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2011年 第31卷 第6期    刊出日期：2011-06-05

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研究论文

约氏疟MIF影响小鼠脾CD8+DC分泌细胞因子

刘恩鹏 罗茗月 邵丁丁 王恒

2011, 31(6):  597-601. 

摘要 ( 1883 )   PDF (422KB) ( 789 )  

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目的 研究约氏疟原虫巨噬细胞迁移抑制因子（PyMIF）对宿主小鼠树突状细胞(DC)表型和功能的影响，为阐明PyMIF对寄主免疫反应的作用机理提供理论依据。方法 制备及纯化小鼠MIF及PyMIF重组蛋白，磁珠分选法得到小鼠脾DCs两种主要亚群CD8+DC及CD4+DC，在体外培养的情况下，流式细胞仪检测CD8+DC及CD4+DC TLR4、CD40、CD80、CD86、MHC I、MHC II等细胞表面分子表达，用ELISA方法检测细胞因子IL-12、TGF-β1的分泌。结果 PyMIF未改变脾DCs细胞表面CD40、CD80、CD86、MHC I、MHC II等分子水平, 但可以下调脾DCs 表面TLR4水平；此外, 在CD8+DC, PyMIF能够拮抗LPS刺激所引起IL-12分泌的上升（由433±48 pg/mL降至373±30 pg/mL，P<0.05），并促进未成熟DCs分泌TGF-β1（由136±4 pg/mL升至 182±7 pg/mL，P<0.05），而对CD4+DC分泌细胞因子并无影响。结论 PyMIF不参与DCs成熟过程，但有助于感染后宿主体内免疫抑制环境的产生，以逃避宿主免疫攻击有利于自身的存活。

Hax1基因及其特异性小干扰RNA对人胚肾293细胞凋亡的影响

龙琳 刘力

2011, 31(6):  602-608. 

摘要 ( 1896 )   PDF (1314KB) ( 829 )  

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目的 构建Hax1基因特异性小干扰RNA(sihax)，检测sihax对Hax1基因的表达抑制，在293细胞中研究Hax1和Hax1 siRNAs对细胞凋亡的影响。方法 设计Hax1 siRNA序列构建真核表达载体并转染到293细胞，倒置荧光显微镜下观察、流式细胞仪、AnnexinV-EGFP/PI双染法及RT-PCR检测靶基因Hax1的表达，以及293细胞的凋亡。结果 成功构建了Hax1 siRNA 干扰质粒pBS/U6-sihaxA和pBS/U6-sihaxB，并且sihaxB对Hax1抑制效应明显强于sihaxA。 过量表达Hax1可显著抑制293细胞的早期凋亡比例。用sihaxA和sihaxB抑制内源性Hax1表达,可使晚期细胞凋亡比例从对照的9.03?0.473%分别增加到10.8?0.513%（p<0.05）和16.6?0.858%（p<0.01）。与此同时，sihaxB还可使早期细胞凋亡比例由37.3?0.5%降低到32?1.77%（p<0.01）。结论 Hax1 siRNA对靶基因Hax1的抑制作用与靶序列的保守性有一定相关性。Hax1基因在细胞中参与凋亡相关的多种调节过程。本研究为进一步探讨Hax1功能奠定了基础。

MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

蒋崇亮 汪晓艳 龚佳男 王芳 余佳 冯涛

2011, 31(6):  609-614. 

摘要 ( 2468 )   PDF (1022KB) ( 816 )  

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目的 构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体，并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法 将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27, 72h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平，Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和CCK8分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果 成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体，感染胃癌细胞HGC-27后，能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b，其靶基因MCL-1的表达明显被抑制，并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比，Lenti-29b组的迁移能力显著降低（P<0.01）；Lenti-29b组与Lenti-vector组相比，Lenti-29b组在48h、72h及96h 3个时间点的增殖能力均显著下降（P<0.01）。结论 成功获得过表达miR-29b的重组慢病毒颗粒，miR-29b能够抑制其靶基因MCL-1的表达，并对HGC-27细胞的迁移和增殖有明显的抑制作用。

PKM2是TCRγδ的配体吗？

师敬飞 崔莲仙 何维

2011, 31(6):  615-620. 

摘要 ( 1630 )   PDF (1073KB) ( 747 )  

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目的 检验M2型丙酮酸激酶（PKM2）是否是肿瘤细胞表面TCRγδ识别的配体。方法 用Western blot的方法验证OT3肽(合成的TCRγδ中δ链的CDR3区肽) 与PKM2结合，用Western blot 及免疫组化法观察PKM2在肿瘤细胞及组织中的表达，用流式细胞术及激光扫描共聚焦显微镜术验证PKM2在肿瘤细胞的定位，用固相化PKM2体外扩增γδT细胞和PKM2刺激γδT细胞分泌IFN-γ的实验检验PKM2的功能。结果 (1) PKM2可与OT3肽结合，肿瘤细胞总蛋白提取物中含有大量PKM2，提示以OT3为探针，从肿瘤细胞总蛋白提取物中钓取到PKM2是合理的，用此方法筛选OT3结合蛋白的方法是可行的；(2) PKM2普遍表达于肿瘤细胞及组织，但不表达于肿瘤细胞膜；(3) PKM2在体外不能扩增γδT细胞，无刺激γδT细胞产生IFN-γ的功能。结论 PKM2不表达于肿瘤细胞表面，对γδT细胞不具有刺激活化的功能，PKM2不具备TCRγδ的配体特性。

羧胺三唑在BV2细胞模型中的抗炎作用

张朋飞 郭磊 李娟 朱蕾 于晓丽 张德昌 叶菜英

2011, 31(6):  621-624. 

摘要 ( 1941 )   PDF (345KB) ( 930 )  

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目的 探讨羧胺三唑(CAI)对BV2细胞模型中多种炎性细胞因子的调节作用。方法 将不同浓度的CAI加入BV2细胞中培养18h后，用CCK-8法测定其细胞数。分别用ELISA试剂盒和硝酸盐还原法测定细胞基上清中的TNF-α、 IL-1β、IL-6、NO的含量，用荧光定量PCR法测定BV2细胞中TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的含量。结果与对照组相比，CAI浓度在20、30、40μmol/L能够剂量依赖性抑制BV2细胞TNF-α的分泌 (359.4 ±12.9 vs 241.6 ±16.1*，135.7 ±6.4**，5.3 ±1.9**pg/ml, p<0.01)，也可显著抑制IL-1β、NO、IL-6的分泌(p<0.01)，同时也能够降低TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的表达(p<0.01)。结论 CAI能够明显降低在ALS的BV2细胞模型中炎性介质TNF-α、IL-1β、NO、IL-6的分泌以及TNF-α、IL-1β、COX-2和iNOS的mRNA的表达，对小胶质细胞的活化及其炎性反应有明显的抑制作用。

PARG基因沉默抑制小鼠结肠癌CT26细胞系体外淋巴管形成

吴伟强 王娅兰 潘娟 颜佳欣

2011, 31(6):  625-629. 

摘要 ( 2436 )   PDF (944KB) ( 773 )  

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目的 初步探讨聚（腺苷二磷酸核糖）水解酶（PARG）基因沉默对肿瘤淋巴管形成的影响。方法 CT26细胞分为未转染组，空载组和PARG-shRNA慢病毒载体转染组，经嘌呤霉素筛选后获得稳定转染细胞克隆。用Western blot法检测PARG、PARP-1、NF-κB和VEGF-C蛋白表达。给BALB/c小鼠腹腔注射不完全弗氏佐剂，诱导良性淋巴管瘤形成，分离并培养小鼠淋巴管内皮细胞（LEC）。免疫荧光细胞化学检测VEGFR-3和Podoplanin的表达，共培养实验检测LEC体外淋巴管样结构的形成。结果 与对照组相比，PARG-shRNA慢病毒载体转染CT26细胞系后PARP-1、NF-κB及VEGF-C蛋白表达显著减弱，相对灰度值分别为1.0±0.05，0.9±0.02和0.2±0.02 ( P<0.05)。LEC表达VEGF-C和Podoplanin; PARG沉默组的LEC体外形成淋巴管样结构明显较未转染组和空载组少（P<0.05）。结论 PARG抑制肿瘤淋巴管形成可能与降低VEGF-C的表达有关。

小鼠脑皮质神经干细胞体外培养及miRNAs影响其分化能力

赵祥宇 舒鹏程 张靖 阴彬 彭小忠

2011, 31(6):  630-635. 

