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2012年 第32卷 第3期    刊出日期：2012-03-05

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研究论文

Reg3α基因影响胰岛内皮细胞分泌胰岛素

滕兆刚 范恒 王立斌 李玉奎 魏军

2012, 32(3):  241-244. 

摘要 ( 1964 )   PDF (514KB) ( 759 )  

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目的 构建小鼠胰腺损伤模型，利用全基因组芯片技术筛选出高表达基因胰岛再生衍生因子3α（regenerating islet-derived 3 alpha，Reg3α），然后通过胰岛内皮细胞（MS1）过表达Reg3α，探讨小鼠Reg3α对胰腺再生中的重要作用。 方法 建立小鼠部分（90%）胰腺切除模型，分别于术前、术后12hr、24hr检测血糖， 术后48hr收集小鼠剩余胰腺组织，经全基因组芯片分析、q-PCR验证Reg3α高表达。构建Reg3α过表达质粒，转染MS1细胞系，48hr后ELISA检测细胞上清培养液胰岛素分泌量的变化，并通过q-PCR检测转染后MS1中Pdx1、Insulin2 mRNA表达水平。 结果 比较未转染组(untransfected group)与转染空载体组（PcDNA3.1-transfected group），MS1上清培养液胰岛素分泌量没有明显变化（14.63±6.88，P＞0.05）；比较转染Reg3α过表达质粒组与未转染组，上清培养液胰岛素分泌量明显升高（193.43±7.09， P＜0.01）；比较转染Reg3α过表达质粒组与转染空载体组，胰岛素分泌量有明显增加（208.07±5.52， P＜0.01）。与未转染组、转染空载体组比较，转染Reg3α过表达质粒后MS1中的Pdx1、Insulin2 mRNA表达水平明显升高（P＜0.01） 结论 胰岛内皮细胞中过表达Reg3α可使Pdx1、Insulin2 mRNA表达水平升高，增加胰岛素的分泌。Reg3α促进内皮细胞表达和分泌胰岛素可能具有对胰岛β细胞功能代偿作用。

LDLR启动子区DNA甲基化调控同型半胱氨酸致平滑肌细胞增殖的作用机制

姜怡邓 孙炜炜 马长剑 王菊 马胜超 巩慧慧 梁宇

2012, 32(3):  245-250. 

摘要 ( 1463 )   PDF (1001KB) ( 734 )  

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摘 要：目的 探讨低密度脂蛋白受体(LDLR)在同型半胱氨酸(Hcy)致血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的作用机制。方法 原代培养VSMCs, 用50、100、200 、500 μmol/L Hcy干预72 h; MTT法观察VSMCs增殖的活性, ELSIA法和同位素法分别检测VSMCs中ox-LDL含量和DNA甲基转移酶活性; 实时定量PCR和巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测LDLR的表达和启动子区DNA甲基化的状态。结果 随着Hcy浓度的增加, VSMCs中ox-LDL含量和DNA甲基转移酶活性明显增加, 而VSMCs增殖活性下降, 同时LDLR mRNA表达增高, 且LDLR 基因启动子区呈低甲基化状态, 与对照组比较有显著性差异(P<0.05, P<0.01)。结论 LDLR基因启动子区DNA低甲基化致LDLR表达增高可能是Hcy引起VSMCs损伤的重要机制之一。

NPM1基因突变表达对THP-1白血病细胞增殖和凋亡的作用探讨

覃凤娴 邵会媛 陈先春 谭诗 张慧娟 张伶

2012, 32(3):  251-256. 

