基础医学与临床 ›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (6): 615-620.
师敬飞1,崔莲仙2,何维2
Jing-fei SHI1,Lian-xian CUI2,Wei HE2
摘要: 目的 检验M2型丙酮酸激酶(PKM2)是否是肿瘤细胞表面TCRγδ识别的配体。方法 用Western blot的方法验证OT3肽(合成的TCRγδ中δ链的CDR3区肽) 与PKM2结合,用Western blot 及免疫组化法观察PKM2在肿瘤细胞及组织中的表达,用流式细胞术及激光扫描共聚焦显微镜术验证PKM2在肿瘤细胞的定位,用固相化PKM2体外扩增γδT细胞和PKM2刺激γδT细胞分泌IFN-γ的实验检验PKM2的功能。结果 (1) PKM2可与OT3肽结合,肿瘤细胞总蛋白提取物中含有大量PKM2,提示以OT3为探针,从肿瘤细胞总蛋白提取物中钓取到PKM2是合理的,用此方法筛选OT3结合蛋白的方法是可行的;(2) PKM2普遍表达于肿瘤细胞及组织,但不表达于肿瘤细胞膜;(3) PKM2在体外不能扩增γδT细胞,无刺激γδT细胞产生IFN-γ的功能。结论 PKM2不表达于肿瘤细胞表面,对γδT细胞不具有刺激活化的功能,PKM2不具备TCRγδ的配体特性。
中图分类号: