早晚各1次，连续17d）；用Masson染色和HE染色观察肾脏纤维化程度和炎性细胞变化；流式细胞计量术分析各组小鼠肾脏CCR2及CD11b+Ly6C+单核细胞的比例。结果 UUO模型组肾间质炎性细胞数量较假手术组明显增多（P<0.05），给药组炎性细胞数量较模型组显著减少（P<0.05）；UUO模型组肾脏胶原蛋白沉积面积较假手术组显著增加（P<0.05），给药组胶原沉积面积较模型组明显减少（P<0.05）；UUO模型组肾脏CCR2比例较假手术组显著增多（P<0.05），给药组CCR2比例较模型组减少（P<0.05）；UUO模型组肾间质CD11b+Ly6C+单核细胞群比例较假手术组明显增加（P<0.05），给药组CD11b+Ly6C+单核细胞群比例较模型组明显减少（P<0.05）。结论 CCR2抑制剂RS504393可减少CD11b+Ly6C+单核细胞浸润延缓肾脏纤维化。

鞘内应用GIP受体拮抗剂抑制大鼠切口痛的敏化

孙雨晴 郭瑞娟 李俊发 王云

2019, 39(4):  467-472. 

摘要 ( 435 )   PDF (3405KB) ( 398 )  

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目的 利用大鼠足底切口痛模型，探究葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽（GIP）受体在疼痛中枢敏化中的作用。方法 将大鼠随机分为5组：空白对照组（Ctrl组）、假手术组（Sham组）、切口痛组（P组）、切口痛+鞘内注0.9%NaCl溶液组（I组）和切口痛+鞘内注GIP受体拮抗剂（Pro3）组（M组）。测定切口痛术前及术后3 h及1、3和5 d大鼠累计疼痛评分（CPS）和机械缩足阈值（PWT）；Western blot检测GIP受体的表达；免疫荧光技术确定大鼠脊髓背角GIP受体的时空表达。结果 切口痛术后3 h时CPS评分最高（P<0.05），PWT最低（P<0.05）；脊髓背角GIPR的表达水平在切口痛术后1 d显著上调（P<0.001）；GIP受体拮抗剂（Pro3）可提高大鼠的机械缩足阈值，并在给药30 min时镇痛效果最佳（P<0.001）；GIP受体位于脊髓背角浅层的神经元上，在小胶质细胞及星形胶质细胞上没有分布。结论 GIP受体参与了疼痛的中枢敏化，是切口痛的潜在治疗靶点。

抗菌肽merecidin诱导人肺腺癌细胞系A549凋亡

战仕胜 李军 杨婷婷 王雅蓉 王秀青

2019, 39(4):  473-477. 

摘要 ( 328 )   PDF (2255KB) ( 367 )  

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目的 探讨抗菌肽merecidin对人肺癌细胞系A549的作用及其机制。方法 实验分为对照组（Ctrl）、顺铂干预组（cisplatin 40 μmol/L）、merecidin干预组（merecidin 25/35 μmol/L）、caspase抑制剂组（z-VAD-fmk）、caspase抑制剂+ merecidin干预组（z-VAD-fmk+ merecidin 25/35 μmol/L）。MTT法检测细胞增殖，Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡，Western blot检测caspase-3、8、9、激活型caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 抗菌肽merecidin 明显抑制A549细胞增殖(P＜0.05），merecidin处理24 h后的IC50值为34.8 μmol/L。与Ctrl组相比，merecidin 25/35 μmol/L组的凋亡率显著升高（P＜0.05）；与merecidin 25/35 μmol/L组相比，z-VAD-fmk+merecidin 25/35 μmol/L组的凋亡率并没有下降。caspase-3、8、9蛋白表达无显著变化且未检测到激活型caspase-3蛋白表达。Bcl-2蛋白表达下调（P＜0.05）及Bax蛋白表达增多（P＜0.05）。结论 抗菌肽merecidin可以抑制人肺腺癌细胞A549的增殖并诱导其凋亡。

APP/PS1双转基因AD小鼠术后认知功能紊乱及其机制

于琳琳 李正迁 韩登阳 杨宁 倪诚 史成梅 郭向阳

2019, 39(4):  478-482. 