摘要 ( 2602 )   PDF (867KB) ( 702 )  

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摘要：目的 探讨核仁磷酸蛋白（NPM1）基因突变对白血病细胞增殖潜能和凋亡发生的影响。方法 将携带NPM1 A型突变（NPM1 mA）的重组质粒载体pEGFPC1-NPM1 mA转染白血病THP-1细胞系，构建稳定表达NPM1 A型突变蛋白的白血病细胞株(THP-1 mA)，同时设立未处理组（THP-1）和空载体转染组（THP-1 C1）作为对照。通过MTT试验观察细胞体外增殖能力，流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡发生率的改变；采用RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白（Bax和Bcl-2）mRNA及蛋白表达水平。结果 与未处理组和空载体转染组细胞相比较，携NPM1突变体的THP-1 mA细胞体外增殖能力明显增强，S期细胞比例明显增高，G1期细胞比例显著减低；而NPM1突变体转染后THP-1细胞的凋亡率没有显著变化，同时细胞凋亡相关蛋白Bax, Bcl-2的mRNA和蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值亦未见明显改变。结论 NPM1突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力，而对白血病细胞凋亡无显著影响，这为进一步阐明NPM1突变与AML的关系提供了新的科学依据。

低氧无血清对乳鼠心肌细胞皮肤桥蛋白表达的影响

刘晓艳 张秀芳 魏英杰 崔传珏 史强 白媛媛

2012, 32(3):  257-260. 

摘要 ( 1176 )   PDF (481KB) ( 664 )  

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目的 在体外用低氧无血清条件模拟缺血心肌微环境，探讨心肌细胞皮肤桥蛋白(DPT)表达的变化。方法 以低氧无血清处理乳鼠心肌细胞0 、6 、12 和24 h，用实时反转录聚合酶链式反应检测DPT mRNA的表达变化，用Western blot检测DPT的蛋白表达变化。用酶联免疫吸附实验（ELISA）证实低氧无血清处理乳鼠心肌细胞24 h DPT蛋白的表达变化。结果 与0 h组相比，低氧无血清处理心肌细胞6 、12 、24 h DPT的mRNA和蛋白水平均显著升高（p<0.05）。ELISA的方法也检测到低氧无血清处理心肌细胞24 h DPT的表达水平高于正常对照组（p<0.05）。结论 低氧无血清可促进乳鼠心肌细胞DPT的表达，DPT可能在缺血缺氧引起的心室重构中发挥一定的作用。

抑制性受体LAIR-1对巨核谱系分化的调节作用

张晓姝 赵海亚 冯小英 曹晏宁 付爱丽 薛江楠

2012, 32(3):  261-267. 

摘要 ( 1223 )   PDF (1420KB) ( 614 )  

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目的 研究抑制性受体LAIR-1在巨核谱系细胞的表达及其对巨核细胞分化的调节作用。方法 采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1在巨核谱系细胞的表达；免疫磁珠法纯化脐血CD34+细胞，体外无血清培养系统诱导CD34+细胞向巨核细胞分化，观察LAIR-1被抗体或配体交联激活后对巨核细胞分化的影响。结果 LAIR-1表达于人骨髓CD34+CD41a+和CD41a+CD42b+细胞以及脐血CD34+CD41a-和CD34+CD41a+细胞；脐血CD34+细胞向巨核细胞分化过程中，LAIR-1表达在倍性为2N和4N的不成熟CD41a+细胞上；交联激活LAIR-1分子能够抑制脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化。结论 LAIR-1可能是参与巨核细胞早期分化发育的一种新的负调控分子。

张力敏感性阳离子通道在气道黏液基础分泌中的介导作用

刘诗兰 周向东

2012, 32(3):  268-272. 

摘要 ( 1058 )   PDF (568KB) ( 623 )  

