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2010年 第30卷 第7期 刊出日期:2010-07-05
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研究论文
豚鼠胆汁酸盐输出泵(BSEP)基因克隆及其在胆结石豚鼠肝组织中的表达分析
黄名威 唐乾利 赫军 俞渊 王清坚 黄玮
2010, 30(7): 673-676.
摘要
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2054
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计量指标
目的:克隆并分析豚鼠BSEP基因全长cDNA序列,检测BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织中的表达。方法:采用3'、5'RACE方法扩增获得豚鼠肝组织BSEP基因全长cDNA,用生物信息学方法对其进行分析鉴定。实时荧光定量PCR检测BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织的表达。结果:豚鼠BSEP基因全长cDNA5579bp,共包含28个外显子,开放性阅读框(ORF)长为3963bp,编码蛋白长1320aa。该基因在胆结石豚鼠肝组织的表达较正常豚鼠显著下调(P<0.01)。结论:豚鼠BSEP基因在胆结石豚鼠肝组织中表达下调可能与结石形成有关。
胆固醇脂转移蛋白基因 TaqⅠB多态性与蒙古族原发性高血压的相关性
陶晓明 李国江 侯淑琴 萧占森 佟伟军 刘永跃 吴刚 张永红 邱长春
2010, 30(7): 677-682.
摘要
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1805
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计量指标
目的 分析胆固醇脂转移蛋白(CETP)基因TaqⅠB多态性与蒙古族人群原发性高血压(EH)的关系。方法 从内蒙古自治区通辽市蒙古族健康体检人群随机抽取1819例,其中高血压组(840例),正常血压组(979例)进行病例-对照研究。用多聚酶链式反应/限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及直接测序方法鉴定CETP基因的TaqⅠB多态性位点基因型。结果 TaqⅠB位点GG,GA,AA基因型和G/A等位基因频率分布在整个人群,男性组和女性组中均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。无论在整体人群还是按性别分组的亚群中,原发性高血压组CETP基因TaqⅠB位点GG,GA,AA基因型和G/A等位基因频率分布和对照组无差异。在男性组中,与携带CETP基因TaqⅠB位点GG基因型的个体相比,AA型个体的高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高,总胆固醇和甘油三酯水平显著降低(P<0.05)。结论 CETP基因TaqⅠB多态性不是原发性高血压的直接危险因素,但可影响血脂水平,可能间接参与原发性高血压的发生。
ApoB基因多态性与北京房山地区汉族人群脑卒中相关性分析
陈廓 肖占森 窦会东 侯淑琴 刘岳峰 陶晓明 李峰 邱长春
2010, 30(7): 683-688.
摘要
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计量指标
目的 探讨ApoB基因多态性与房山地区汉族人群脑卒中的关系。方法 采取横断面病例-对照相关分析方法。用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) 及直接测序技术检测ApoB基因第26外显子C7673T位点和第1外显子5′端信号肽区9bp插入/缺失的基因型。汉族脑卒中患者547例(脑栓塞446例,脑出血81例);正常对照者886例。结果 ApoB基因C7673T位点和5′端信号肽区插入/缺失位点基因型均符合Hardy-Weinberg 平衡定律, p值分别为0.6293和0.5359。ApoB基因C7673T位点的CC基因型和C等位基因频率在女性中栓塞组较对照组明显降(p<0.01),而与男性脑卒中无关。5′端信号肽区插入/缺失位点,II基因型频率在男性中脑出血组较对照组明显降低(p<0.01)。II基因型和I等位基因频率在男性中栓塞组较对照组明显降低(p<0.01);II基因型和I等位基因频率在女性中也有同样的趋势(p<0.01,p<0.05)。结论 ApoB基因C7673T位点多态性与汉族人群女性脑卒中相关,5′端信号肽区9bp插入/缺失多态性与汉族人群中脑卒中易感相关。
组蛋白乙酰化酶调控MSCs经5-azaC诱导后的细胞周期和增殖特性
周娜 朱静 田杰 张亚兰 邓兵 李娅莎
2010, 30(7): 689-697.