摘要 ( 323 )   PDF (526KB) ( 316 )  

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目的 探究阿尔茨默海病（AD）双转基因小鼠(APP/PS1)在麻醉手术后不同时程的认知功能改变及其可能的机制。方法 将APP/PS1小鼠随机分为对照组（不予手术麻醉干预）和实验组（2.5%七氟烷麻醉下行剖腹探查术）。术后1和3 d行条件恐惧实验评估小鼠认知功能；并分别在术后12及24 h和3 d用酶联免疫吸附实验检测海马组织炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α及淀粉样蛋白Aβ42蛋白含量；用Western blot检测α-突触核蛋白的表达。结果 与对照组相比，实验组小鼠在术后1和3 d，与场景有关的僵直时间均显著减少。术后24 h实验组小鼠海马组织内IL-1β、IL-6及TNF-α的含量显著高于对照组（P＜0.05）；同时Aβ42蛋白和α-突触核蛋白的表达在术后24 h也显著上调（P＜0.05）。结论 AD双转基因小鼠接受麻醉手术后，在术后早期即可出现认知功能障碍，其发生机制可能与海马区α-突触核蛋白与Aβ42表达异常及神经炎性反应相关。

抑郁症患者中升高的前列腺素E1与抑郁样行为相关

马铭婕 许琪

2019, 39(4):  483-488. 

摘要 ( 539 )   PDF (503KB) ( 368 )  

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目的 研究在抑郁症（MDD）患者队列外周血及慢性不可预知温和型应激（CUMS）小鼠模型大脑组织中前列腺素E1（PGE1）浓度及其代谢通路上的关键基因（PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES）表达量的改变,以明确PGE1的改变与MDD疾病间的关系 方法 用高效液相色谱（HPLC）检测受试者外周血浆和CUMS小鼠脑组织中PGE1和PGE2的浓度；用RT-qPCR检测PLA2、PTGS1、PTGS2和PTGES的mRNA表达水平。 结果 在MDD患者中，血浆PGE1浓度和PTGS1的表达水平均显著上升（p<0.05）。这一结果在CUMS小鼠外周血和大脑杏仁核组织中得到了有效验证。 结论 PGE1在MDD中的上升，可能与前列腺素合成通路的功能亢进有关。

外源性HER2基因导入未能提高HER2阴性胃癌细胞系对曲妥珠单抗的敏感性

张朦琦 陈祖华 杨菁 章程 沈琳 高静

2019, 39(4):  489-494. 

摘要 ( 415 )   PDF (2182KB) ( 325 )  

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目的 探索外源性人表皮生长因子受体2（HER2）基因导入使HER2阴性胃癌细胞系对曲妥珠单抗敏感性的影响。方法 构建人HER2真核表达载体，转染人HER2阴性胃癌细胞系（HGC-27和MGC803）及正常胃上皮细胞GES1（作为对照），细胞免疫荧光与蛋白印迹（Western blot，WB）检测HER2表达及下游信号通路变化，CCK-8法检测细胞增殖活性。结果 HER2阴性胃癌细胞及正常细胞导入外源性HER2后，HER2蛋白表达明显上调，但磷酸化HER2（pHER2）表达无变化。外源性HER2基因导入后，HER2阴性细胞对曲妥珠单抗的敏感性无增加，甚至有下降趋势。此外，外源性HER2基因导入后，HER2下游PI3K/AKT、MAPK通路不但未激活，反而受到明显抑制。结论 外源性HER2基因导入无法使HER2阴性胃癌从曲妥珠单抗治疗中获益，主要原因可能是外源性HER2基因无法使其下游PI3K/AKT、MAPK通路激活，外源性和内源性HER2发挥的作用可能不同，有待后续深入研究。

重组人源galectin-1通过调节自噬水平保护神经元

李毅 伍超 任静 高歌 段春礼 杨慧 鲁玲玲

2019, 39(4):  495-500. 