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摘要：目的 探讨参与节律性压力波维持气道黏蛋白(MUC)基础性分泌的主要信号节点。方法 采用气/液相界面法培养人气道上皮16HBE细胞，启用两个装置模拟正常呼吸所产生的节律性压力波作用于培养细胞，分为静态对照组、节律性压力波组、节律性压力波+张力敏感性阳离子通道（TRPV4）拮抗剂钌红（RR）、节律性压力波+维拉帕米、节律性压力波+蛋白激酶C（PKC）抑制剂（GF109203x）共5组，分别通过激光共聚焦观察Ca2+浓度变化，RT-PCR检测TRPV4 mRNA的表达，Western bolt检测豆蔻酰化富丙氨酸C激酶底物（MARCKS）及突触相关膜蛋白（SNAP-23）水平，ELISA检测MUC(2、5AC和5B)的分泌情况。结果 节律性压力波组的胞内Ca2+浓度(312.34±17.08)和TRPV4 mRNA (0.63±0.03)较静态对照组(196.16±35.06，0.28±0.05)显著增高（均P<0.01），RR干预后明显降低(263.16±43.06，0.46±0.08)（均P<0.01）。节律性压力波组MUC(2、5AC和5B)分泌水平（0.34±0.08，0.77±0.26和0.49±0.18），pMARCKS及pSNAP-23蛋白水平（0.85±0.42， 0.74±0.53）亦明显增高（均P<0.01）；给予Ca2+及PKC等特异性抑制剂预处理后，上述各指标蛋白水平均降低（均P<0.01），仍高于静态对照组（均P<0.01）。结论 TRPV4参与调节节律性压力波维持气道上皮基础性MUC分泌平衡，此过程是籍以激活Ca2+/PKC/MARCKS信号通路来实现的。

不同脂肪含量的高脂纯化配方饲料对大、小鼠代谢综合征发生的影响

周云枫 李沙 苏文 黄世铮 蒲丹 管又飞

2012, 32(3):  273-277. 

摘要 ( 1890 )   PDF (693KB) ( 926 )  

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摘要： 目的 探讨不同脂肪含量的高脂纯化配方饲料对大、小鼠体重、血糖、血胰岛素、血脂、脂肪肝及白蛋白尿的影响。 方法 雄性SD大鼠及C57BL/6小鼠随机分为MS10%、MS45%和MS60%脂肪含量饲料组，喂养3个月，检测动物体重、血糖、血胰岛素水平、血脂和蛋白尿水平，以及主要脏器重量及肝脏脂质含量。 结果 与正常组（MS10%脂肪含量）相比，高脂组（MS45%和MS60%脂肪含量）动物体重显著增加，出现明显的糖耐量异常、胰岛素抵抗和血脂水平升高，同时伴有肝脏脂质含量和蛋白尿水平的增加，并且以MS45%高脂组体重增加及胰岛素抵抗更加显著。 结论 MS45%和MS60%高脂配方饲料均可在大、小鼠较好地诱导代谢综合征的发生，而且前者优于后者。 关键词： 高脂饲料；胰岛素抵抗；肥胖；代谢综合征

SELDI蛋白质芯片筛选差异蛋白分子的二级鉴定

卡米拉.阿不里米提 仉红刚 马可 王琴 张秋菊 修瑞娟

2012, 32(3):  278-282. 

摘要 ( 1312 )   PDF (1045KB) ( 635 )  

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目的 探讨以SELDI蛋白质芯片筛选后的细胞差异表达蛋白的分离和鉴定方法及其意义。 方法 以经体外培养及10μmol/L褪黑素药物干预的内皮祖细胞差异表达蛋白质为研究对象，分别采用Tricine-SDS-PAGE和双向凝胶电泳方法进行差异蛋白分离及结果比较，以FT-MS二级质谱鉴定。 结果 经Tricine-SDS-PAGE分离后，选取分子量为53ku左右的趋势性差异表达蛋白进行FT-MS分析，质谱鉴定为微管蛋白-α3（吻合度评分为87）。经双向凝胶电泳分离后，于凝胶近酸性端、分子量在72～95ku之间区域，选取蛋白表达量较高的一点，质谱鉴定其为人热休克蛋白90-α（吻合度评分为91）。结论Tricine-SDS-PAGE对于大致35～62ku范围的蛋白分离较清晰、重复性好且样品用量少，2-DE对最低上样量有较严格要求，但它能提供分子量、等电点双重参数来更准确定位所感兴趣蛋白点，且对大分子量蛋白的分离效果更佳，经质谱鉴定结果理想。

小鼠骨髓间充质干细胞与脑胶质细胞及基底膜细胞共培养后向毛细胞样细胞分化

杨文飞

2012, 32(3):  283-290. 