摘要 ( 3034 )   PDF (1532KB) ( 975 )  

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目的 系统建立小鼠脑皮质神经干细胞（NSCs）体外培养的技术平台，并探索一组microRNA对 NSCs分化能力的影响。 方法 胎鼠（E14）脑皮质分离NSCs进行体外培养；免疫荧光法检测NSCs向神经元和星型胶质细胞的自然分化；Real-time定量PCR筛选一组分化前后表达水平有显著性差异的microRNA；应用新一代脂质体高效转染NSCs，将该组microRNA或其抑制物导入NSCs；Western blot检测导入的RNA序列对NSCs分化能力的影响。结果 基于小鼠NSCs体外培养模型，筛选出一组NSCs分化前后表达水平存在显著性差异的microRNA（miR-124,137,128）。Western blot结果显示miR-124的反义链能够明显下调β-tubulin III的表达(P<0.01)，过表达miR-137和miR-128后β-tubulin III的表达量有所升高。结论 脂质体转染技术能够将miRNAs高效导入NSCs中；microRNA-124,137,128能够影响NSCs的分化。

我国6省市人群的健康相关生命质量研究

潘廷芳 司超增 何慧婧 王斌 单广良

2011, 31(6):  636-641. 

摘要 ( 2342 )   PDF (483KB) ( 913 )  

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目的 制定我国6省市人群的SF-36评价参考值，评估我国不同人群的生命质量。方法 利用36条目简明量表（SF-36），研究整体人群和不同人群的得分。将整体人群的得分与香港、美国常模进行比较，并利用逐步回归的方法分析人口统计学特征对SF-36结果的影响。结果 研究人群的生理领域和心理领域生命质量的得分分别为（77.54±15.96）和（71.29±17.86）。SF-36各维度得分的变化趋势接近于香港地区常模的评价结果。人群的性别、年龄、地域分布及城乡分布等均对SF-36的得分有影响。结论 SF-36量表可以用于评估健康状况对生命质量的影响，应根据人口统计学特征制定我国不同人群的常模。

MicroRNA-144调控红系分化

汪晓艳 蒋崇亮 朱勇 王芳 余佳 冯涛

2011, 31(6):  642-646. 

摘要 ( 1868 )   PDF (581KB) ( 893 )  

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目的　研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白（RB）对红系分化的影响。方法 用氯化高铁血红素（hemin）诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程，使用real-time PCR检测mir-144表达；利用体外合成的寡核苷酸（mimic-144）转染K562细胞，检测过量表达miR-144对红系分化的影响；结合生物信息学分析、双荧光素酶报告系统和Western blot寻找并确定miR-144的靶基因。 结果 miR-144在hemin诱导的K562红系分化过程中表达显著升高(P<0.05)，在K562细胞中过表达miR-144可以促进血红蛋白（γ-globin）和红细胞表面标志CD235a的表达和积累；RB为miR-144的靶基因之一；在K562红系分化中，RB呈先略升后降的趋势， RB/GAPDH灰度值最低为:12h 0.092±0.007（P<0.05以0h参照）。结论：miR-144通过负调控RB的表达促进hemin诱导的K562红系分化。

NR2F2促进小鼠MC3T3-E1前成骨细胞增殖

王崧 熊霞辉 朱宁 陈梅红

2011, 31(6):  647-651. 