摘要
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2025
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计量指标
目的 阐述组蛋白乙酰化酶GCN5在间充质干细胞经5-氮杂胞苷诱导过程中的作用及其转录调控机制。方法 MTT法、流式细胞术检测细胞周期和细胞增殖;定量PCR检测P21基因表达;CHIP技术验证GCN5募集蛋白复合体与P21基因的相互作用及P21基因启动子区域的乙酰化水平;Co-IP技术分离、串联质谱技术鉴定GCN5募集蛋白复合体组成。结果 MSCs经5-azaC诱导3 d后G0/G1期细胞比例、P21基因表达量最高,此后逐渐降低,细胞增殖指数及G2/S期细胞比例与上述结果相反;筛选出GCN5募集蛋白复合体为:依赖ATP的染色质重塑复合体成分、转录起始复合体成分、转录因子和锌指结构蛋白;诱导组GCN5与P21基因启动子区域结合能力及P21基因启动子区域组蛋白H3乙酰化水平高于未诱导组。结论 GCN5募集蛋白复合体通过结合于P21基因启动子区域参与调控MSCs经5-azaC诱导体外分化过程中细胞周期G0/G1期和细胞增殖特性的调控。
雷帕霉素抑制人多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖及VEGF表达
刘春艳 梅长林 袁莉 张懿 付莉莉 蔡厚安 王雪琦
2010, 30(7): 698-702.
摘要
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计量指标
目的 探讨雷帕霉素对常染色体显性多囊肾病囊肿衬里上皮细胞增殖及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的抑制作用及其机制。方法MTT法检测WT9-12细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;Western Blot检测周期相关蛋白(cyclinD、p21)、凋亡相关蛋白(Bcl2/Bax)及VEGF表达。结果 雷帕霉素可抑制WT9-12细胞的增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期并促进细胞凋亡。雷帕霉素可下调WT9-12细胞cyclinD 、上调p21表达,下调Bcl2、上调Bax表达。原代培养的多囊肾囊肿衬里上皮细胞及WT9-12细胞的VEGFmRNA表达明显高于正常肾小管上皮细胞(P<0.05)。雷帕霉素可抑制WT9-12细胞VEGF的表达(P<0.05)。结论 雷帕霉素可通过抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖、促进凋亡及抑制VEGF表达抑制血管形成,从而抑制多囊肾病进展。
PDZK1和PDZK2结合特性的比较
李嫄 胡斯奇 马素参 邵晨 牟一 高友鹤
2010, 30(7): 703-707.
摘要
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计量指标
目的 比较同一种属同一家族两种相近的简单接头蛋白PDZ结构域结合配体特性。方法 采用酵母双杂交筛选新型随机多肽文库联合高效验证筛选特定PDZ配体库,分别鉴定PDZK1-PDZ1和PDZK2-PDZ1结合线性多肽序列,分析发现,两种PDZ结构域结合共有序列特性。通过生物信息学方法比对PDZ结构域确定结构域中与配体相互接触面位点,进而详细比较了这两个相似结构域结合特性的区别及其产生原因。结果 分别获得,PDZK1-PDZ1和PDZK2-PDZ1的结合特性,发现,两者的共有序列分别可以归纳为,-[S/T]-x-Φ和-[S/T]-[K/R/H]-[F/L],两个PDZ结构域间相互作用接触面位点大部分相似,主要差异表现在接触面位点比对中的37~45氨基酸序列,特别是42位氨基酸(F和H)差异较大。结论 成功鉴定PDZK1-PDZ1和PDZK2-PDZ1结构域的结合特性,发现了这两个PDZ结构域及其结合配体特性的差异。
PLC-β3与syntrophin蛋白的相互作用
黄艳 熊英 刘华 孙超渊 李洋 贺俊崎
2010, 30(7): 708-713.