摘要 ( 1104 )   PDF (1925KB) ( 699 )  

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【摘 要】 目的: 探讨体外建立诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向毛细胞分化的方法。方法:分离培养小鼠骨髓间充质干细胞、脑胶质细胞(ASTs) 与基底膜细胞(BAMCs)至第3代。取MSCs与ASTs共培养于DMEM/F12 /RA +10%FBS培养基中。7d后免疫荧光法检测Nestin的表达。所得细胞再与BAMCs共培养于DMEM/F12 +10%FBS中。14d后免疫荧光法检测诱导后细胞中毛细胞的标志物(Math1与MyosinVIIa)的表达。RT-PCR检测毛细胞的标志物 (Math1与MyosinVIIa) mRNA的表达。结果:经ASTs共培养后的MSCs表达Nestin。Nestin阳性细胞与BAMCs共培养后部分细胞表达Math1和MyosinVIIa的蛋白与mRNA 。结论: MSCs经与ASTs及BAMCs共培养后，部分细胞被诱导分化为毛细胞样细胞。

Ghrelin对棕榈酸诱导的内皮细胞凋亡的影响及机制

张丹 王威 韩玲玲 陈颖 刘国良

2012, 32(3):  291-295. 

摘要 ( 1345 )   PDF (789KB) ( 629 )  

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目的 探讨ghrelin能否抑制棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡及其与PI3K/Akt通路的关系。 方法 大鼠主动脉内皮细胞在分别在含或不含0.3mM棕榈酸的DMEM培养基中孵育，培养基中加或不加ghrelin及PI3K/Akt的阻断剂LY294002，流式细胞仪Annexin Ⅴ/PI法检测凋亡，分光光度计检测caspase-3活性，Western blot检测总Akt及磷酸化Akt。 结果0.3mM棕榈酸作用24小时增加大鼠主动脉内皮细胞凋亡，Ghrelin抑制棕榈酸诱导的内皮细胞凋亡。棕榈酸干预内皮细胞24小时能显著抑制Akt的磷酸化，加入ghrelin可引起Akt的活化。Ghrelin引起的Akt的活化能够显著地被PI3K/Akt阻断剂LY294002所阻断，而且LY294002能够阻断ghrelin对棕榈酸诱导的内皮细胞凋亡的保护作用。 结论 Ghrelin能够抑制棕榈酸诱导的大鼠主动脉内皮细胞凋亡，ghrelin的抗凋亡作用至少是部分通过PI3K/Akt通路起作用的。

钙激活性中电导钾离子通道在宫颈癌组织中的表达

刘玲

2012, 32(3):  296-299. 

摘要 ( 1665 )   PDF (422KB) ( 591 )  

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目的：观察钙激活性中电导钾离子通道（IKCa1）在宫颈癌组织中的表达变化及其在宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法：应用RT-PCR技术研究18例正常宫颈组织及15例宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的表达；利用IKCa1通道的阻断剂----克霉唑处理宫颈癌HeLa细胞，应用RT-PCR技术检测细胞IKCa1 mRNA的表达的变化，MTT法观察细胞增殖抑制的变化。并在倒置相差显微镜、透射电镜下观察HeLa细胞的形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：宫颈癌组织中IKCa1 mRNA的阳性表达率及表达水平（分别为73.33%、1.14±0.45）明显高于正常宫颈组织（分别为11.11%、0.86±0.23），P<0.05。克霉唑以浓度和时间依赖的方式抑制HeLa细胞的增殖，抑制HeLa细胞的生长，下调IKCa1 mRNA的表达水平，诱导细胞凋亡，并观察到细胞凋亡的形态学改变。 结论：IKCa1的异常表达可能与宫颈癌的发生、发展密切相关，降低其表达可能通过诱导细胞凋亡，从而抑制宫颈癌细胞的增殖。

BHLHB2 在人胰腺癌细胞株SU86.86的生物学功能研究

王维斌 赵玉沛 廖泉 张太平 徐徕

2012, 32(3):  300-304. 