摘要 ( 316 )   PDF (1263KB) ( 375 )  

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目的 制备重组人源半乳糖凝集素1（rhGalectin-1），并研究其对受损神经元自噬水平的促进作用。方法 利用PCR技术构建pEGX-4T-1-Galectin-1原核生物蛋白表达质粒，构建工程菌。收集rhGalectin-1蛋白，并进行纯化及纯度鉴定。用细胞毒性物质鱼藤酮（rotenone）处理神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系，检测在有无rhGalectin-1预处理的情况下自噬标志物LC3 II以及p62的水平，分析不同组别细胞的自噬水平。结果：成功制备了具有生物学活性的rhGalectin-1，发现rhGalectin-1可降低鱼藤酮对SK-N-SH细胞的毒性作用。鱼藤酮处理SK-N-SH细胞后，其自噬水平有所降低。表现为LC3 II水平的降低以及p62水平的增加（p＜0.05）。而rhGalectin-1预处理组细胞自噬水平明显增加，LC3 II水平的升高，p62水平的降低（p＜0.05）。当用自噬阻断剂bafilomycin阻断自噬体降解后，可观察到rhGalectin-1预处理并给予鱼藤酮刺激组较单独鱼藤酮刺激组LC3 II水平明显增加（p＜0.05），此现象说明了rhGalectin-1处理的确增强了自噬水平而不是抑制自噬体的降解。结论：rhGalectin-1可以增强神经元的自噬水平，这一特性可能在神经元的毒性抵抗以及损伤后修复过程中发挥重要作用。

腺相关病毒介导的体内睾丸组织基因特异性敲除系统的建立

邹定峰 罗艳云 李凯 卢艳 李永玲 缪时英 王琳芳 宋伟

2019, 39(4):  501-508. 

摘要 ( 452 )   PDF (5057KB) ( 673 )  

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目的 建立一套可用于体内睾丸组织特异性敲除基因的系统。方法 利用同源重组技术将CRISPR/Cas9 系统中sgRNA功能元件插入到AAV表达载体，将人源Wee1 2# sgRNA构建入改造的AAV-sgRNA（新版）载体中进行病毒包装，并感染稳定表达Cas9 的Hela-spCas9细胞验证该载体的基因敲除效率。筛选睾丸组织特异表达基因Sycp3的sgRNA靶点，构建入AAV-sgRNA（新版）载体中，进行病毒包装，利用显微注射技术将病毒注射入小鼠睾丸组织曲细精管内，通过T7E1分析体内细胞的基因敲除效果。结果 构建成功的AAV-sgRNA载体能够进行病毒包装并在体外细胞水平上对人源Wee1进行基因编辑，与慢病毒介导的CRISPR/Cas9系统中的载体编辑效率相比无明显差异。同时，该系统能在体内水平对Sycp3进行基因编辑。结论 成功建立一套可用于在体内睾丸组织中进行特异性敲除目标基因的系统，为生殖体内功能研究提供一个新的思路和方法。

下调牛磺酸调节基因1减轻氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞氧化损伤

陈德才 马从乾 杨轲 陈辉 王雅

2019, 39(4):  509-513. 

摘要 ( 208 )   PDF (450KB) ( 285 )  

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目的 研究牛磺酸调节基因1(TUG1)对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）氧化损伤的影响。方法 将HUVEC分为： 对照组、ox-LDL组(含有100 g/mL的ox-LDL细胞培养液处理）、si-NC＋干预组(转染siRNA阴性对照）和si-TUG1＋干预组(转染TUG1 siRNA）。实时定量PCR检测HUVEC中TUG1表达；DCFH-DA法检测细胞活性氧（ROS）水平；WST法检测细胞超氧化物歧化酶 ( SOD)活性；TBA比色法检测培养液中丙二醛（MDA）含量；LD-P法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性；硝酸还原酶法检测培养液中一氧化氮（NO）含量；流式细胞计量术检测细胞凋亡，Western blot检测细胞中c-caspase-3蛋白水平。结果 ox-LDL组HUVEC中TUG1表达水平较对照组升高（P<0.05）。TUG1 siRNA转染可下调TUG1的表达（P<0.05）。ox-LDL组HUVEC中的ROS水平升高（P<0.05），SOD活性降低（P<0.05），培养液中MDA含量升高（P<0.05），LDH活性升高（P<0.05），NO含量降低（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞中c-caspase-3蛋白水平升高（P<0.05）。si-TUG1＋干预组显著减轻ox-LDL组的上述变化（P<0.05）。结论 下调TUG1减轻ox-LDL诱导的HUVEC氧化损伤，减少HUVEC凋亡。

上皮间质转化相关蛋白在结肠癌及同期肝转移组织中的表达差异

李袁飞 朱国强 马艳波 李晓晴 平梅 李娟芳

2019, 39(4):  514-518. 

摘要 ( 219 )   PDF (1510KB) ( 371 )  

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目的 研究结肠癌伴随肝转移患者原发灶及转移组织中E钙黏素，N黏黏素和波形蛋白的表达差异。方法 选取62例结肠癌患者，分为3组：无转移的结肠癌组(n=42)，伴肝转移的结肠癌原发灶组(n=20) 和肝转移灶组(n=20)。用荧光定量PCR、Westernblot和免疫组化法检测E钙黏素，N-钙黏素和波形蛋白的表达，及其与结肠癌临床病理特征的关系。结果 伴肝转移组结肠癌较无转移结肠癌组、E-钙黏素表达下调（P ＜0.01），N-钙黏素和波形蛋白表达上调（P ＜0.05）。结肠癌原发灶与肝转移灶相比较，E-钙黏素表达平均吸光度值0.10±0.01比0.06±0.02（P ＜0.01）；N钙黏素表达平均吸光度值0.07±0.02比0.09±0.01（P ＜0.05）；波形蛋白表达平均吸光度值0.06±0.01比0.09±0.02（P ＜0.01）。E钙黏素，N钙黏素和波形蛋白的表达与TNM分期和淋巴结转移均密切相关（P ＜0.05）。结论 E-钙黏素，N-钙黏素和波形蛋白在结肠癌及伴随肝转移组织的表达差异对其预后可能具有重要意义。

沉默FOXO1抑制H2O2诱导的大鼠肺泡2型上皮细胞凋亡

刘莹 张艳丽 王秀芳

2019, 39(4):  519-523. 

摘要 ( 223 )   PDF (776KB) ( 270 )  

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目的 探讨沉默叉头蛋白O1(FOXO1)基因表达对H2O2诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系(RLE-6TN)活力、凋亡的影响及机制。方法 随机将RLE-6TN细胞分为对照组、H2O2组、si-FOXO1组和NC组。 CCK8法及膜联蛋白 V-FITC（Annexin V-FITC）/碘化丙啶(PI)细胞凋亡试剂盒分别检测细胞活力和凋亡率；Western blotting检测FOXO1、p53、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38）蛋白表达。结果 H2O2可明显上调RLE-6TN细胞FOXO1、p53、Bax和p-p38蛋白表达，抑制细胞活力，诱导细胞凋亡（P<0.05），而转染FOXO1 siRNA后可明显降低H2O2对FOXO1、p53、Bax和p-p38蛋白表达上调、细胞活力抑制及凋亡诱导作用（P<0.05）。结论 沉默FOXO1基因表达可抑制H2O2诱导的RLE-6TN凋亡，其机制可能与下调p38MAPK信号通路有关。

小鼠卵母细胞减数分裂过程中新型微管蛋白 ε-tubulin稳定表达并与纺锤体的组装和维持相关

周晴 王思敏 王倩 翁静 梁元晶 马伟

2019, 39(4):  524-528. 

摘要 ( 261 )   PDF (3164KB) ( 562 )  

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目的 研究新型微管蛋白ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的蛋白表达、亚细胞定位及其与纺锤体的相关性。方法 用Western blot法检测ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期的蛋白表达；免疫荧光染色分析ε-tubulin在减数分裂进程中的亚细胞定位模式及其与纺锤体的相关性。结果 ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期均有稳定的蛋白表达，在减数分裂前期均匀分布在细胞核中，在生发泡破裂后直到第二次减数分裂中期始终保持与纺锤体微管的共定位特性，并持续存在于染色体上。ε-tubulin对纺锤体毒性药物Taxol和Nocodazole 敏感并呈现出与微管一致的反应性。 结论 小鼠卵母细胞内新型微管蛋白ε-tubulin稳定表达并与纺锤体的组装和维持相关。

糖尿病患者血液细胞来源多能干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞

黄红莉 梁淑贞 林茂 陈继冰 牛立志

2019, 39(4):  529-535. 