摘要
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计量指标
目的 探索并鉴定PLC-β3与PDZ蛋白syntrophin的相互作用,为进一步研究PLC-β3在神经系统信号转导通路中所扮演的角色提供线索。方法 制备GST-PLC-β3-CT融合蛋白,利用GST pull down的方法,检测PLC-β3-CT与β2-syntrophin和γ2-syntrophin的PDZ结构域的相互作用。结果 构建重组质粒pGEX-PLC-β3-CT,在大肠杆菌BL21中成功表达融合蛋白后,利用GST pull down的方法证实了PLC-β3-CT可以与β2-syntrophin而不是γ2-syntrophin的PDZ结构域相互作用。结论 PLC-β3与β2-syntrophin的相互作用的研究结果,为研究完整的PLC-β3与β2-syntrophin的相互作用以及这种相互作用在神经系统信号网络中的功能提供了线索。
SIRT1上调大鼠血管平滑肌细胞p27Kip1的表达
鲁云彪 陈厚早 张冉 郑伟 李莉 张庆军 刘德培
2010, 30(7): 714-720.
摘要
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计量指标
目的 研究III类去乙酰化酶SIRT1在血管平滑肌中对p27Kip1表达的影响及其可能的机制。方法 用H2O2和oxLDL刺激大鼠平滑肌细胞A7r5,Western blot检测平滑肌细胞内源性SIRT1的表达变化;在动物血管损伤模型中,Western blot检测血管损伤处平滑肌的SIRT1表达水平。用SIRT1重组腺病毒感染A7r5细胞和原代大鼠平滑肌细胞,Western blot观察SIRT1过表达引起的p27表达的改变;用SIRT1抑制剂NAM处理平滑肌细胞并观察p27的表达改变;用免疫共沉淀技术探寻SIRT1上调p27基因表达可能的分子机制。 结果 在H2O2和oxLDL氧化应激刺激的A7r5细胞中,内源性SIRT1的表达随作用时间逐渐增加;动物血管损伤模型中,内源性SIRT1的表达明显上调;过表达SIRT1能够在10%血清刺激的早期上调p27表达,而SIRT1抑制剂NAM则能够减少p27表达;在原代平滑肌细胞中,腺病毒介导的SIRT1过表达同样能够显著上调p27的表达。在血管平滑肌细胞中检测到SIRT1能够与FOXO3a相互作用。结论 SIRT1在血管平滑肌细胞中上调p27的表达。
人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶
黄硕 余琳 汪洋 刘音 陈忠周
2010, 30(7): 721-725.
摘要
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计量指标
目的 探讨人PHF8蛋白的原核表达,纯化与结晶条件。方法 用分子克隆的方法构建重组质粒PHF8/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白。对融合蛋白进行分离纯化结晶,衍射分析,并用计算机软件解析其晶体结构。结果 经过诱导,含有PHF8/pet28b的Rosetta 2在原核表达系统中表达出了相对分子质量为40kd的c-PHF8融合蛋白,c-PHF8在合适的悬滴条件下得到六方柱晶体。结论 利用原核表达体系成功地表达了人PHF8催化活性中心结构域并获得结晶,为进一步的三维结构解析和PHF8功能研究奠定了基础。
利用原代培养神经元研究Netrin-4的受体定位
余科科 汪思应 周仁平 张成岗
2010, 30(7): 726-730.
摘要
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计量指标
目的 利用体外原代培养神经元,研究神经突起诱向因子Netrin-4的受体,分析Netrin-1已知受体DCC和UNC5H1作为Netrin-4受体的可能性。方法 改良Koh法培养出生12h内Wistar乳鼠神经元,免疫细胞化学鉴定纯度;以碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4为配体,以神经元及转染DCC和UNC5H1的COS7细胞为对象,亲和细胞化学法检测Netrin-4的受体;RT-PCR法分析神经元中Netrin-4、DCC和UNC5H1的表达。结果 成熟神经元胞核大、突起长,交织成网;以抗神经丝蛋白(NF)抗体行免疫细胞化学鉴定,纯度较高;转染DCC和UNC5H1的COS7能与AP4-Netrin-4结合,定位在细胞膜上。 结论 建立起稳定的原代神经元培养法,并研究神经突起诱向因子受体的定位。DCC和UNC5H1可能是Netrin-1与Netrin-4的共受体。
针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织基质金属蛋白酶、细胞间黏附分子表达的影响
徐虹 洪礼传 黄艳秋 陈素辉 孙华
2010, 30(7): 731-736.
