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2023年 第43卷 第1期 刊出日期:2023-01-05
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特邀专题:成体干细胞基础创新与临床转化
干细胞基础及临床转化创新研究推动我国生物医药前沿科技繁荣发展
韩钦, 赵春华
2023, 43(1): 1-1. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0001
摘要
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间充质干细胞的免疫调节可塑性及其临床应用策略
汪海燕, 韩钦, 赵春华
2023, 43(1): 2-11. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0002
摘要
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计量指标
间充质干细胞(MSCs)是具有自我更新、多向分化和免疫调节能力的多能干细胞。越来越多的研究证明了MSCs在免疫紊乱相关疾病治疗中的有益作用。然而体内获取或体外培养的MSCs的免疫调节能力都存在异质性,MSCs的免疫调节能力也会受到微环境的调控。本综述概述MSCs的免疫抑制能力和免疫支持能力的机制,介绍最近关于MSCs免疫调节机制的研究及其免疫调节能力可塑性假说,并讨论在细胞生产阶段增强MSCs免疫调节能力的策略,以期为MSCs临床转化研究提供参考。
间充质干细胞移植治疗肝脏疾病的研究进展
周嘉航, 陈鋆瑶, 曹红翠
2023, 43(1): 12-20. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0012
摘要
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肝脏疾病严重危害人类健康,然而目前对于肝硬化和肝衰竭等终末期肝脏疾病的内科治疗方法疗效欠佳。间充质干细胞(MSCs)因其具有多向分化潜能和免疫调节功能,有望在临床上用于治疗各种病因所致的肝硬化、慢加急性肝衰竭、慢性肝衰竭以及肝移植后的并发症等。MSCs可通过直接分化为肝细胞样细胞,间接分泌可溶性因子以产生抗氧化、抗调节性细胞死亡、抗纤维化、抑制炎性反应、抑制免疫反应等作用,从而减轻肝脏损伤和提高生存率。完善的质量标准评价体系和更加深入的机制探索是未来MSCs用于临床治疗肝脏疾病的前提。
间充质干细胞治疗心肌梗死的研究进展
姜俣, 钱海燕
2023, 43(1): 21-29. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0021
摘要
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急性心肌梗死(AMI)是由冠状动脉闭塞引起的缺血性心肌坏死,无法通过心肌细胞再生进行自我修复,坏死心肌被纤维瘢痕替代,引发心室重塑,最终导致心力衰竭。诸多临床前和临床研究证实间充质干细胞(MSCs)移植治疗AMI的安全性和有效性。MSCs由多向分化潜能、能够调节氧化应激、分泌多种细胞因子和生长因子的异质性细胞组成,在移植过程中通过转分化、细胞融合和旁分泌等途径发挥其免疫调节、血管生成、抗炎和抗凋亡等作用。迄今已有多种移植途径输注MSCs,包括心肌内注射、经冠状动脉内注射、经静脉注射等。此外,移植的细胞剂量、时机等均是影响MSCs治疗效果的重要因素。然而,MSCs移植后在梗死心肌中的滞留率和存活率均很低,进而限制其进一步发挥作用,也是导致其向临床转化应用的重要瓶颈和障碍。针对上述问题,近年来诸多研究提出新理念、新策略、新技术和新方法,如细胞预处理、优化梗死局部微环境、联合基因治疗或组织工程技术、外泌体输注、靶向移植干细胞及其外泌体等,显著提高了MSCs的移植效率和治疗效果,为干细胞修复梗死心肌的研究和转化揭开新的篇章。本文对近年来MSCs修复梗死心肌的进展做一综述。
间充质干细胞在肾脏疾病治疗中的应用进展
杨蕴钊, 石美涵, 周诚, 白雪源
2023, 43(1): 30-37. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0030
摘要
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间充质干细胞可以通过旁分泌各种细胞因子减轻炎性反应和恢复肾脏损伤,以及通过调控免疫细胞维持免疫稳态。临床前研究表明,间充质干细胞对急性肾损伤、糖尿病肾病、狼疮性肾炎及各种肾小球疾病动物模型均有明显的治疗效果。临床研究中也证明了间充质干细胞治疗人类肾病是安全、有效的。间充质干细胞疗法揭开了肾脏疾病领域新的生物治疗模式。
间充质干细胞在衰老相关疾病应用中的研究进展
商利鹏, 刘国祥, 丁晓燕, 李冰, 赵春华, 李霄霞
2023, 43(1): 38-45. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0038
摘要
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衰老相关疾病严重影响老年人的身体健康,间充质干细胞(MSCs)在衰老相关疾病中的作用和机制研究受到越来越多的关注,国内外研究者也开展了多项相关的临床试验研究。本文对MSCs及其来源外泌体(exosome)在衰老相关的典型疾病如骨质疏松、帕金森病、2型糖尿病、动脉粥样硬化、慢性阻塞性肺病和肿瘤中的作用机制和临床试验进行综述,希望为MSCs在衰老相关疾病中的研究提供一定的理论依据和参考。
以“肾-三焦”系统诠释间充质干细胞实质
张晓彤, 赵月纯, 朱镕嘉, 赵春华, 宋坪
2023, 43(1): 46-50. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0046
摘要
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肾与三焦在结构与功能上密不可分,故此提出“肾-三焦”可能是间充质干细胞(MSCs)系统的本质,“肾-三焦”是对MSCs系统中医属性的探讨,以肾为本源、三焦为枢机,本文旨在从“肾精为体、三焦为用”的角度诠释MSCs系统的理论内涵,MSCs的形态与分布及发挥功能的物质、途径、功能均可在“肾-三焦”系统中得以体现,并通过中医药理论为指导,运用MSCs的现代研究技术,在COVID-19等难治性疾病的应用中取得了较好的效果,对中西医研究的结合进行了初步探索。
研究论文
新型冠状病毒非结构蛋白14的表达及酶活性分析
陈双, 徐婧雯, 丁开云, 刘建生, 彭小忠, 刘红旗
2023, 43(1): 51-58. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0051
摘要
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目的
获得纯度较高和有酶活性的新型冠状(新冠)病毒(SARS-CoV-2)非结构蛋白14(Nsp14)。
方法
根据大肠埃希氏菌(
E.coli
)的密码子偏好性,分析新冠病毒原始株基因
nsp14
的稀有密码子,并对其进行优化。将
nsp14
克隆至4个不同的表达载体并进行表达;通过对表达量和可溶性的比较分析,选择一个表达效果最好的重组表达质粒并优化表达条件;目的蛋白经谷胱甘肽亲和柱纯化后,用半胱氨酸家族蛋白酶(3C)切除融合标签,再分别利用谷胱甘肽亲和柱和分子筛柱纯化蛋白质。最后通过尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对其活性进行鉴定。
结果
Nsp14的基因在大肠杆菌中表达存在较多的稀有密码子,其中部分稀有密码子呈现近距离分布和串联分布。pGEX6P1-GST-OPTI-Nsp14重组质粒在大肠杆菌中表达的可溶性效果最好,其最佳表达温度为30 ℃。经纯化后获得了较纯的不含标签的Nsp14,该蛋白具有核酸酶活性。
结论
本研究成功地表达和纯化出具有核酸酶活性的新冠病毒Nsp14,为进一步推进对新冠病毒Nsp14的结构和功能研究奠定了基础,为筛选靶向Nsp14的抗病毒治疗药物提供了有利的条件。
小鼠内源性逆转录病毒Gag抗原在胰岛的表达及单克隆抗体的制备
李瑜, 张雯, 袁昱, 李姝亭, 王哲, 贲亚琍, 戴飏
2023, 43(1): 59-67. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0059
摘要
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目的
探究一种新发现的与1型糖尿病(T1D)相关的T细胞抗原[内源性逆转录病毒(ERV)的组特异性抗原(Gag)]与T1D发病的关系。
方法
首先对一个从非肥胖糖尿病(NOD)模型小鼠胰岛获得的Gag抗原(Gag 194)的氨基酸序列进行分析[多肽位置:193-210(VSRLRGRRDPPAVDSTTS)],确定Gag 194多肽作为靶点,制备单抗;然后,再利用ELISA和Western blot检测单抗的特异性;最后,在免疫组织化学实验中检测不同年龄的T1D敏感的NOD小鼠与抗性的C57BL/6小鼠胰腺Gag抗原表达的差异性。
结果
成功制备了5株(1F4C8、2D4C6、3C3B9、4D6B3、5F9E4)IgG2b亚型的小鼠ERV Gag单抗;5株单抗的敏感性及特异性具有差异;其中,生物素化后的3株单抗(1F4C8、2D4C6、5F9E4)能特异识别NOD小鼠胰腺中表达的ERV Gag抗原且该抗原的表达可在3周龄的NOD小鼠检测到,Gag抗原多表达在NOD小鼠胰岛β细胞区域内,而非淋巴细胞浸润的区域。此外,C57BL/6小鼠的胰腺Gag抗原的表达为阴性。
结论
在NOD小鼠幼年时期ERV Gag抗原就已经开始表达,该抗原的表达可能受其特异的基因调控。
泛癌中SMYD3的表达与预后及免疫浸润之间的关系
陈浩然, 司甜, 姜懿珅, 王殿恒, 周雅博, 吕家迪
2023, 43(1): 68-75. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0068
摘要
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计量指标
目的
研究SMYD3表达在泛癌中的预后价值,分析SMYD3对于肿瘤组织免疫浸润的影响。
方法
从TCGA、GTEx、HPA等数据库收集基因表达矩阵以及蛋白质表达等数据。使用Kaplan-Meier算法评价了SMYD3在不同肿瘤中的预后价值。使用ESTIMATE算法和Timer数据库的信息分析SMYD3与免疫浸润的关系。以小鼠黑色素瘤细胞系B16为例,在细胞水平验证SMYD3对抗原提呈基因表达的影响。
结果
转录组和蛋白组学数据表明SMYD3在肿瘤组织中表达升高,并且SMYD3的高表达和泛癌的不良预后相关(
P
<0.05);SMYD3抑制了多种免疫细胞的浸润(
P
<0.05),敲除
Smyd3
的B16细胞抗原呈递基因表达水平升高(
P
<0.05)。
结论
Smyd3
是一个重要的肿瘤预后相关基因,其通过下调抗原递呈基因的表达,抑制免疫细胞浸润,诱导肿瘤细胞免疫逃逸。
核酸适配体W3介导靶向乳腺癌的量子点成像
王群, 李鑫, 马俊, 李婉明
2023, 43(1): 76-82. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0076
摘要
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目的
利用核酸适配体W3对乳腺癌细胞的结合特异性,对乳腺癌细胞以及临床乳腺癌组织石蜡切片标本进行量子点(QDs)成像。
方法
利用流式细胞测量术检测核酸适配体W3对乳腺癌细胞系的结合特异性,基于生物素与链霉亲和素的结合反应原理,通过荧光显微镜观察核酸适配体W3对乳腺癌细胞系以及临床乳腺癌患者组织标本的量子点靶向成像,并进一步分析其临床意义。
结果
核酸适配体W3能特异性结合恶性程度较高的乳腺癌细胞,偶联量子点QD605形成量子点探针(W3-QDs),能够对恶性程度较高的乳腺癌细胞系以及乳腺癌组织实现靶向成像,并且具有高恶性程度的乳腺癌组织的荧光强度明显高于恶性程度低的乳腺癌组织。
结论
核酸适配体W3偶联量子点后能够实现乳腺癌的靶向成像,可用于乳腺癌的早期诊断。
骨桥蛋白在大鼠肝缺血/再灌注损伤中的作用