摘要 ( 261 )   PDF (2101KB) ( 357 )  

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目的 建立和鉴定1型糖尿病（T1DM）患者血液细胞来源诱导多能干细胞（iPSCs），研究其在体外诱导分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）的潜能及对糖尿病小鼠的治疗效果。方法 将表达Oct4、Sox2、Lin28、L-Myc和Klf4转录因子的oriP/EBNAl附加体电转染T1DM患者外周血中红系祖细胞使其重编程获得iPSCs，通过形态、核型鉴定、碱性磷酸酶染色、RT-PCR和体外畸胎瘤实验检测其干细胞多能性特性。通过4个阶段诱导iPSCs分化为IPCs，对获得的细胞进行RT-PCR检测和葡萄糖刺激实验，将其移植入C57BL/6J雄性糖尿病小鼠左肾包膜下，监测血糖、体重和糖耐量变化。结果 获得的iPSCs核型正常，碱性磷酸酶染色呈阳性，表达干细胞多能性基因Oct4、Sox2、Lin28、L-Myc和Klf4，畸胎瘤实验可分化为三胚层细胞。获得的IPCs表达胰岛β细胞特异性基因Pdx-1、Insulin和Nkx6.1，在葡萄糖刺激下分泌C肽。移植后，糖尿病小鼠血糖降低，体质量恢复，对葡萄糖调控能力增强。结论 T1DM患者血液细胞的iPSCs可诱导分化为IPCs，移植至1型糖尿病小鼠体内具有治疗作用。

Klotho蛋白减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞系H9C2损伤

李宁 孙满意 孙国勇

2019, 39(4):  536-540. 

摘要 ( 230 )   PDF (1106KB) ( 226 )  

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目的 研究klotho蛋白对低氧-复氧诱导的心肌H9C2细胞系损伤的保护作用及其机制。方法 将H9C2心肌细胞分为对照组、低氧/复氧组（1% O2低氧6 h， 5% CO2以及95%空气培养箱中复氧2 h）和klotho蛋白（10 μg/mL）干预组。通过酶标仪间接测定细胞内钙离子（[Ca2+]i）水平；CCK8法和TUNEL法分别检测细胞活性及细胞凋亡；分光光度法检测细胞中钠ATP酶（Na+/ K+ - ATPase，NKA）和反向模式钠/钙交换体（Na+/Ca2+-exchange，NCX）的活性。结果 体外培养的H9C2细胞低氧/复氧（6 h/2 h）处理后可明显降低H9C2细胞活性（p＜0.05）；增加细胞内Ca2+水平和凋亡率（p＜0.05）；降低细胞中Na+/ K+ - ATPase的活性（p＜0.05）；增加反向模式Na+/Ca2+交换体的活性（p＜0.05）；10 μg/mL klotho蛋白处理可明显减轻上述损伤。结论 klotho蛋白可减轻低氧/复氧诱导下的H9C2细胞内钙超载，最终减少该细胞株细胞的凋亡。

姜黄素降低局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质缺血半暗带神经元丢失

蒋珍秀 陈军 刘宁 王颖 谢莉红

2019, 39(4):  541-545. 

摘要 ( 219 )   PDF (1341KB) ( 339 )  

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目的 探讨姜黄素减轻局灶脑缺血/再灌注损伤的可能机制。方法 将大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（tMCAO+Vehicle）、姜黄素组（tMCAO+Cur），每组15只。于再灌注后24 h，采用Longa评分评价各组大鼠神经功能，RT-qPCR检测各组大鼠大脑皮质缺血半暗带内Shh、Ptc和Smo mRNA含量。免疫荧光共聚焦检测大脑皮质缺血半暗带内NeuN阳性细胞数量和Gli蛋白在细胞内分布情况。结果 再灌注后24 h，tMCAO+Cur组大鼠Longa评分明显低于tMCAO+Vehicle组（P<0.05）。tMCAO+Cur组大脑皮质缺血半暗带内NueN阳性神经元较tMCAO+Vehicle组明显增多（P<0.05）。与Sham相比，tMCAO+Vehicle和tMCAO+Cur组大脑皮质半暗带内Shh、Ptc和Smo mRNA表达明显升高（P<0.05），tMCAO+Cur组Shh、Ptc-1、Smo mRNA表达明显高于tMCAO+Vehicle组（P<0.05）。免疫荧光共聚焦结果显示Sham组缺血半暗带内Gli-1蛋白主要分布在细胞浆，缺血后Gli-1蛋白部分转位至细胞核，tMCAO+Cur组Gli-1蛋白主要分布在细胞核。结论 姜黄素治疗可促进局灶脑缺血/再灌注模型大鼠神经功能恢复，减少大脑皮质缺血半暗带内神经元丢失。

miR-216a-5p通过抑制HMGB1降低胃癌细胞系MGC-803的增殖和迁移

崔艳丽 李小亮 何利珍

2019, 39(4):  546-551. 