摘要
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计量指标
目的 探讨针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤区组织基质金属蛋白酶(MMP-9)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法 以大脑中动脉栓塞法制备脑缺血再灌注模型,将大鼠随机分成电针、针刺、药物、针药结合、模型、假手术和空白等7组,每组分12、24、48、72、96和144h 6个时间点,H.E.染色检测损伤区组织形态学变化;免疫组化法检测MMP-9和ICAM-1积分吸光度值。结果 HE染色显示,梗死核心区病理损伤高峰时间出现在48h;72h后间质水肿减轻,大量小胶质细胞和胶原纤维增生,出现大量新生血管。免疫组化结果显示,MMP-9和ICAM-1在血管内皮细胞和炎症细胞及少数神经元广泛表达,缺血区明显高于自身对照区;组内比较显示表达呈48h和144h双峰形;组间比较显示,在48h、72h和96h电针组与其它实验组结果有显著差异。结论 电针可能通过上调损伤-修复网络功能,促进梗死区神经功能的恢复。
共表达EGFP和CXCR4的大鼠骨髓间充质干细胞的构建及其迁移能力
俞晓岚 张志坚 吴秀丽 黄志新
2010, 30(7): 737-742.
摘要
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计量指标
目的 构建携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)及CXCR4慢病毒载体并实现其在大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)中的表达,观察转CXCR4基因后对rMSCs迁移能力的影响。方法 RT-PCR扩增大鼠CXCR4编码区片段,将其插入慢病毒载体质粒PNL-IRES2-EGFP,获得的PNL-CXCR4-IRES2-EGFP与包装及包膜质粒用脂质体法共转染293T细胞,包装生产慢病毒。所获慢病毒转染rMSCs后,用RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光组织化学和流式细胞术检测转CXCR4基因rMSCs组、转空载体rMSCs组中CXCR4表达情况。利用Transwell方法检测两组rMSCs在SDF-1作用下的迁移能力。结果 双酶切和测序证实,PNL-CXCR4-IRES2- EGFP构建正确,转CXCR4基因rMSCs组CXCR4表达明显增多,在SDF-1α作用下迁移能力明显增强。结论 成功构建带有EGFP和大鼠CXCR4的慢病毒载体,并获得CXCR4-rMSCs基因工程细胞,为深入研究SDF/CXCR4轴在rMSCs向损伤组织定向迁移中的作用奠定了基础。
外周血内皮祖细胞的诱导培养
李伟麒 郑磊 王前 苏亚娟 蔡贞
2010, 30(7): 743-748.
摘要
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2349
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目的 探索外周血内皮祖细胞的诱导培养方法。方法 用密度梯度离心分离健康志愿者外周血单个核细胞,EGM-2培养基重悬并在纤连蛋白包被的培养板中进行诱导培养,动态观察贴壁细胞生长状况,免疫荧光技术鉴定内皮祖细胞特性,流式细胞术检测细胞周期分布及其相关表面标志CD34、CD133、CD31、VEGFR2和CD14。结果 贴壁细胞呈细长条状分布,整体形态和生长密度均以第9天最佳,约占外周血单个核细胞的4.62%~5.47%;细胞停留在G0/G1期,增殖指数仅为(1.20±0.18)%;细胞自第5天起即可同时吞噬乙酰化低密度脂蛋白和结合荆豆类凝集素,Ⅷ因子相关抗原于第9天始呈阳性;表面标志CD34、CD133、CD31、VEGFR2和CD14分别为0.19%±0.06%、1.67%±0.52%、61.56%±5.57%、70.29%±7.37%和89.31%±4.11%,共同指示诱导所得细胞属于正在分化的内皮祖细胞。结论 在特定条件下可直接从外周血单个核细胞中诱导培养出内皮祖细胞。
HCN4转染大鼠骨髓间充质干细胞重建起搏离子通道If
童敏 杨向军 韩莲花 李红霞 赵欣 周亚峰 蒋文平
2010, 30(7): 749-753.