郭丽苹, 苏娟, 田新雁, 陆丽, 胡亚荣, 秦燕
2023, 43(1): 83-86. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0083
摘要
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目的
研究大鼠肝缺血/再灌注损伤(HI/RI)过程中骨桥蛋白(OPN)的作用。
方法
将大鼠分为假手术组(sham)和缺血/再灌注(I/R) 6、12和24 h组,每组6只。苏木精-伊红染色(HE染色)观察肝组织的形态学变化;比色法检测大鼠血浆中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;RT-qPCR测定肝组织OPN mRNA表达;ELISA测定肝组织OPN含量。
结果
与sham组相比,HE染色提示I/R后肝细胞有明显的变性和坏死,以I/R 24 h组最为明显;血浆中AST和ALT水平增高,I/R 12 h时最显著(
P
<0.01);肝组织中MDA含量升高、SOD活力降低,I/R 24 h最显著(
P
<0.01);肝组织OPN mRNA表达量在I/R各组均有显著升高(
P
<0.01),OPN含量在I/R 24 h组显著增加(
P
<0.05)。
结论
OPN参与了大鼠HI/RI的发生,它可能是评价肝脏损伤的重要指标。
miR-203a-3p抑制人肝癌细胞系增殖
黄驿胜, 叶启文, 王竞枫
2023, 43(1): 87-94. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0087
摘要
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目的
探索miR-203a-3p对人肝癌细胞系增殖和凋亡的分子调节机制。
方法
RT-qPCR检测临床肝癌(HCC)组织及肝癌细胞系中miR-203a-3p的表达;建立miR-203a-3p过表达的HepG2细胞模型;MTT法检测细胞增殖;流式细胞测量术检测细胞凋亡;平板集落形成实验检测集落形成;细胞划痕实验检测细胞迁移;表达谱芯片检测mRNA水平;ELISA检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的分泌;Western blot检测TGF-β1表达。
结果
miR-203a-3p在HCC组织中低表达(
P
<0.05),与肿瘤分期呈负相关(
P
<0.05);HepG2细胞中过表达miR-203a-3p可显著降低细胞增殖速率(
P
<0.05)、迁移能力(
P
<0.05)、克隆形成能力(
P
<0.05),促进细胞凋亡(
P
<0.05);TGF-β1表达降低(
P
<0.05),而TGFβR1表达升高(
P
<0.05);细胞培养上清中TGF-β1含量降低(
P
<0.05);细胞内TGF-β1的蛋白降低(
P
<0.05);加入TGF-β1重组蛋白可减轻miR-203a-3p导致的增殖降低和迁移降低(
P
<0.05)。
结论
miR-203a-3p抑制人肝细胞癌细胞系增殖,促凋亡,并且抑制TGF-β1蛋白的表达。
miR-504调控蛋白酶体激活因子抑制人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及迁移
杨良权, 于淼, 姜茜, 张明慧, 杨海松
2023, 43(1): 95-101. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0095
摘要
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目的
观察miR-504在模型裸鼠以及乳腺癌细胞生物学行为的调节作用,寻找miR-504在调控过程中的关键靶基因,探究miR-504在乳腺癌中的调控机制。
方法
构建乳腺癌模型小鼠并观察miR-504对瘤体生长的影响。TargetScan筛选miR-504的靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验证实;RT-qPCR、Western blot检测蛋白酶体激活因子复合体亚基3(PSME3)在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达;CCK8法、流式细胞测量术和Transwell小室法检测miR-504和PSME3对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖,周期和迁移能力的作用。
结果
在乳腺癌裸鼠移植瘤模型中miR-504能抑制瘤体生长;
PSME3
是miR-504的靶基因,在乳腺癌组织的表达明显升高(
P
<0.01),上调miR-504的表达能抑制PSME3的表达 (
P
<0.01);较NC组,miR-504 mimic组能抑制乳腺癌细胞增殖、S期阻滞和迁移能力,而较miR-504 mimic组,miR-504 mimic+PSME3组MCF-7细胞增殖、S期比例和迁移能力升高(
P
<0.01)。
结论
miR-504可能通过靶向调控PSME3在乳腺癌中发挥抑癌作用。
LncRNA MINCR靶向miR-223抑制LPS诱导的人肺泡上皮细胞系A549损伤和炎性反应
杨广林, 任丽娟, 陈文静, 熊维军
2023, 43(1): 102-109. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0102
摘要
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目的
探讨长链非编码RNA(lncRNA)MINCR靶向调节微小RNA(miR)-223对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞系损伤和炎性反应的影响。
方法