摘要 ( 1709 )   PDF (692KB) ( 656 )  

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【摘要】目的：进一步研究前期实验结果证明的人胰腺癌新颖的独立预后因子BHLHB2(cAMP -inducible basic helix-loop-helix domain containing, class B, 2) 在人胰腺癌细胞中的相关分子生物学功能。方法：应用siRNA干扰技术，在人胰腺癌细胞株SU86.86中使BHLHB2表达沉寂，然后进行迁徙实验，研究BHLHB2与细胞迁徙的关系；应用更生霉素（Actinomycin D，ACT-D)诱导细胞凋亡，研究BHLHB2与细胞凋亡的关系；应用Western Blot方法研究BHLHB2与EMT的相关性。结果: 人胰腺癌细胞BHLHB2 表达沉寂后，细胞的迁徙明显增快。应用ACT-D进行凋亡诱导，BHLHB2表达沉寂后、发生凋亡的细胞数目明显增加(10ng/ml, 增加 1.32倍, p<0.05; 100ng/ml, 增加 1.41倍, p<0.05)。Western Blot结果表明, BHLHB2表达沉寂后可显著降低E-cadherin的表达(降低 11.35 倍, p<0.01)。结论: BHLHB2 具有多种生物学功能，与人胰腺癌细胞的迁徙、细胞凋亡及EMT密切相关。

EGF和AngⅡ激活人肾上腺皮质癌H295R细胞ERK通路

童安莉

2012, 32(3):  305-308. 

摘要 ( 1374 )   PDF (502KB) ( 669 )  

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目的: 研究EGF和AngII联合作用对肾上腺皮质癌H295R细胞的ERK信号通路的影响。方法: 用不同剂量的EGF和AngII刺激H295R细胞，或用特异性EGF受体酪氨酸激酶抑制剂AG1478预处理后再加入AngII刺激细胞，用Western blot法检测磷酸化ERK1/2；EGF及AngII单独或联合刺激细胞，检测ERK1/2、p90RSK和Bad的磷酸化水平。结果：EGF和AngII均刺激细胞ERK1/2和p90RSK磷酸化，在刺激ERK1/2磷酸化上呈剂量依赖性，两者联合处理其激活ERK1/2和p90RSK的作用产生叠加，AngII和EGF单独及联合处理细胞，ERK1/2磷酸化水平分别是对照组的6.3±1.4、2.2±0.6及10.1±1.1倍。AngII刺激细胞Bad磷酸化，而EGF无此作用。AG1478不能阻断AngII诱导的Erk1/2激活。结论：EGF和AngII明显激活H295R细胞的ERK信号通路，两者作用有叠加效应。

一例罕见β地中海贫血基因突变及其家系分析

李敏敏 邹亚伟 张碧云 杨少灵 马玉花 陈福雄

2012, 32(3):  309-312. 

摘要 ( 1689 )   PDF (1056KB) ( 645 )  

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目的 鉴定1种罕见的β地中海贫血突变类型。方法 血液学分析采用血细胞分析仪及全自动快速电泳分析系统；α珠蛋白常规突变检测采用Gap-PCR；β珠蛋白常规突变检测采用反向点杂交法；样品的基因突变及基因型用β珠蛋白基因全长测序技术确定。 结果 先证者具有典型的β地中海贫血临床特点和血液学特性，HbF为 5.8%，其父母各项指标均正常。未发现先证者及其家庭成员有已知的α-/β-地中海贫血基因突变，测序发现先证者及其母亲均为CD2(CAT-CAC)杂合子，父亲为CAC纯合子；先证者有β珠蛋白exon1 CD27 (GCC-GAC)突变，编码的氨基酸由丙氨酸变为天冬氨酸，其未发现父母有CD27突变。结论 CD27(GCC-GAC)突变是罕见的β珠蛋白基因点突变，有助于指导人群筛查、遗传咨询和临床诊断。

EJ细胞CD44基因RNAi对单抗KMP1和细胞功能的影响

丁明霞 李翀 左毅刚 王剑松

2012, 32(3):  313-316. 

