基础医学与临床 ›› 2015, Vol. 35 ›› Issue (5): 596-602.

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槲皮素通过Akt-mTOR途径上调高糖培养RSC96细胞的自噬

屈岭1,梁晓春1,顾蓓2,张宏3,戴威4,石玥1   

  1. 1. 中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院
    2. 中国医学科学院基础医学研究所;北京协和医学院基础学院
    3. 中国医学科学院 北京协和医学院基础医学研究所
    4. 中国医学科学院基础医学研究所
  • 收稿日期:2015-01-28 修回日期:2015-03-12 出版日期:2015-05-05 发布日期:2015-04-28
  • 通讯作者: 屈岭 E-mail:quling@pumch.cn
  • 基金资助:
    衰老调控因子SIRT6与NF-κB对话在人参皂苷Rg1延缓造血干/祖细胞衰老中的作用;北京市自然科学基金;北京协和医院科研基金

Quercetin up-regulate autophagy in the RSC96 cells cultured in high glucose via the pathway of Akt-mTOR

  • Received:2015-01-28 Revised:2015-03-12 Online:2015-05-05 Published:2015-04-28
  • Contact: Ling QU E-mail:quling@pumch.cn

摘要: 目的 探讨槲皮素对高糖离体培养的RSC96细胞自噬变化规律的影响。方法 RSC96细胞培养于含有槲皮素的高糖培养基中,超微结构应用透射电子显微镜观察,用免疫荧光法、Western blot法检测Beclin1、LC3Ⅱ、磷酸化的Akt及磷酸化的mTOR蛋白表达,用实时荧光定量PCR法检测Beclin1-mRNA和LC3B-mRNA的转录。结果:高糖造成RSC96细胞Beclin1和LC3Ⅱ的表达下调,增加Akt和mTOR的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01),造成病理形态改变,减少自噬体数量。槲皮素能够上调Beclin1和LC3Ⅱ的表达,下调Akt和mTOR的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01),修复病理损伤,增加自噬体数量。结论 槲皮素通过下调Akt-mTOR途径磷酸化水平而增加高糖培养RSC96细胞的自噬。

关键词: 自噬, 槲皮素, RSC96, 高浓度葡萄糖

Abstract: Objective To observe the effect of the quercetin on autophagy of RSC96 cultured in high glucose.Methods RSC96 cells were cultured with high glucose or quercetin.Ultrastructure were performed using transmission electron microscopy. The expression of beclin1, LC3Ⅱ, phosphorylation of Akt (p-Akt), and phosphorylation of mTOR (p-mTOR) were detected by immunofluorescence and Western blot.Real-time fluorescent PCR analysis showed that the level of Beclin1-mRNA and LC3-mRNA Results Quercetin significantly alleviated the pathological morphology of RSC96 cells and up-regulated the Beclin1 and LC3-Ⅱexpressions(P<0.05,P<0.01), increased autophagosome, but down-regulated the p-Akt and p-mTOR expressions(P<0.05,P<0.01).Conclusions Quercetin up-regulated autophagy on the RSC96 cultured in high glucose by the pathway of Akt-mTOR.

Key words: autophagy, quercetin, RSC96, high glucose