摘要 ( 1918 )   PDF (719KB) ( 798 )  

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目的 探讨NR2F2基因对小鼠前成骨细胞增殖的影响。方法 用实时定量PCR检测mRNA表达量，MTS法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期，ELISA-Brdu法检测细胞DNA合成速度。结果 在小鼠MC3T3-E1前成骨细胞增殖速度加快时，NR2F2基因的表达增高至对照的4.57±0.30倍(p<0.01)。过表达NR2F2基因促使MC3T3-E1细胞增殖速度加快，细胞数量增加(p<0.01)，细胞周期中S期细胞比例明显升高，为对照组的2倍，G2/M期比例也有增加(p<0.05)。过表达NR2F2基因使MC3T3-E1细胞的Brdu掺入率增高，DNA的合成加速(p<0.01)。结论NR2F2使S期细胞比例增加，促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的增殖速度。

肠道病毒71型3C蛋白表达后细胞蛋白质组差异分析

雷晓波 孙振民 刘新蕾 任丽丽 王健伟

2011, 31(6):  652-655. 

摘要 ( 2595 )   PDF (494KB) ( 990 )  

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目的 利用蛋白质组学技术研究肠道病毒71型（EV71）编码3C蛋白对宿主细胞蛋白表达的影响。方法 在293T细胞中瞬时过表达EV71 3C蛋白，应用双向荧光差异凝胶电泳（2D-DIGE）检测3C表达后293T细胞中蛋白的差异。选取表达水平有明显变化的蛋白用Western blot进行验证。结果 在293T细胞中过表达3C蛋白后，可引起5个蛋白表达水平发生明显改变，其中4个蛋白表达上调，1个蛋白（HSPA4）表达下调。Western blot验证表明过表达3C可降低HSPA4的表达，HeLa细胞中HSPA4表达为对照的46.8%±10.1%（P＜0.05）。结论 过表达EV71 3C蛋白可引起细胞内蛋白表达差异。

甘丙肽抑制大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性

马克乾 孙静 李杰 闫竹青 鲁润春 贾旺 徐志卿

2011, 31(6):  656-660. 

摘要 ( 2089 )   PDF (736KB) ( 876 )  

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目的 探讨甘丙肽对大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性的作用及其受体机制。 方法 提取大鼠垂体腺瘤GH3细胞RNA，反转录后测定甘丙肽及其3个受体亚型的表达情况；将大鼠垂体腺瘤GH3细胞分为对照组、甘丙肽药物处理组和选择性甘丙肽2型受体激动剂AR-M1896组，利用MTT方法检测对照组和实验组在给药后12、24和36h各分组细胞活力，观察其增殖情况；应用Transwell侵袭模型观察各组腺瘤细胞侵袭能力。结果 甘丙肽与其3个受体亚型在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中均有表达，其中以受体2表达量较高；各组细胞在药物处理12、24和36h时细胞增殖无显著差异；GH3细胞Transwell侵袭实验中甘丙肽药物组侵袭细胞数量明显少于对照组(P< 0.01)；甘丙肽受体激动剂AR-M1896组与对照组相比腺瘤细胞侵袭性明显降低(P< 0.05)；AR-M1896与甘丙肽对GH3细胞的抑制效果差异无显著性。结论 甘丙肽能明显抑制大鼠垂体腺瘤细胞的侵袭性，且此作用可能主要由甘丙肽2型受体介导。

木豆叶总芪对高脂模型兔的降脂作用及调节机制

郭显蓉 骆庆峰 康晓敏 尹洪超 斯建勇

2011, 31(6):  661-666. 