摘要 ( 1371 )   PDF (570KB) ( 704 )  

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研究EJ细胞中CD44基因小RNA干扰后细胞功能的变化和单抗KMP1功能的改变。方法 小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44基因表达，Western blot和流式细胞仪检测EJ细胞与CD44特异性单抗KMP1的结合功能变化，细胞划痕实验和Boyden小室研究shCD44－EJ细胞的迁移功能改变，[3H]掺入法检测shCD44－EJ细胞的增殖能力变化。结果　KMP1与shCD44－EJ细胞结合功能下降，shCD44－EJ细胞的迁移能力降低约50%，增殖能力也下降。结论　特异性沉默CD44可降低EJ细胞特异性单抗KMP1的结合功能，并抑制EJ细胞的迁移和增殖能力。

肺癌细胞低氧干预后DLL4的表达及其对内皮细胞迁移的影响

韩建群 秦伟伟 李宏伟 修瑞娟

2012, 32(3):  317-321. 

摘要 ( 1689 )   PDF (920KB) ( 733 )  

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摘要：目的 探讨氯化钴化学模拟低氧对肺癌细胞DLL4(delta like ligand 4)表达的影响及其与内皮细胞迁移的关系，为寻找抗肿瘤血管新生的潜在靶点提供理论依据。方法 EdU掺入法测定细胞增殖变化；采用免疫荧光细胞染色和western-blot测定DLL4和 HIF-1α（hypoxia induced factor 1α）在A549细胞中的表达；细胞划痕实验检测内皮细胞的迁移变化。结果 低浓度氯化钴（200 μmol/L ）化学模拟低氧干预12小时后，A549细胞增殖没有明显抑制，DLL4和 HIF-1α的表达均明显上调，培养上清液促进细胞划痕实验中内皮细胞的迁移。结论 化学模拟低氧明显上调A549细胞DLL4的表达，其对内皮细胞的迁移趋化作用提示其为抗肿瘤血管新生治疗的潜在靶点。

应用非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测人巨细胞病毒UL97基因突变

赵晓涛 夏长胜 孙媛媛 王启 于波 邵勇 张正

2012, 32(3):  322-326. 

摘要 ( 1426 )   PDF (1146KB) ( 597 )  

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目的 建立非标记探针高分辨率熔解曲线分析技术（HRMA）检测人巨细胞病毒（HCMV）UL97基因突变。方法 构建HCMV UL97野生型以及H520Q突变质粒，非标记探针HRMA分型技术检测H520Q突变。结果 直接从PCR产物得到的熔解曲线峰型无法区分野生型及H520Q突变型，应用非标记探针HRM A技术可以明显增加实验的敏感性及准确性，可以成功区分从野生型到含不同量的H520Q突变的基因型。结论 非标记探针HRMA 技术是一个敏感、经济的检测H520Q突变的基因分型方法。

技术与方法

磁性纳米粒子-抗体复合物分离肝癌线粒体

唐博 梁锐 张易 金学利 赵樑 王立明

2012, 32(3):  327-331. 

摘要 ( 1325 )   PDF (654KB) ( 623 )  

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摘要：目的 利用人肝癌组织，研究磁性纳米粒子-抗体复合物与传统线粒体分离方法之间的差异。方法 取人肝癌组织，分别采用磁性纳米粒子-抗体复合物和密度梯度离心方法分离线粒体。扫描电镜观察线粒体形态，Western blot检测线粒体蛋白标志物，流式细胞仪分析线粒体膜电位变化。结果 采用磁性纳米粒子-抗体复合物方法分离得到的肝癌组织线粒体结构完整，无胞核、胞膜等组分的污染，几乎没有过氧化物酶体和溶酶体的污染。经流式细胞仪检测，线粒体膜电位稳定。结论 与传统方法相比，磁性纳米粒子-抗体复合物分离方法具备简便易行，分离得到的线粒体结构完整、纯度及活性较高，并且不需要大型设备等优点。

临床园地

南极大陆Dome A地区高山病一例

陈香梅 徐成丽

2012, 32(3):  332-334. 

