摘要: 目的 观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)内皮分化的影响及其机制。 方法 将可内皮分化的MSCs分为对照组(不加任何干预因素),Ox-LDL组(加入5μg/mL的ox-LDL),ox-LDL+乙酰半胱氨酸组(n-acetylcycteine,NAC)预处理后再加等浓度ox-LDL), nLD对照组(加入5μg/mL的天然低密度脂蛋白 (native LDL,nLDL) 。光镜下观察细胞形态,免疫组化、Western blot及RT-PCR技术检测特异性内皮表面标记,流式细胞技术检测分化效率,电子顺磁震荡技术检测氧化活性产物(reactive oxygen species,ROS),Western blot技术测定细胞信号通道蛋白Akt。结果 1) MSCs能够分化为内皮细胞,表现为内皮表面标志vWF、Flk-1和CD31的出现和血管样结构的形成; 2) Ox-LD明显减弱MSCs向内皮分化(P<0.05),而NAC预处理后MSCs内皮分化能力恢复;3) ox-LDL干预后ROS明显升高(P<0.05),而NAC预处理后ROS产量明显降低(P<0.05);4. ox-LDL干预后磷酸化Akt表达明显降低(P<0.01),而NAC预处理后有所恢复,但仍低于正常培养组。结论 ox-LDL抑制大鼠MSCs向内皮分化, NAC可部分或完全反转ox-LDL的抑制效应,Akt发挥一定作用。
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