基础医学与临床 ›› 2017, Vol. 37 ›› Issue (11): 1507-1512.
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翟康乐1,周俊雄1,李新新2,陈慧3,尹佳4,何维5,张建民3
摘要: 目的 制备用于检测血清中针对几种桃过敏原组分抗体的蛋白质芯片,为针对桃过敏原组分过敏患者的临床诊断提供快速可靠的方法。方法 合成6种常见的桃过敏原组分的编码基因,分别将其插入pGAPZ?A酵母表达载体,Avr II单酶切线性化后电转毕赤酵母SMD1168,表达纯化相应的桃过敏原组分蛋白,并制备蛋白质芯片;用蛋白芯片检测临床血清样本中针对桃过敏原组分蛋白的抗体,与ImmunoCAP法相比,验证蛋白质芯片检测的灵敏度和特异性。结果 用酵母表达系统成功表达并纯化了4种桃过敏原组分 Pru p 1,Pru p 3, Pru p 4和Pru p 7,制备了能进行质量控制的检测血清桃过敏原组分抗体的蛋白质芯片。检测了疑似桃过敏患者血清41例,结果以ImmunoCAP法为金标准,蛋白芯片检测血清Pru p 1 、Pru p 3和 Pru p 4抗体的灵敏度分别为40 %、100 %和100 %,特异性为78 %、50 % 和100 %;对上述3种组分抗体的综合检测灵敏度为86 %,特异性为96 %。针对缺乏ImmunoCAP检测结果的Pru p 7抗体,蛋白芯片检测出6份阳性的血清样本,均为桃过敏患者。结论 桃过敏原组分检测芯片在灵敏度和特异性方面与ImmunoCAP相当,血清用量少,优化后有望成为临床桃过敏检测的一种新方法。
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