靶向SARS-CoV Spike中和抗体的检测

基础医学与临床 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (12): 1450-1455.

靶向SARS-CoV Spike中和抗体的检测

马萍¹,杨宁²,郎建设²,蒋澄宇³

1. 中国医学科学院基础医学研究所
2. 中国医学科学院基础医学研究所
3. 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

收稿日期:2012-09-11 修回日期:2012-10-19 出版日期:2012-12-05 发布日期:2012-11-28
通讯作者: 蒋澄宇 E-mail:chengyujiang@gmail.com

Targeting SARS-CoV spike neutralizing antibody test

Received:2012-09-11 Revised:2012-10-19 Online:2012-12-05 Published:2012-11-28
Contact: Cheng-yu JIANG E-mail:chengyujiang@gmail.com

摘要/Abstract

摘要： 目的建立靶向SARS-CoV Spike中和抗体的检测模型。方法构建优化的全基因SARS-CoV Spike质粒免疫小鼠产生S1190抗血清，与合成的结合受体ACE2的S318-510蛋白进行作用，通过荧光显微镜观察对SARS假病毒感染抑制作用的变化以确证中和抗体的高效性。结果SARS-CoV Spike质粒诱导产生的S蛋白全长抗血清不但可以有效中和SARS假病毒进入HEK293E/ACE2-Myc细胞， S318-510蛋白的预处理可以降低抗血清对SARS假病毒的进入抑制效应。结论受体结合部（RBD）的S318-510蛋白靶向SARS-CoV Spike中和抗体的检测模型得到有效的验证。可以作为直观迅速判断中和抗体是否高效的模型推广至不具备P3级别的实验室。

关键词: 关键词：SARS-CoV, 假病毒, 中和抗体

Abstract: Objective To establish target SARS-CoV spike neutralizing antibody test model. Methods Construction of optimal whole SARS-CoV spike gene plasmid to induce mouse neutralizing antibody. Pretreatment with S318-510 protein targeting ACE2 to observe the inhibition change of SARS-CoV S pseudoviruses infection process via fluorescence microscope. Results SARS-CoV S1190 Abs can not only neutralize SARS-CoV pseudovirus entry into HEK293E/ACE2-Myc cells but also pretreatment with S318-510 bypass neutralization of SARS-S entry by double check. Conclusions This test model confirmation of SARS-CoV RBD targeting SARS-CoV spike neutralizing antibody may provide and explore test model of lethal viruses in laboratory without biosafety level 3.

Key words: Key words: SARS-CoV, pseudo-virus, neutralizing antibody

中图分类号:

马萍杨宁郎建设蒋澄宇. 靶向SARS-CoV Spike中和抗体的检测[J]. 基础医学与临床, 2012, 32(12): 1450-1455.

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