将人肺泡上皮细胞系A549随机分为对照组、LPS组、LPS+转染组(Si NC组、Si MINCR组、miR-223 NC组、miR-223 mimic组、Si NC+miR-223 NC组、Si NC+miR-223 antagomir组、Si MINCR+miR-223 NC组、Si MINCR+miR-223 antagomir组)。RT-qPCR检测MINCR、miR-223表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;生物信息学预测和双荧光素酶报告基因验证MINCR与miR-223的靶向关系;Western blot检测细胞中活化的半胱天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平。
结果
MINCR和miR-223存在靶向关系。LPS组与对照组比较,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平、MINCR、cleaved caspase-3蛋白表达均显著增加(
P
<0.05),miR-223、Bcl-2蛋白表达显著降低(
P
<0.05)。与Si NC组相比,Si MINCR组细胞凋亡率、TNF-α和IL-6水平、MINCR和cleaved caspase-3蛋白表达均显著降低(
P
<0.05),Bcl-2蛋白表达显著升高(
P
<0.05);与miR-223 NC相比,miR-223 mimic组细胞凋亡率、TNF-α和IL-6水平、cleaved caspase-3蛋白表达均显著降低(
P
<0.05),miR-223、Bcl-2蛋白表达显著升高(
P
<0.05)。miR-223 antagomir可逆转Si MINCR发挥的作用(
P
<0.05)。
结论
沉默lncRNA MINCR的表达可能通过靶向激活miR-223表达,抑制A549细胞凋亡以及炎性反应,减少LPS诱导的A549细胞损伤。
鲍曼不动杆菌外膜囊泡诱发人单核
-
巨噬细胞THP-1的炎性反应
付士祥, 席月, 丁龙坤, 闫曼, 赵俊, 焦玉东, 吴亮
2023, 43(1): 110-115. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0110
摘要
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计量指标
目的
建立超速离心法纯化鲍曼不动杆菌外膜囊泡(OMVs),并探讨OMVs诱发人单核-巨噬细胞THP-1炎性反应能力。
方法
大量培养鲍曼不动杆菌标准菌株,从培养液上清中以超速离心法提纯OMVs并以透射电镜观察形态。分别以5 和50 μg/mL的OMVs与THP-1细胞共培养,RT-qPCR检测NOD样受体家族蛋白(NLRP3)和caspase-1表达量;ELISA检测培养液上清中IL-1β含量;蛋白质印迹法检测细胞自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达量;酶促动力学法检测细胞caspase-3酶活性;流式细胞测量术检测细胞活性氧表达量。
结果
成功提纯鲍曼不动杆菌OMVs。OMVs可以诱导THP-1细胞NLRP3炎性复合体活化,并增加自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达量(
P
<0.05),以及上调凋亡关键因子caspase-3酶活性(
P
<0.05)。共培养1 h时,OMVs可以显著上调THP-1细胞活性氧表达(
P
<0.05)。
结论
鲍曼不动杆菌OMVs可以显著活化巨噬细胞NLRP3炎性复合体。
二甲双胍抑制腰椎间盘退变模型兔椎间盘组织的细胞凋亡
董军立, 蔡少康, 严蕾, 蔡毅
2023, 43(1): 116-122. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0116
摘要
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计量指标
目的
探究二甲双胍对兔椎间盘组织自噬及炎性反应的影响,以初步探究其抗椎间盘退变的分子机制。
方法
将兔分为:假手术组、模型组、二甲双胍组、自噬抑制剂组、二甲双胍+自噬抑制剂组,每组10只。免疫组化染色法检测自噬相关蛋白7(Atg7)阳性表达;Western blot检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、Beclin1、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、凋亡相关蛋白caspase-8表达。
结果
与模型组相比,二甲双胍组兔椎间盘退变减轻,自噬小体及自噬溶酶体形成增多,自噬蛋白质表达增多,炎性因子及凋亡蛋白质表达降低(
P
<0.05)。自噬抑制剂可抑制自噬,加重椎间盘退变,增强炎性因子及凋亡蛋白质表达,并减弱二甲双胍发挥的增强自噬、减弱炎性反应及凋亡作用(
P
<0.05)。
结论
二甲双胍可能通过促进自噬激活,减弱炎性反应,来抑制椎间盘组织细胞凋亡,改善椎间盘退变。
黄芩提取物抑制IL-22诱导的人角质形成细胞系HaCaT过度增殖
曾颖, 付桂莉
2023, 43(1): 123-129. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0123
摘要
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计量指标
目的
探究黄芩提取物通过miR-369-3p对白介素-22(IL-22)诱导的人角质形成细胞系HaCaT增殖、凋亡和炎性反应的影响。
方法
将HaCaT细胞分为对照组、IL-22组(细胞模型,100 ng/mL 的IL-22培养细胞)、低、中和高剂量组(黄芩提取物50、100、150 μg/mL)、anti-miR-NC干预组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-369-3p干预组(转染anti-miR-369-3p)、miR-NC+高剂量组(转染miR-NC,高剂量黄芩提取物培养细胞)、miR-369-3p+高剂量组(转染miR-369-3p,高剂量黄芩提取物培养细胞)。MTT法检测细胞增殖;流式细胞测量术检测细胞凋亡;Western blot检测cleaved caspase-3蛋白表达;ELISA检测TNF-α、IL-6含量;RT-qPCR检测miR-369-3p表达。
结果
与对照组相比,IL-22组细胞存活率、miR-369-3p表达、TNF-α、IL-6表达升高(