摘要 ( 125 )   PDF (519KB) ( 530 )  

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病例摘要 2010年12月29日下午，冰盖队登顶达到昆仑站4087米，2011年1月1日下午至2日，患者出现高原反应：头痛、头晕、胸闷、呼吸气短气促、疲劳等症状，未吸氧治疗，3日症状加重，吸氧，服速尿、地塞米松，胸闷症状改善不明显，未吸氧状态下血氧饱和度降至45%，吸入高浓度氧气后仅能达到65%，5日联系飞机撤离冰穹Ａ，7日到达澳大利亚Daivs 站救治。 2011年1月，一名45岁的藏族男性队员抵达站区后开始出现阵发性的呼吸不畅，气短气促症状，卧床休息症状略有缓解，但随后几天时间内症状加重，持续出现头晕头痛，伴有胸闷憋气呼吸困难和轻微胸痛，乏力嗜睡，以及口唇紫绀范围逐步扩大，自行吸氧后胸闷症状改善不明显，Lake Louise Score[7]自评分为7。监护仪检查发现，未吸氧状态下血氧饱和度降至45%，吸入高浓度氧气后仅能达到65%。发病后第3天凌晨，患者乘飞机花费6个小时被转送至澳大利亚戴维斯站医院（位于南极普里兹湾海岸边，海拔高度为零），飞行期间口服丹木斯（Diamox）250mg，面罩给氧（FiO249%），血氧饱和度维持在99%。

研究短文

Livin在白血病耐药细胞株THP-1R的表达

郝艳梅

2012, 32(3):  335-336. 

摘要 ( 135 )   PDF (262KB) ( 591 )  

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摘要：目的 探讨存活蛋白(Livin) 与白血病细胞耐药的关系，并探讨其在白血病多药耐药中的意义。方法 通过阿糖胞苷（Ara-C）药物浓度梯度递增法诱导建立白血病耐药细胞亚系THP-1R，然后将Livin siRNA转染至THP-1R，应用RT-PCR方法检测白血病细胞株THP-1和转染前后白血病耐药细胞株THP-1R中Livin mRNA的表达，Western blot 法检测Livin蛋白的表达，MTT法检测转染后THP-1R的耐药指数。结果 THP-1R中Livin的mRNA和蛋白表达水平明显高于THP-1 (P<0.05)。Livin siRNA转染后THP-1R耐药指数较未转染细胞明显降低(P<0.05)；转染后THP-1R细胞Livin的mRNA和蛋白表达水平与未转染细胞比较两者差异具有显著性(P<0.05)。结论 Livin的高表达可能是人白血病细胞多药耐药形成的机制之一。

抑制IGF-1R可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖

蒋蔚 姚宁华

2012, 32(3):  337-339. 

摘要 ( 120 )   PDF (452KB) ( 560 )  

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短篇综述

蜕膜间充质干细胞免疫调节作用及临床应用研究进展

王华阳 董召刚 曲迅

2012, 32(3):  340-344. 

摘要 ( 242 )   PDF (510KB) ( 694 )  

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蜕膜间充质干细胞除了具有间充质干细胞一般表型及分化潜能外，还具有低免疫原性等独特性质，是一种多能基质细胞。蜕膜间充质干细胞不但为妊娠期间胚胎植入提供适宜环境，而且通过表达免疫调控因子、与多种免疫细胞相互作用，如T细胞、NK细胞、DC等，发挥其在胚胎植入、免疫耐受建立、正常妊娠维持中的重要作用。目前蜕膜间充质干细胞已经应用于造血干细胞移植、再生治疗等，具有较高的临床应用价值。本文就蜕膜间充质干细胞的来源、特征、功能及临床应用前景等进行综述。

核酸适配体在肿瘤学中的应用研究进展

胡燕 杨先达

2012, 32(3):  345-348. 