摘要 ( 215 )   PDF (1620KB) ( 244 )  

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目的 探讨miR-216a-5p对胃癌细胞增殖和迁移的影响及其分子机制。方法 用Western blot检测胃癌和癌旁组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达，RT-qPCR检测miR-216a-5p的表达。用人工合成的miR-216a-5p模拟物和其抑制物，转染胃癌细胞MGC-803。MTT检测细胞增殖，划痕法检测细胞迁移。双荧光素酶报告实验和Western blot检测miR-216a-5p和HMGB1之间的靶向关系。结果 与癌旁组织相比，HMGB1在胃癌组织中高表达，miR-216a-5p在胃癌组织中低表达（P < 0.05）。miR-216a-5p模拟物上调胃癌细胞miR-216a-5p的表达水平，抑制细胞的增殖和迁移；miR-216a-5p抑制物下调miR-216a-5p的表达水平，促进胃癌细胞的增殖和迁移（P < 0.05）。miR-216a-5p可作用于HMGB1的3’UTR并抑制其表达。结论 miR-216a-5p通过靶向抑制HMGB1的表达降低胃癌细胞系MGC-803的增殖和迁移。

丙泊酚减轻过氧化氢诱导的心肌细胞系H9C2损伤

王磊 朱自强 袁丽霞 袁孝伟

2019, 39(4):  552-557. 

摘要 ( 226 )   PDF (1796KB) ( 309 )  

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目的 研究丙泊酚对过氧化氢（H2O2）诱导的心肌细胞系H9C2损伤及活性氧（ROS）水平的影响。方法 将心肌细胞分成对照组、H2O2处理组和15、30和60 μmol/L丙泊酚干预组。MTT检测细胞活力；二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率；流式细胞计量术检测细胞凋亡；Western blot检测细胞中激活型caspase-3（cleaved caspase-3）、胞浆和线粒体中细胞色素C（Cytochrome C）蛋白水平；黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶 ( SOD)活性；钼酸铵法检测过氧化氢酶（CAT）活性；二硫代二硝基苯甲酸法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性；硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA）含量；二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯法检测ROS活性；JC-1法检测线粒体膜电位。结果 与对照组比较，H2O2处理组细胞活力降低；LDH漏出率和凋亡率升高；cleaved caspase-3蛋白水平及胞浆中Cytochrome C水平升高；线粒体Cytochrome C水平降低；SOD、CAT和GSH-Px活性降低；MDA及ROS含量升高；线粒体膜电位下降（P<0.05）。与H2O2处理组比较，15、30和60 μmol/L丙泊酚组细胞活性升高；LDH漏出率降低；凋亡率和cleaved caspase-3水平降低；胞质中Cytochrome C蛋白水平减少；线粒体中Cytochrome C水平升高；细胞SOD活性、CAT活性和GSH-Px活性升高；MDA含量和ROS含量降低；线粒体线粒体膜电位升高（P<0.05）。结论 丙泊酚可以减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤，减少细胞凋亡并降低细胞ROS水平。

研究短文

地高辛标记的斑马鱼酪氨酸羟化酶TH2基因RNA探针的制备与鉴定

吴小环 刘文林 黄巧瑶 刘强

2019, 39(4):  558-559. 

摘要 ( 174 )   PDF (574KB) ( 262 )  

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短篇综述

细胞焦亡及相关疾病的研究进展

何明月 袁芳 刘映红

2019, 39(4):  560-563. 

摘要 ( 392 )   PDF (335KB) ( 846 )  

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细胞焦亡是由Gasdermin蛋白介导的一种程序性炎性细胞死亡方式，分为依赖caspase-1的经典途径和依赖caspase-4/5/11的非经典途径。炎性小体的激活在此过程中扮演重要角色。细胞焦亡参与肾脏疾病、动脉粥样硬化、神经系统疾病、感染性疾病等的发生发展,并发挥重要作用。通过对细胞焦亡作用机制及相关疾病的研究，为临床疾病的防治提供新思路。

NLRC4炎性小体的研究进展

俞源源 刘映红 袁芳

2019, 39(4):  564-568. 