P
<0.05),细胞凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达的差异无统计学意义;与IL-22组相比,低、中和高剂量组细胞存活率、miR-369-3p表达、TNF-α、IL-6表达降低,细胞凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达升高(
P
<0.05)。与anti-miR-NC干预组相比,anti-miR-369-3p干预组细胞存活率、TNF-α、IL-6表达降低,细胞凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达升高(
P
<0.05)。过表达miR-369-3p可以部分逆转黄芩提取物对银屑病细胞模型的细胞活性,凋亡以及炎性水平的作用(
P
<0.05)。
结论
黄芩提取物可能通过抑制miR-369-3p表达,抑制IL-22诱导的人角质形成细胞过度增殖和炎性反应,并促进其凋亡。
敲低
Stau1
后小鼠前脂肪细胞系3T3-L1中FOXP1的表达增加
孟轩羽, 刘迪晖, 蒋硕, 关亚群, 梁小弟
2023, 43(1): 130-136. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0130
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在小鼠前脂肪细胞系3T3-L1分化过程中敲低双链RNA结合蛋白Staufen1(
Stau1
)后筛选差异表达的基因,分析其生物学功能,并用qPCR验证测序结果。
方法
用RNA-seq分析
Stau1
敲低后基因的转录调控。构建STAU1 shRNA并转染3T3-L1细胞,鸡尾酒方法诱导其分化为成熟脂肪细胞,收取0、4 d的细胞设立对照组和STAU1敲低组(各3组生物重复样本)收取12组样品的细胞基因芯片信息,以变化倍数log2(Fold change)>1且校正后的
P
<0.05作为条件筛选
Stau1
敲低的细胞与对照组样本间的差异表达基因,进行基因本体论(GO)及代谢通路分析(KEGG通路数据库),qPCR验证差异表达的基因。荧光素酶报告基因实验验证SATU1与叉头盒蛋白P1 FOXP1 mRNA 3′UTR上Staufen1结合位点(SBS)存在结合。
结果
较对照组STAU1敲低细胞组中共筛选出差异表达基因588个,其中上调406个、下调182个。差异表达基因主要参与的生物学过程中脂代谢、炎性反应因子,主要富集的信号通路有糖代谢和能量代谢相关通路。敲低
Stau1
后FOXP1表达升高5.3倍,软件预测FOXP1 mRNA 3′UTR含有STAU1结合位点,荧光素酶报告基因验证了FOXP1 mRNA 3′UTR含有STAU1结合位点。
结论
推测STAU1能够与FOXP1 mRNA上的STAU1结合位点结合并促进其降解。
丙泊酚减轻低氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12炎性反应和细胞凋亡
顾炜, 祝剑平, 吴品雯
2023, 43(1): 137-143. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0137
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研究丙泊酚是否通过抑制miR-141-3p的表达,减轻低氧诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12炎性反应和细胞凋亡的分子机制。
方法
将PC12细胞分为对照组、低氧组、(5、10、20)μmol/L丙泊酚+低氧组、anti-miR-con+低氧组、anti-miR-141-3p+低氧组、miR-con+20 μmol/L丙泊酚+低氧组、miR-141-3p+20 μmol/L丙泊酚+低氧组。流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡;Western blot检测活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达;相关试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;活性氧荧光探针DCFH-DA法测定活性氧(ROS)含量;ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;RT-qPCR检测miR-141-3p表达。
结果
与对照组比较,低氧组PC12细胞的凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和miR-141-3p表达量均升高,SOD活性减弱(
P
<0.05)。与低氧组比较,5、10、20 μmol/L丙泊酚+低氧组PC12细胞的凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA含量、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和miR-141-3p表达量均随丙泊酚浓度的增加呈降低趋势,SOD活性随丙泊酚浓度的增加呈升高趋势(
P
<0.05)。Anti-miR-141-3p+低氧组PC12细胞的miR-141-3p表达量、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和细胞凋亡率均比anti-miR-con+低氧组降低,SOD活性比anti-miR-con+低氧组增加(
P
<0.05)。miR-141-3p+20 μmol/L丙泊酚+低氧组PC12细胞的miR-141-3p表达量、cleaved caspase-3蛋白表达水平、MDA含量、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6含量和细胞凋亡率均高于miR-con+20 μmol/L 丙泊酚+低氧组,SOD活性低于miR-con+20 μmol/L 丙泊酚+低氧组(
P
<0.05)。
结论
丙泊酚可能通过抑制miR-141-3p的表达,减轻低氧诱导的PC12细胞炎性反应、氧化应激和细胞凋亡。