摘要 ( 164 )   PDF (430KB) ( 768 )  

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核酸适配体（aptamer）是一类能以较高的亲和力与各类生物靶标特异性地相结合的单链DNA或RNA，它们可以通过指数级富集的配体进化技术（SELEX）获得。与抗体相比，核酸适配体具有能够大量化学合成、低免疫原性、容易修饰、价格低廉等优点。核酸适配体技术和纳米及基因干扰技术的结合，为肿瘤的分子诊断和治疗提供了全新的思路和技术路径。本文就近些年来核酸适配体在肿瘤学方面的一些重要应用研究做一综述。

CXCL12—CXCR4/CXCR7轴信号传导通路与肿瘤细胞生物学特性的关系

喻松霞 李剑

2012, 32(3):  349-353. 

摘要 ( 318 )   PDF (769KB) ( 649 )  

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【摘要】越来越多的研究表明CXCR4与CXCR7在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用，CXCR4与CXCR7作为G蛋白藕联受体介导的信号传导通路及其在胞内激化级联信号通路与肿瘤发生发展的分子机制有密切关系。本文将对它们各自介导的信号通路及其在胞内的级联信号通路与肿瘤细胞的生长、增殖、黏附和迁移等生物学特性的关系进行综述。

甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的新思考

马亚 曾学军

2012, 32(3):  354-357. 

摘要 ( 352 )   PDF (437KB) ( 797 )  

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摘要：甲氨蝶呤(MTX)为目前治疗类风湿关节炎（RA）首选的改善病情抗风湿药（DMARDs）。MTX在减轻症状和体征、减少致残及延缓影像学结构破坏等方面优于其他DMARDs。在生物制剂和MTX等传统DMARDs之间进行选择时，需充分考虑成本效益因素以保障患者的依从性和病情缓解。预测MTX治疗反应性或安全性的生物或基因标记物可指导临床医生制定最佳的RA治疗方案。

中枢神经系统真菌感染诊断治疗进展

魏俊吉 程卫 王任直 任祖渊

2012, 32(3):  358-361. 

摘要 ( 226 )   PDF (458KB) ( 1183 )  

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近年来，中枢神经系统真菌感染发生率有逐渐增高之趋势, 颅内真菌感染可分为弥漫性感染和局灶性感染，临床表现多为脑膜炎、脑膜脑炎引起的发热和颅高压症状，以及由颅内占位性病变所致的局灶性神经缺损症状。中枢神经系统真菌感染的诊断需将病史、流行病学、基础疾病、临床表现、影像学表现和各项实验室检查结果等综合分析，脑组织或脑脊液标本中找到真菌是诊断的金标准。中枢神经系统真菌感染的治疗原则是有效控制致病危险因素，使用有效抗真菌药物，对真菌脓肿、肉芽肿等进行积极手术干预。同时应积极探索新的诊断、治疗方法，以期改善患者预后。

医学教育

关于基因分子生物学实验教学培养学生创新思维的初步探讨

王欣 刘长征 王芳 陈厚早

2012, 32(3):  362-366. 

摘要 ( 158 )   PDF (661KB) ( 662 )  

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目的 提高教师培养意识和培养手段，促进学生创新思维的形成。方法 在开展基因分子生物学实验教学的过程中，通过课程建设，对授课内容以及课堂实践各个环节进行了改革，从而对学生思维进行启迪。结果 在实验指导的编写上体现了创新性较强的原则；将以合作学习为主的实验讨论课贯穿课程始终。对讨论课的实施条件和方法进行了全面总结，并根据学生对课堂的意见反馈，提出了解决对策。结论 在实验课上引入讨论式教学法，有助于增进学生对学习的积极性、合作精神、口头表达能力和创新思维。