摘要 ( 480 )   PDF (928KB) ( 521 )  

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炎性小体是胞质内的一组多蛋白复合体，一方面它能调节半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶 1 的活化，促进IL-1β 和 IL-18 成熟与分泌，引起炎性反应；另一方面可以引起细胞焦亡。NLRC4炎性小体的主要信号途径为：激活物（如细菌鞭毛蛋白），感应蛋白（NAIP），核效应蛋白（NLRC4），连接蛋白（ASC），效应蛋白。NLRC4活化的主要调控机制是：配体结合机制和磷酸化作用。NLRC4是肠道免疫的重要组成成分，可抵御多种病原体,并与多种人类疾病相关：如自身炎性疾病、糖尿病肾病、胸腺癌等。

循环5-羟色胺对胆汁酸稳态的影响

秦红岩 左晓 武新安

2019, 39(4):  569-572. 

摘要 ( 252 )   PDF (308KB) ( 323 )  

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5-羟色胺（5-HT）是人体重要的神经递质和胃肠激素，中枢神经系统和外周循环中的5-HT分属于完全独立的系统，循环5-HT主要来源于肠道。循环5-HT对肝脏胆酸合成酶及外排转运体具有调控作用，并可通过调控回肠及肾脏胆酸转运体影响胆酸的肠-肝循环及肾排泄，说明外周5-HT对胆汁酸稳态具有调控作用。研究并阐明5-HT对胆酸稳态的影响及机制，可为胆汁酸紊乱性疾病的发病机制研究提供线索，并为其治疗靶点的发现提供依据。

长链非编码RNA 在自身免疫性疾病中的研究进展

李林林 吴聪

2019, 39(4):  573-576. 

摘要 ( 243 )   PDF (322KB) ( 360 )  

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长链非编码RNA（lncRNA）是一类长度超过200 nt的非编码RNA。lncRNA可在生命活动的多个水平调控基因表达从而影响生物学过程。lncRNA与免疫细胞活动密切相关，能够通过调控免疫细胞分化发育以及免疫细胞效应功能参与自身免疫性疾病的发生发展。

环状RNA在白血病发生与发展中的研究进展

马文娟 赵川 陈彻

2019, 39(4):  577-580. 

摘要 ( 234 )   PDF (320KB) ( 257 )  

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环状RNA(circRNA)是一种独特的内源性非编码RNA。大多数circRNA在生物体内是保守的并且经常显示在组织发育阶段特异性的表达。环状RNA在肿瘤的发生和发展调控中起到关键性的作用。因此，circRNA作为研究消化系统、妇科等肿瘤疾病的热点之一，发现其可以作为新的肿瘤标志物以及可能成为临床治疗的新靶点。

新型靶向药物与PTEN在肝癌中耐药的相关性研究进展

林剑 张谢 李宏

2019, 39(4):  581-584. 

摘要 ( 384 )   PDF (393KB) ( 366 )  

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PTEN是继p53发现之后第二位最常突变的抑癌基因，其变异或丢失与肝癌发生有着紧密的关系。索拉非尼是FDA批准的口服多激酶抑制剂，是晚期肝癌一线的新型靶向治疗药物，但长期服用可导致耐药。索拉菲尼在肝癌中耐药机制研究发现与PTEN靶向作用密切相关，其通过PTEN表达量下调，激活PI3K/Akt信号通路，或微小RNA调控PTEN后表达量降低，从而导致索拉非尼在肝癌中耐药；通过中药提取物、Akt抑制剂等方法间接提高PTEN表达量可以降低索拉菲尼耐药，从而恢复索拉菲尼在肝癌细胞中的敏感性。

Pyk2与肿瘤关系的研究进展

王站 张玉石

2019, 39(4):  585-588. 

摘要 ( 316 )   PDF (321KB) ( 504 )  

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富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶（Pyk2)是黏着斑激酶家族中的一员。Pyk2参与包括乳腺癌、肝癌在内的多种肿瘤的发生、浸润及转移，并且与肿瘤的预后密切相关。明确Pyk2在肿瘤发生发展中的作用，能为新的抗癌靶向药物的研发提供理论基础。

microRNA在心脏重塑中的研究进展

陈阳 王婧 马丽杰

2019, 39(4):  589-593. 

摘要 ( 203 )   PDF (408KB) ( 303 )  

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microRNAs(miRNAs)通过对其靶基因的转录后调控参与胚胎发育、细胞增殖、分化及凋亡等过程，与心血管疾病的发生发展密切相关。心脏重塑目前缺乏有效的治疗靶点和有效的诊疗标记物,并且心脏重塑的机制研究还不够深入。目前发现miRNAs可通过不同的分子机制调节心肌纤维化、心肌肥大以及能量代谢调节重塑。

医学教育

临床医学类学生对卫生学课程认知情况及教学满意度调查

严紫艳 梁玉凤 刘奔波 宋凤梅 张朝晖 黄波

2019, 39(4):  594-598. 