LncRNA DANCR靶向miR-3646减轻缺氧诱导的大鼠心肌细胞系H9c2的损伤
邱立彬, 张新才, 赵倩
2023, 43(1): 144-151. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0144
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研究长链非编码RNA(lncRNA)分化拮抗非蛋白编码RNA(DANCR)在心肌缺血中的作用与微小RNA-3646(miR-3646)的靶向调控关系。
方法
大鼠心肌细胞系H9c2分为6组:对照组、缺氧组、pc-DANCR(DANCR过表达)组、pc-NC(DANCR过表达对照)组、miR-3646 mimic(miR-3646模拟物)组、mimic NC(miR-3646模拟物对照)组及pc-DANCR+miR-3646 mimic组。RT-qPCR检测lncRNA DANCR及miR-3646表达以判定转染效果;流式细胞测量术检测细胞凋亡率;CCK-8法检测细胞生存率;电镜观察H9c2细胞结构损伤;Western blot检测活化半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)和血红素加氧酶-1(Ho-1)表达。双荧光素酶实验验证miR-3646与lncRNA DANCR和Ho-1的靶向关系。RNA干扰Ho-1(ShHo-1)与pc-DANCR共转染H9c2细胞,检测细胞生存率。
结果
与对照组相比,缺氧组H9c2细胞损伤、凋亡严重,生存率及lncRNA DANCR表达降低,miR-3646表达升高(
P
<0.05)。与缺氧组相比,pc-DANCR组H9c2细胞损伤、凋亡减轻,细胞生存率升高,Ho-1表达升高,miR-3646表达降低(
P
<0.05)。miR-3646模拟物组H9c2细胞损伤和凋亡进一步加重,且miR-3646模拟物可减弱pc-DANCR的抗损伤及抗凋亡作用(
P
<0.05)。干扰Ho-1可减弱lncRNA DANCR对缺氧诱导的H9c2细胞生存的促进作用(
P
<0.05)。
结论
LncRNA DANCR可靶向下调miR-3646表达减轻缺氧诱导的H9c2细胞损伤。
右美托咪定减轻缺氧诱导的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y损伤
阎晨, 刘涛, 宣斐
2023, 43(1): 152-158. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0152
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研究右美托咪定(DEX)在缺氧环境下对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y的保护作用及其机制。
方法
将SH-SY5Y细胞分为对照组、缺氧组(终浓度为1.2 mmol/L CoCl
2
处理24 h)和DEX干预组(终浓度为1.2 mmol/L CoCl
2
和10 μmol/L DEX处理24 h)。显微镜观察细胞形态;MTT比色法、TUNEL染色法和annexin V-FITC/PI染色法检测细胞活性和细胞凋亡;Western blot检测cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、p75
NTR
和p-NF-κB蛋白表达。
结果
与对照组比较,缺氧组细胞的胞体变小(
P
<0.01)、细胞活性降低(
P
<0.01)、凋亡增加(
P
<0.01),细胞中cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、p75
NTR
和p-NF-κB蛋白表达水平均明显增加(
P
<0.01)。DEX干预能显著缓解缺氧组的上述变化(
P
<0.01)。
结论
DEX可能通过抑制p75
NTR
表达和NF-κB活性缓解缺氧导致的SH-SY5Y细胞损伤。
丹酚酸B减轻骨关节炎模型大鼠软骨组织损伤
骞立刚, 孙博, 于泊, 陈康, 马铮, 陈涛平, 王云飞
2023, 43(1): 159-164. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0159
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探究丹酚酸B对骨关节炎模型大鼠的软骨组织损伤、低氧诱导因子-1(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响。
方法
构建骨关节炎模型大鼠,大鼠随机分为假手术组、骨关节炎组[切断交叉韧带法(ACLT)]、尼美舒利组、丹酚酸B高(40 mg/kg)和低(10 mg/kg)剂量组及丹酚酸B+HIF-1激活组,每组12只。显微CT机检测关节处骨结构;番红固绿染色和Masson染色观察软骨组织病理学变化;检测血清白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的活性;Western blot检测软骨组织HIF-1、VEGF、基质金属蛋白酶13(MMP-13)及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(ceaved caspase-3)表达。
结果
与假手术组相比,骨关节炎组软骨组织损伤严重,踝骨骨体积分数(BV/TV)降低,踝骨表面积与骨体积比值(BSA/BV)、血清中IL-6、TNF-α含量、iNOS活性、软骨HIF-1、VEGF、MMP-13及cleaved caspase-3蛋白表达升高(
P
<0.05);与骨关节炎组相比,尼美舒利组、丹酚酸B高和低剂量组软骨组织逐渐恢复,踝骨BV/TV升高,BSA/BV、血清IL-6、TNF-α含量、iNOS活性、软骨HIF-1、VEGF、MMP-13和cleaved caspase-3蛋白表达量降低(
P
<0.05);与丹酚酸B高剂量组相比,丹酚酸B+HIF-1激活组软骨组织损伤加重,踝骨BV/TV降低,BSA/BV、血清IL-6、TNF-α含量、iNOS活性、软骨HIF-1、VEGF、MMP-13及cleaved caspase-3蛋白表达升高(