摘要 ( 2603 )   PDF (1004KB) ( 978 )  

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目的 研究木豆叶总芪（TSC）对高脂模型兔脂质代谢的影响及可能的分子机制。方法 将36只雄性新西兰兔分为对照、模型、TSC高、中、低剂量和血脂康6组，于0、2和6周末测血脂，6周末测肝脏脂质并行病理学检测；将THP-1细胞诱导成巨噬细胞，用 [3H]胆固醇预处理48 h后分为对照、木豆叶芪类单体成分C03高、中、低剂量和雌二醇5组，作用24 h后加入apoAI作用12h,检测各组上清液和细胞内[3H]胆固醇含量,计算细胞胆固醇流出率，Western blot检测各组细胞ABCA1表达。结果 与模型组相比，TSC高剂量使兔血清和肝脏TC分别下降35.36%和35.97%（P<0.01）,TG分别下降12.34%（P<0.05）和41.32%（P<0.01），血清LDL-C下降29.07%（P<0.01）；HE染色：TSC高剂量组肝脂肪变明显轻于模型组。C03高、中剂量作用后细胞胆固醇外流率分别提高55.39%和24.97%(P<0.01)。C03高剂量使ABCA1蛋白表达显著增加。结论 TSC能抑制高脂饮食所致高脂血症,其降脂作用可能与上调细胞ABCA1表达，进而促进胆固醇逆转运有关。

埃博拉病毒包膜蛋白GP基因DNA疫苗诱导小鼠产生高滴度中和抗体

张桂根 郎建社 王洪亮 刘康泰 蒋澄宇

2011, 31(6):  667-671. 

摘要 ( 2132 )   PDF (615KB) ( 996 )  

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目的 探讨埃扎伊尔-埃博拉病毒（Zaire ebolavirus）包膜蛋白（GP）DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体的特性及研制埃博拉病毒DNA疫苗的可行性。方法 构建埃博拉病毒包膜蛋白GP真核表达质粒Peak13CD5LGP，采用100?g剂量的质粒免疫小鼠，以纯化的埃博拉病毒包膜蛋白亚单位融合蛋白（GP1-Fc）作为抗原，测定血清抗体滴度及特异性。结果100?g质粒免疫小鼠三次后，通过ELISA检测及Western blot验证，小鼠血清中GP中和抗体滴度达到1：2000。 结论 含埃博拉病毒包膜蛋白GP基因的DNA疫苗（pEAK13CD5LGP）能够诱导小鼠产生高滴度和持久的中和抗体，作为埃博拉病毒疫苗具有潜在的应用价值。

Ghrelin对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响

马楼艳 张栋珉 张颖 高原 柴李殷 赵柯湘 夏丽 肖谦

2011, 31(6):  672-678. 

摘要 ( 1845 )   PDF (999KB) ( 14053 )  

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目的 观察Ghrelin对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机均分为对照组，糖尿病组，糖尿病+Ghrelin组和糖尿病+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6组，每组10只。建立STZ糖尿病模型，open-field实验排除合并抑郁症的糖尿病大鼠，Morris水迷宫测试学习与记忆能力，RT-PCR检测海马caspase-3mRNA的表达，免疫组化检测海马神经元caspase-3和BCL-xl蛋白表达，原位末端标记法检测海马神经元的凋亡。结果 与对照组大鼠相比，糖尿病组和糖尿病+Ghrelin+D-lys3-GHRP-6组学习与记忆能力显著受损（P<0.05），海马部位的caspase-3 mRNA及蛋白表达明显升高（P<0.05），BCL-xl蛋白表达显著下降（P<0.05），海马神经元的凋亡增加了49%（P<0.05）。糖尿病+Ghrelin组学习和记忆成绩明显优于糖尿病组（P<0.05），其海马部位的caspase-3的mRNA及蛋白表达显著下降（P<0.05），BCL-xl蛋白表达明显升高（P<0.05），海马神经元的凋亡减少了42%。结论 Ghrelin对糖尿病大鼠认知功能有改善作用，机制可能与下调caspase-3，上调BCL-xl的表达从而抑制神经元的凋亡有关。

针刺镇痛在分娩中的作用及其机制

朱庆双 王凤英 孙晓燕

2011, 31(6):  679-682. 

摘要 ( 1579 )   PDF (473KB) ( 890 )  

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目的 观察针刺对分娩镇痛的临床效果及作用机制，寻找一种安全有效、简便可行的分娩镇痛方法。 方法 随机抽样法选择针刺组16例、针刺+电刺激组29例和对照组46例，以视觉模拟评分疼痛分级法(VRS)评定镇痛效果,记录产程进展及产后出血情况、新生儿Apgar评分及体质量，观察针刺对母婴的影响。用高效液相色谱法（HPLC）检测针刺前后外周血中去甲肾上腺素(NA)及β-内啡肽(β-EP)含量变化，探讨该方法的镇痛机制。结果 针刺镇痛后VAS评分下降，疼痛缓解率82.76%，明显高于对照组的17.94%，并明显提高外周血中β-EP浓度，针刺后血β-EP及NA分别为5.20±0.93 mg/L及1230±18ng/L，显著高于对照组的4.38±0.67mg/L及783±31ng/L(P＜0.05)。 结论 针刺能有效减轻第一产程分娩疼痛, 其镇痛效果可能是通过针刺使脑内具有镇痛作用的递质β-EP含量明显增加有关。

P38MAPK信号通路的激活促进SH-SY5Y细胞内Aβ生成

郭学文 李良

2011, 31(6):  683-687. 

摘要 ( 1473 )   PDF (574KB) ( 1078 )  

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目的 研究P38MAPK信号通路的激活对SH-SY5Y细胞内β-淀粉样肽（Aβ）生成的影响。方法 P38MAPK信号通路激动剂茴香霉素处理神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞1和72 h，ELISA方法检测细胞内Aβ含量；实时定量PCR和Western blot分别检测APP、PS1和BACE1 基因mRNA和蛋白的表达。结果 经茴香霉素处理1和72 h的SH-SY5Y细胞磷酸化的P38MAPK表达均明显增加；茴香霉素处理72h后细胞内Aβ1-40含量约为(46.88±3.60) pg/mL[p<0.05，对照组组为(39.09±1.60) pg/mL]；茴香霉素处理1h后细胞内APP和PS1 mRNA表达明显增多，而处理72h后APP、PS1 和BACE1 mRNA表达均明显增多；茴香霉素处理1h 后细胞内APP、PS1和BACE1蛋白表达无明显改变，而处理72h后APP、PS1和BACE1蛋白表达均明显增多,分别为对照组的1.45倍、1.38倍和1.60倍。结论 P38MAPK信号通路的激活可促使Aβ生成增加，在阿尔茨海默病的发病过程中起一定作用。

Aβ1-42对SH-SY5Y细胞T514位点磷酸化CRMP2表达的影响

朱天瑞 李晓红 王敏 张媛媛 王栋

2011, 31(6):  688-693. 

摘要 ( 1366 )   PDF (952KB) ( 779 )  

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目的：探讨β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）对神经成廇细胞SH-SY5Y轴突生长状态、细胞微管结构及T514位点磷酸化脑衰蛋白反应调节蛋白2 (CRMP2)表达的影响。方法：用全反式维甲酸诱导SH-SY5Y细胞，细胞外给予聚集态Aβ1-42致细胞损伤；用MTT法检测细胞存活率；用细胞化学法测量细胞轴突长度；免疫荧光法观察细胞微管结构及T514位点磷酸化CRMP2的分布；Westen blot分析T514位点磷酸化CRMP2在细胞内的表达。结果：0.1与1μmol/L聚集态Aβ1-42使诱导后SH-SY5Y细胞存活率显著减低（p<0.01）；以1μmol/LAβ1-42处理后，细胞轴突长度缩短（p<0.05）。0.1和1μmol/L Aβ1-42处理后细胞微管结构模糊，T514位点磷酸化CRMP2在细胞内荧光分布面积扩大（p<0.05），强调度增加（p<0.01）；用0.1和1μmol/L聚集态Aβ1-42处理后细胞内T514位点磷酸化CRMP2表达量显著增加（p<0.01）。 结论：Aβ1-42可增加SH-SY5Y细胞内T514位点磷酸化CRMP2的表达，损害微管结构，抑制轴突生长。

多效生长因子诱导人脐血间充质干细胞向多巴胺能神经元样细胞分化

薛丹丹 孙海梅 季凤清 周德山

2011, 31(6):  694-699. 

摘要 ( 1310 )   PDF (1109KB) ( 719 )  

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目的 探讨多效生长因子（PTN）诱导人脐血间充质干细胞(CB-MSCs)向多巴胺（DA）能神经元样细胞分化的可能机制。方法 密度梯度离心和贴壁筛选法纯化CB-MSCs，加入重组人PTN (rPTN)作为诱导组（rPTN组），以单纯传代培养的CB-MSCs作为对照（CON组），培养48h后用免疫荧光染色和RT-PCR鉴定CB-MSCs表达PTN及其受体SDC3和ALK，以及诱导分化的细胞表达TH、DAT和NSE的情况。结果 随rPTN诱导时间延长，CB-MSCs形态发生变化，TH、DAT和NSE的表达量明显增加，免疫荧光阳性细胞率：TH(CON组)为3.77±0.42，（rPTN组）为7.91±0.55；DAT(CON组)为1.89±0.28，（rPTN组）为6.21±0.77；NSE(CON组)为4.35±0.76，（rPTN组）为7.67±0.97；诱导的CB-MSCs表达PTN受体SDC3明显高于对照组；rPTN可诱导CB-MSCs自身表达PTN增加，免疫荧光阳性细胞率：PTN(CON组)为14.38±0.54，（rPTN组）为20.21±1.51；SDC3(CON组)为5.70±0.78，（rPTN组）为10.02±1.45；ALK(CON组)为4.87±0.34，（rPTN组）为5.01±0.99；结论 rPTN能够通过促进CB-MSCs表达PTN及其受体SDC3增加，诱导CB-MSCs向DA能神经元样细胞分化。

大鼠抑郁障碍参与启动心血管组织NF-κB表达增强

陈莹 常志文 杨琳 翟艳苓 张勇 林文娟

2011, 31(6):  700-703. 

摘要 ( 1356 )   PDF (553KB) ( 773 )  

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目的 探讨强迫游泳抑郁模型大鼠抑郁障碍与炎性标记物的相关性。方法 健康SD大鼠随机分为对照组和模型组，应用21天强迫游泳试验建立大鼠抑郁模型，模型组大鼠包括SS组（应激＋生理盐水腹腔注射）和SI组（应激＋丙米嗪腹腔注射）。应用透射免疫比浊法和酶联免疫法检测外周血炎性标记物hsCRP、MCP-1水平，应用免疫组织化学染色法检测血管组织NF-κB p65、MCP-1表达。 结果 应激后外周血hsCRP和MCP-1含量明显高于对照组（p<0.05），血管组织中MCP-1为35.6±7.5、NF-κB p65为31.2±6.5，表达显著增强（p<0.05），药物干预组外周血MCP-1显著回降（p<0.05），血管组织炎性标志物表达减少。 结论 抑郁障碍通过NF-κB表达增强，进而启动炎性反应。

三维超声胃重建成像评价健康人近端胃适应性功能

张静 徐钟慧 柯美云 王智凤 孙晓红 赵威 戴晴

2011, 31(6):  704-708. 

摘要 ( 1413 )   PDF (690KB) ( 702 )  

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目的 采用三维超声（3DUS）胃重建结合灌注法液体营养餐负荷试验（P-NLT）评价健康志愿者（HS）近端胃适应性功能，以及P-NLT的可行性和可靠性。方法 HS 10例，分别采用3DUS和2DUS结合P-NLT（经鼻胃管，50mL/min，0.75kcal/mL）进行近端胃容积（PGV）、近端胃面积（PGA）成像及测量，P-NLT过程中采用VAS视觉评分（0～10）进行饱感评价，并记录不同饱感时的灌注量及时间。将3DUS的测量值与2DUS的相应参数比较。结果 两次P-NLT的阈值灌注量（TV）和最大灌注量（MV）均无显著性差异。 3DUS测量的阈值PGV与TV（p<0.05）、最大饱感时的最大PGV（p<0.01）和最大PGA（p<0.05）与MV均有显著相关性。3DUS测得的阈值PGA（p<0.01）、最大PGV（p<0.05）和最大PGA（p<0.01）与相应2DUS测量参数比较有显著差异，但是最大饱感时采用3DUS测量的MV与PGA和PGV的拟合曲线与2DUS相应测量值的拟合曲线基本平行。结论3DUS胃重建成像测量的近端胃变化能更准确更可靠地评价近端胃的适应性；P-NLT是一种有效评价近端胃适应性的方法。