摘要 ( 201 )   PDF (414KB) ( 272 )  

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目的 为了解临床专业预防医学教学现状，为临床专业卫生学课程的教学改革工作提供依据。方法 随机选取南华大学临床医学、全科医学、口腔医学、麻醉医学、影像医学等专业的学生进行问卷调查，问卷内容包括学生对课程的认知情况、对教学设置、教学效果的评价等。 结果 84.8%的学生认为有必要学习卫生学课程，85.8%的学生认为有助于今后的学习与工作，90.4%的学生认为有助于深化预防为主的观念，57.1%的学生认为本课程与临床的结合程度不够紧密。学生对理论课程中预防保健策略和措施重要性认知度最低，最感兴趣的实验内容为饮用水消毒。 结论 目前学生对卫生学课程教学认知度较高，但学生的学习主动性有待提高，高校应结合学生需求，积极地进行教学改革，为社会培养合格的医学人才。

内科住院医师规范化培训中的模拟教学探索

夏鹏 赵雪 李菁 李晓青 李航 严晓伟 张奉春

2019, 39(4):  599-603. 

摘要 ( 187 )   PDF (817KB) ( 351 )  

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目的 在住院医师规范化培训广泛开展的大环境下，北京协和医院内科采取模拟教学模式进行新的探索。方法 在内科规培住院医师中进行了问卷调查，并设计模拟教学针对部分学员进行了重症病例模拟培训。结果 内科规培学员重症病例暴露较少，对提高值班能力的教学内容较为期待。目前已建立内科重症病例模拟教学机制，初步运行效果良好。结论 在内科住院医师规培中应用模拟教学将有助于提高培训水平。

基于e-learning的医学科研管理模式在学术交流领域的实践与经验

白慧君 高百红 王健伟 潘慧

2019, 39(4):  604-607. 

摘要 ( 189 )   PDF (414KB) ( 226 )  

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在线学术交流方式如e-learning等，克服传统学术交流模式中学科领域、经费、空间和时间的限制，能够有效提升学术交流效率。当下，越来越多的科技工作者利用e-learning等在线学术交流平台，分享科技信息、交流学术观点、追踪最新科学研究趋势，形成高效学术交流模式。本文对医学科研管理人员运用e-learning等方式协助科技工作者进行高效、共享的学术交流，总结目前的实践应用现状及经验，并为未来e-learning在学术交流领域的扩大使用提供建设性启示。

医学生和带教医师在肾内科临床教学中的认知差异

夏鹏 赵雪 施潇潇 郑可 李明喜 李雪梅 陈丽萌

2019, 39(4):  608-612. 

摘要 ( 207 )   PDF (444KB) ( 245 )  

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目的 观察北京协和医院内科病房医学生临床学习现状，比较学生和教师对教学需求和内容之间目标和执行过程的差异。方法 对2016年5月至2018年4月在肾脏内科病房轮转的医学生和肾内科全体临床带教医师进行问卷调查，了解对于教学目标、教学活动的频率和形式、教学活动顺利开展的困难等。结果 医学生轮转教学目标欠明确，专门安排的教学活动偏少。医学生和带教医师对教学目标的认知存在差异，基本的教学内容完成度较好。临床工作负担重和激励机制不足是顺利开展教学活动的主要困难。结论 应当明确教学目标，调整教学模式，采用多样化的教学方式，动员教学力量以改进教学工作。

肿瘤学教学现存主要问题与放射肿瘤学规范化培训基地改革建议

宋泉毅 张大昕

2019, 39(4):  613-616. 

摘要 ( 265 )   PDF (423KB) ( 347 )  

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中国肿瘤学起步较世界发达国家较晚，肿瘤放射治疗学做为其三级学科也受到牵连。当前肿瘤学课程设置偏少，放疗人才短缺，肿瘤心理教育基本为零。结合中国现行住院医师规范化培训，放射肿瘤基地身担承上启下的重任。本文从教材课程设置、心理人际沟通、教学模式等方面分别进行分析并提出改革建议，力求为本基地规培的改革发展贡献微薄力量。