摘要
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2001
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计量指标
目的 研究慢病毒载体介导超极化激活的环核苷酸门控通道基因4 (HCN4)转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)重建起搏离子通道的可行性。方法 全骨髓法分离大鼠股骨及胫骨的MSCs,流式细胞术鉴定rMSCs;四质粒表达系统构建包含目的基因HCN4的慢病毒载体lentiV-HCN4-GFP,对照组慢病毒载体为仅含有报告基因GFP 的慢病毒载体lentiV-GFP;慢病毒载体转染rMSCs;RT-PCR及荧光显微镜检测HCN4在rMSCs中的mRNA及蛋白表达;电压钳检测阳性转染细胞的起搏电流的特点。结果 HCN4基因转染MSCs的阳性率约60%;实验组RT-PCR产物出现480bp的目的条带;阳性转染细胞中可记录到明显的时间和电压依赖性的超极化激活内向电流(Ifunny, If),激活的阈电压为-80mV,该电流对低浓度CS+敏感;对照组未检测到相应的mRNA表达和超极化激活的电流。结论 慢病毒载体能够介导HCN4基因高效转染MSCs,表达为起搏离子流通道。
海南汉、黎族正常人群胆固醇酯转运蛋白基因的多态性
周代锋 蔡望伟 云美玲 张云霞 张勇 习隽丽 王镇
2010, 30(7): 754-758.
摘要
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1764
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计量指标
目的 了解海南汉、黎族正常人群CETP基因TaqIB、I405V、D442G、R451Q、A373P和I14A 6种多态位点频率的分布情况。方法 应用等位基因特异性PCR,分析海南汉、黎族正常人群CETP基因。结果 在海南汉、黎族正常人群中,TaqIB 、I405V和D442G多态位点可分别检测出B1B1、B1B2、B2B2 3种基因型,II、IV、VV 3种基因型和DD、DG 2种基因型,未检测到R451Q、A373P和I14A3种突变类型。I405V多态位点的基因型分布(P<0.0001)和等位基因频率(P<0.0001)在2组人群之间存在显著性差异,其余多态位点无统计学意义。结论 CETP基因TaqIB、I405V和D442G多态位点是海南汉、黎族正常人群中的常见突变位点,且I405V多态位点在2组人群之间存在明显的种族差异,R451Q、A373P和I14A 3种突变在海南汉、黎族人群中非常罕见。
北京市城乡中年人高血压流行情况及危险因素分析
胡泊 李卫 刘冰 陈涛 孙毅
2010, 30(7): 759-762.
摘要
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1889
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目的 对比研究北京城市和农村高血压的流行情况及其危险因素。方法 于2005年采用整群抽样的方法,在北京市城市和农村的40~65岁人群中对3268人中进行问卷和体检。诊断标准依据2005年中国高血压防治指南。多因素分析采用Logistic回归方法。结果 农村高血压的患病率为55.58%,显著高于城市的42.91%(P<0.05)。城市男性和女性高血压的患病率为49.54%和38.52%,显著低于农村男性和女性的57.68%和54.17% (P值均小于0.05)。不同性别多因素分析显示,年龄、BMI、腰围、空腹血糖、文化程度为男性的危险因素,年龄、BMI、腰围、职业、甘油三酯为女性的危险因素。结论 农村人群高血压患病率快速上升。主要危险因素有体质指数和腰围。
IL-10基因多态性与特应性皮炎的相关性
许银姬 佟金平 王惠娟
2010, 30(7): 763-766.
摘要
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2061
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目的 研究白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区域的单核苷酸多态性与特应性皮炎发生的相关性。方法 门诊特应性皮炎患儿174名和健康儿童130名,利用Taqman方法分析IL-10基因启动子区域 -1082(G/A), -819(C/T), -592(C/A) 单核苷酸多态性和单核苷酸组合成的单倍型和基因型。分析特定基因型保留和血液中嗜酸性粒细胞总数或血浆中IgE浓度之间的关联性。结果 健康组儿童ACC单倍型频率显著高于特应性皮炎儿童(p﹤0.05)。而血液中嗜酸性粒细胞总数和血浆中IgE浓度,ATA/ATA基因型的儿童显著高于ATA/ACC基因型儿童(p﹤0.05)。结论 IL-10基因启动子区域的单核苷酸多态性与特应性皮炎发生有关。
临床园地
成人过敏性紫癜性肾炎合并胃肠道表现的危险因素分析
房龙 高春 赵洪川
2010, 30(7): 767-770.