技术与方法

新型非病毒载体O-CHCS携带HBD2转染L929细胞及表达产物活性检测

崔南 房晓楠 张妮 陈名懋 李学敏 陈新年

2011, 31(6):  709-712. 

摘要 ( 1331 )   PDF (496KB) ( 771 )  

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目的 研究O－胆甾醇基壳聚糖（O-CHCS）作为基因载体进行人β防御素-2（HBD2）基因转染小鼠纤维母细胞（L929）的可行性及检测目的基因表达产物的生物活性。方法 构建重组质粒pCMV-hBD2，通过O-CHCS介导转染于L929细胞，提取转染细胞总RNA，用RT-PCR检测HBD2基因转录水平；收集转染细胞培养上清液,用Western blotting检测HBD2基因蛋白的表达；用Kirby-Bauer纸片法检测HBD2抗菌活性，同时以Lipofect脂质体转染试剂作为阳性对照。 结果 经过O-CHCS介导转染的L929细胞，目的基因HBD2在转录水平和蛋白水平均有表达，转染细胞上清液对金黄色葡萄球菌有抑菌圈形成，结果同Lipofect的转染效果基本一致。结论 成功构建了真核表达载体pCMV-hBD2，证实了O-CHCS可以作为基因载体用于目的基因（HBD2）的转染，且目的基因表达产物具有生物活性，为基因工程合成HBD2提供一种经济便捷的途径。

临床园地

微小连续环形撕囊在膨胀期老年性白内障超声乳化手术中的应用

刘小伟 王铮 于伟泓 王造文 毛进

2011, 31(6):  713-716. 

摘要 ( 1742 )   PDF (435KB) ( 942 )  

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目的 研究膨胀期老年性白内障超声乳化中微小连续环形撕囊的安全性和短期手术效果。方法 对143例皮质膨胀期老年性白内障患者进行较小的连续环形撕囊，常规超声乳化手术，植入人工晶状体后，根据撕囊直径的大小，再扩大撕囊至6mm左右。对连续环形撕囊的完成率、术中、术后并发症和术后最佳矫正视力进行统计分析。结果 132例（92.3%）膨胀期白内障患者顺利完成连续环形撕囊，其中82例（57.3%）进行了2次撕囊。8例（5.6%）环形私囊失败的患者最终采用白内障囊外摘除术，4例（2.8%）术中发生后囊膜破裂和玻璃体丢失。结论 膨胀期白内障的超声乳化手术采用微小连续环形撕囊方法，必要时2次撕囊，具有良好的安全性。

研究短文

地塞米松对两种急性肝损伤模型小鼠的作用

彭小蓉 卢虹旭 刘娟 何菲 黎桂菊 谢军 陈黎 张力

2011, 31(6):  717-718. 

摘要 ( 1711 )   PDF (1115KB) ( 928 )  

相关文章 | 计量指标

人良性胆管瘢痕成纤维细胞的培养和鉴定

邹浩 王滔 张小文 朱红 纳钊 沈需

2011, 31(6):  719-720. 

摘要 ( 1358 )   PDF (418KB) ( 730 )  

相关文章 | 计量指标

CFSE/PI双标法检测CIK细胞对顺铂预处理肿瘤细胞的杀伤活性

徐本玲 高全立 袁龙 张旭华 范瑞华 刘雪 郭金东

2011, 31(6):  721-722. 

摘要 ( 1627 )   PDF (418KB) ( 809 )  

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