P
<0.05)。
结论
丹酚酸B可通过调控HIF-1/VEGF通路,抑制HIF-1、VEGF表达,缓解骨关节炎。
临床研究
迈之灵改善铒(Er:YAG)激光点阵治疗面部痤疮瘢痕后的皮肤肿胀
丁文蕴, 王晨羽, 王文倩, 龙笑
2023, 43(1): 165-168. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0165
摘要
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目的
在探究迈之灵对于改善铒(Er:YAG)激光点阵术后皮肤肿胀的有效性。
方法
纳入接受2 940 nm铒激光点阵治疗的面部痤疮后瘢痕患者64例,将患者随机分为对照组与实验组。第1次激光治疗当日,实验组即开始口服迈之灵300 mg/次,每日2次,持续1周。对照组术后不服用任何药物。术后连续7 d对患者进行观察,对肿胀程度进行评估。
结果
术后第1、2、3、5天实验组患者皮肤肿胀程度均显著低于对照组(
P
<0.001),术后第6天实验组与对照组患者皮肤肿胀均明显消退。
结论
迈之灵能够显著改善2 940 nm铒激光点阵治疗面部痤疮后瘢痕导致的皮肤肿胀。
短篇综述
靶向Nrf2/ARE通路治疗缺血性卒中的研究进展
杨晓菲, 李强, 李延峰, 王洪权
2023, 43(1): 169-173. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0169
摘要
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Nrf2/ARE激活剂在缺血性卒中具有治疗作用。Nrf2/ARE激活剂可减轻短暂性局灶性脑缺血(tMCAO)实验动物模型中的脑损伤。靶向激活Nrf2/ARE通路有望成为治疗缺血性卒中的潜在靶点。
铁死亡在结直肠癌治疗中的作用
庄志诚, 官国先
2023, 43(1): 174-177. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0174
摘要
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铁死亡是近年来发现的一种由铁依赖的脂质活性氧蓄积所引发的程序性细胞死亡形式。其发生取决于细胞内铁稳态、脂代谢以及抗氧化系统三者的综合变化。结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一。通过诱导铁死亡途径能有效的抑制结直肠癌细胞的增殖、逆转耐药性以及提高结直肠癌细胞的放射敏感性等。
微生物相关肿瘤的发病机制及其治疗的研究进展
孙慧, 陈思宇
2023, 43(1): 178-182. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0178
摘要
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肿瘤是多因素参与和多阶段发病的疾病,其中生物致癌因素主要有致癌性病毒、细菌及寄生虫,常见的包括乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞癌、EB病毒(EBV)与鼻咽癌、人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌、幽门螺杆菌(Hp)与MALT淋巴瘤及胃癌等。肿瘤的发生发展与微生物密不可分,微生物可通过以下几种机制施展致癌促癌作用: 产生毒性物质、诱导毒性效应、诱导炎性反应发生、影响免疫应答等。本文将微生物的致癌促癌机制相关进展做简要总结,并展望以微生物作为早期肿瘤筛查的生物标志物和以微生物作为靶点研发药物的新思路。
抗血栓形成药物的研究进展
张杰, 麻旭州, 李慧慧, 王淼
2023, 43(1): 183-187. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0183
摘要
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血栓形成是动脉粥样硬化性心血管疾病患者急性表征(心肌梗死,卒中)的主要直接诱因。在全球范围内,血栓栓塞性疾病的发病率近年来有所增加,患者病死率也随之增加。目前,针对血栓栓塞性疾病,已经发展了几种靶向给药策略,其中包括抗血小板药物和抗凝血药物,随着抗血栓形成药物的研究进展,治疗血栓导致的心血管疾病为患者带来了巨大的潜在效益。
肠道菌群在神经病理性疼痛中作用的研究进展
吕彦函, 余卓颖, 李民
2023, 43(1): 188-191. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0188
摘要
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导致神经病理性疼痛(NP)的作用机制极其复杂。肠道菌群在诱发NP方面起着重要作用。肠道菌群及其代谢产物的改变可通过Toll 样受体(TLRs)促进免疫细胞和神经胶质细胞释放促炎因子,活化免疫系统及炎性反应,这可能是未来治疗NP的潜在靶点。
间充质干细胞外泌体治疗肺部疾病的研究进展
陈莉莉, 孙永红, 雷晓燕, 王建军, 陈星星, 鲍柏辛
2023, 43(1): 192-195. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0192
摘要
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间充质干细胞来源的外泌体(MSC-EXOs)携带着脂质、蛋白、核酸等信号物质,在细胞间通讯、免疫调节、血管再生中发挥着重大作用。MSC-EXOs在肺动脉高压、肺纤维化等肺部疾病中通过调控不同的信号通路、减少细胞炎性反应、调节免疫细胞功能、改善线粒体功能、促进血管生成、减轻肺血管重构等途径改善肺组织的功能,治疗肺部疾病,从而为今后难治性肺部疾病的治疗提供新思路。
二肽基肽酶Ⅲ在治疗脓毒症中的应用进展
王英臣, 孙立群
2023, 43(1): 196-199. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0196