摘要
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目的 研究成人过敏性紫癜性肾炎合并胃肠道表现的危险因素。方法 对2004年1月至2009年5月在卫生部中日友好医院住院的118例成人过敏性紫癜性肾炎患者的人口统计学资料、临床表现、实验室检查、病理学结果及转归等指标进行回顾性分析。结果 118例患者中,52例(44.1%)有胃肠道表现,为病例组;其余66例无胃肠道表现,为对照组。病例组与对照组相比,表现出较高的关节受累(P<0.001),较高的中性粒细胞计数(P<0.05),较高的血小板计数(P<0.01),较低的白蛋白水平(P<0.05),较低的血钠(P<0.05)和较低的免疫球蛋白G水平(P<0.05)。非条件Logistic回归分析显示关节受累、中性粒细胞计数和免疫球蛋白G水平是3个独立的危险因素, OR值分别为5.010,1.248和0.999。结论 关节受累、较高的中性粒细胞计数和较低的IgG水平是成人过敏性紫癜性肾炎合并胃肠道表现的三个独立的危险因素。
研究短文
液基细胞技术在术前检测乳腺癌ER和PR中的应用
刘喜波 孙爱静 王宁 孙丽萍 陈丽荣
2010, 30(7): 771-772.
摘要
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酒精性肝病大鼠模型肝组织中硝化应激指标表达增强
周俊英 林琳 王玮
2010, 30(7): 773-774.
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短篇综述
心肌细胞凋亡信号传导通路与心肌损伤
戴日新 李浪
2010, 30(7): 775-777.
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在心肌损伤中,心肌细胞凋亡信号通路包括了依赖于CASPASE的信号途径和不依赖于CASPASE的信号途径,以及炎症、氧化及自噬等信号机制的交联和激活信号途径,心肌细胞的凋亡信号通路决定着心肌的生存与死亡,对心肌损伤的发生和发展及预后产生重要影响。
血管紧张素转化酶2作为心血管纤维化干预新靶点
吴玮 钟久昌 郭俊明
2010, 30(7): 778-781.
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血管紧张素转换酶2(ACE2)是人类ACE的第一个同源基因,为心血管纤维化的防治提供了新的作用靶点。本文就ACE2基因的生物学特性,ACE2与心血管纤维化调控以及心血管纤维化防治的最新进展作一综述。
雌激素与甲状腺癌的关系
张璐 刘跃武
2010, 30(7): 782-784.
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雌激素主要通过其特异受体作用于甲状腺癌细胞。雌激素可以通过其特异受体即雌激素受体(ER)结合雌激素反应因子,激活多种基因影响甲状腺癌细胞生长。以及雌激素通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径刺激甲状腺癌细胞生长。
刊名:基础医学与临床
ISSN 1001-6325
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新闻公告
《基础医学与临床》入选中国科协“2024年度科技期刊双语传播工程”
2024-12-26
本刊已被美国《化学文摘》(CA)收录
2024-03-01
本刊开通微信公众号服务平台
2023-12-15
热烈祝贺《基础医学与临床》被DOAJ数据库收录
2023-06-12
本刊已被EBSCO国际数据库收录
2023-03-21
本刊已被ICI Journals Master List国际数据库收录
2023-03-21
采编平台升级公告
2023-02-28
重要提醒:谨防骗子邮件(※)
2023-02-08
本刊自2020年起封面及网页改版公告
2021-01-01
编辑部重要提醒(※)
2019-12-13
网站服务器迁移公告
2019-10-17
本刊声明:谨防假冒email非法录用收费
2016-12-16
本刊声明:谨防假冒网站
2016-05-16
创刊30周年暨2011年编委会会议成功举行
2011-12-19
《基础医学与临床》被评为2006年中国科协精品科技期刊工程资助项目(C类)
2006-11-07
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