摘要: 摘要:目的 探讨常用的可视化细胞标记技术--外源EGFP表达对肿瘤细胞生物学行为的影响。 方法 选择不同的携带EGFP的载体,利用脂质体转染或慢病毒感染技术,在不同肿瘤细胞系中强制表达外源EGFP,筛选稳定表达外源EGFP的细胞系,MTT法检测细胞体外增殖能力;细胞分析计数仪(CasyTT型)检测细胞大小的分布状况; Transwell体外迁移实验检测细胞体外侵袭能力。结果 成功建立了稳定表达外源EGFP的人结肠癌细胞系HCT116-GFP、HCT116-EGFP、COLO 320DM-EGFP和小鼠树突状细胞肉瘤细胞系DG6-EGFP。 外源EGFP表达后,HCT116-GFP细胞的增殖能力没有明显改变;而HCT116-EGFP细胞、COLO320DM-EGFP细胞和DG6-EGFP细胞的体外增殖能力明显降低。外源EGFP表达后,HCT116-EGFP细胞体积增大:平均直径分别为14.53 μm(HCT116)和18.28 μm(HCT116-EGFP);DG6-EGFP细胞体积无明显改变,平均直径分别为:16.43 μm(DG6)和16.58 μm(DG6-EGFP)。外源EGFP表达后,HCT116-EGFP细胞的体外侵袭能力明显降低,DG6-EGFP细胞体外侵袭能力无明显改变。结论 外源EGFP可视化标记细胞后,可能会影响肿瘤细胞的生物特性,利用这些模型进行科研时,需注意对相关指标的影响。
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