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脓毒症仍为21世纪医学的重要挑战之一。二肽基肽酶Ⅲ(DPP3)是新发现的与脓毒症相关的生物标志物,在人体内主要降解血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ),它不仅可以抑制心脏的收缩功能,而且还能够降低血管张力,从而引起心输出量不足、血压降低,导致脓毒症患者发生休克和多器官功能损害。因此DPP3或将成为脓毒症治疗的新靶点。
医学教育
床旁加强可视喉镜气管插管培训在急诊困难气道插管教学中的作用
刘安雷, 李妍, 朱华栋, 刘继海, 李毅, 徐军, 杨惊
2023, 43(1): 200-203. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0200
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目的
探讨急诊抢救室床旁加强可视喉镜培训在困难气道插管教学中的作用。
方法
将84名急诊抢救室轮转医师随机分为模拟培训组和床旁加强培训组,每组42人。培训前后完成调查问卷,独立完成模拟可视喉镜气管插管和患者可视喉镜气管插管,收集培训满意度、插管意愿、插管成功率预期、插管尝试次数、插管成功率、插管总时间、困难气道评价、插管后评价(导管位置合格率、气囊压力合格率、不良反应发生率等)数据。
结果
模拟培训组与床旁加强培训组学员年龄、学历差异无统计学意义。床旁加强培训的学员培训满意度为(98.0±1.1)分,优于模拟培训组的(94.7±2.7)分 (
P
<0.01);床旁加强组培训后尝试困难插管意愿为(8.6±0.7)分,高于模拟培训组(6.6±1.3)分(
P
<0.01);床旁加强培训组预期插管成功率82.0%±5.6%,高于模拟培训组60.3%±11.3 %(
P
<0.01)。在插管过程评价方面,床旁加强培训组与模拟培训组比较,插管尝试次数更少[1.0±0.4
vs
2.0±0.7]、插管成功率更高[39(92.9)
vs
28(66.7)]、插管总时间更短[38.8±3.3
vs
50.5±5.6](均
P
<0.01)。在插管后评价方面,床旁加强培训组与模拟培训组比较,气囊压力合格率更高[41(97.6%)
vs
35(83.3%)]、导管位置合格率更高[41(97.6%)
vs
35(83.3%)]、插管不良反应:呛咳[1(2.4%)
vs
8(19.1%)]、咽喉损伤[0(0.0%)
vs
6(14.3%)] 更少(均
P
<0.05)。
结论
床旁加强可视化气管插管培训可提高急诊医师困难气道的处理信心和能力。
混合式教学模式在妇产科学本科学生巡诊教学中的探索
史精华, 李晓燕, 陈蓉, 罗敏
2023, 43(1): 204-206. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0204
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目的
探索小规模个性化在线课程(SPOC)联合翻转课堂(FCR)的混合教学模式在妇产科本科生巡诊教学的意义。
方法
以北京协和医学院妇产科实习生为研究对象,开展SPOC联合FCR的混合式教学。
结果
与传统教学模式相比,单纯线上教学学生成绩在笔试、面试及总成绩均明显降低。经过线上与线下相结合的混合式教学模式改革后,与单纯线上教学相比,混合式的教学模式组面试成绩显著提高。
结论
SPOC联合FCR的混合教学模式符合后疫情时代防控措施的需要,一定程度提高学生的学习成绩。
影像报告书写规范讲座在医学影像学住院医师规范化培训中的应用价值
车树楠, 叶枫, 张永明, 赵心明, 周纯武
2023, 43(1): 207-210. doi:
10.16352/j.issn.1001-6325.2023.01.0207
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目的
探讨影像报告书写规范讲座在医学影像学住院医师规范化培训中提高影像报告书写规范程度和报告质量上的价值。
方法
选取2020年9月至2021年9月期间进入医学影像学住院医师规范化培训基地进行轮转学习的医学影像学住院医师,根据是否接受影像报告规范讲座指导将其分为实验组和对照组,通过腾讯问卷评价两组住院医师影像报告书写规范掌握情况。
结果
在住培6个月后,住院医师自评结果显示实验组住院医师在报告格式规范、病变相关继发征象描述、报告结论、报告内容、报告规范总得分方面的提高均明显高于对照组(
P
<0.05);带教老师评价结果显示实验组报告规范及质量各项评价指标均优于对照组(
P
<0.05)。
结论
影像报告书写规范讲座的开展对于医学影像学住院医师影像报告书写规范的掌握、报告质量的提高有积极的作用。
刊名:基础医学与临床
ISSN 1001-6325
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2023-12-15
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2023-06-12
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2023-03-21
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2023-03-21
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2023-02-08
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2021-01-01
编辑部重要提醒(※)
2019-12-13
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2016-12-16
本刊声明:谨防假冒网站
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2011-12-19
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