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当期目录

    2013年 第33卷 第3期    刊出日期:2013-03-05
    宫颈腺癌和少见宫颈癌专题
    早期宫颈腺癌的预后分析
    金滢 蒋湘 李艳 黄惠芳 吴鸣 沈铿 潘凌亚
    2013, 33(3):  257-263. 
    摘要 ( 1282 )   PDF (1041KB) ( 762 )  
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    目的 探讨影响临床早期宫颈腺癌预后的相关因素,并分析不同辅助治疗方法对预后的影响。方法 回顾性分析自1995年11月至2012年2月间于北京协和医院治疗的118例FIGO Ia2期—IIa2期宫颈腺癌患者的临床资料,记录人口统计学信息、诊断及治疗信息,并记录随访及生存资料,采用SPSS11.5软件Cox回归分析进行肿瘤复发相关因素分析。结果 118例患者的中位年龄为41岁(19-74岁), 其中有102例(86.4%)初次治疗时采取了根治性子宫切除和/或双附件切除和/或盆腔腹主动脉旁淋巴结切除术。平均随诊29.8月(2-132月),19例患者在随访过程中肿瘤复发,7例患者死亡。与肿瘤复发相关的单因素分析显示患者年龄大(p=0.008)、期别晚(p=0.008)、肿瘤≥4cm(p=0.006)、淋巴结阳性(p=0.001)、宫颈有深肌层浸润(p=0.016)均是复发的高危因素,而淋巴血管间隙浸润及腺癌的病理类型与复发无明显相关性。多因素分析显示仅淋巴结转移是肿瘤复发的独立高危因素(p=0.006)。淋巴结阴性和阳性患者的5年无瘤生存率分别为79.1%和12.7%,5年总生存率分别为94.0%和40.0%。淋巴结转移与肿瘤≥4cm(P=0.018)、宫颈深肌层浸润(P=0.001)显著相关,而与年龄(P=0.746)、FIGO分期(P=0.155)、淋巴血管间隙浸润(P=0.802)不相关。对于高危患者,手术后辅助放化疗可延长患者无瘤生存期,但未达到统计学意义(p=0.201)。结论 宫颈腺癌预后较差,早期患者的独立预后因素是盆腔淋巴结转移,对于高危患者于根治性子宫切除术后进行辅助放化疗可能延缓肿瘤复发。
    宫颈透明细胞癌28例临床分析
    蒋湘 金滢 李艳 黄惠芳 吴鸣 沈铿 潘凌亚
    2013, 33(3):  264-269. 
    摘要 ( 1206 )   PDF (779KB) ( 757 )  
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    目的:探讨宫颈透明细胞癌的临床病理特点及预后影响因素。方法:回顾性分析1986年8月至2012年6月我院收治的原发性宫颈透明细胞癌患者28例,分析患者年龄分布、临床病理特点、预后及其影响因素。结果:患者平均年龄38.1岁(12~74岁),其中35.7%(10例)年龄小于30岁,35.7%(10例)尚未生育。均否认宫内乙烯雌酚暴露史。患者主要表现为不规则阴道出血、接触性阴道出血及阴道排液。55% CA125升高。Ⅰ期患者占53.8%,Ⅱ期32.1%,Ⅲ期7.1%,Ⅳ期3.8%。4例患者宫颈外观正常;5例为桶状宫颈;17(60.6%)例宫颈肿物为外生型。19例手术治疗患者术后病理7例有宫颈深肌层浸润,1例脉管累及,1例盆腔淋巴结阳性,5例累及子宫体,1例累及阴道。28例患者平均随访33.3月(2~128月),1例未控,2例复发,1例死亡,5年无瘤生存率74.6%。其中,Ⅰ至Ⅱa2期5年无瘤生存80.8%。3例行保留生育功能治疗,随访8、16、54月后未复发。结论:宫颈透明细胞癌的发病年龄较轻,内生型肿瘤多见,诊断时多数患者处于临床早期;早期患者具有较好的5年生存率,保留生育功能的手术治疗具有可行性。
    宫颈小细胞癌14例临床分析
    金滢 蒋湘 李艳 黄惠芳 吴鸣 沈铿 潘凌亚
    2013, 33(3):  270-274. 
    摘要 ( 1377 )   PDF (586KB) ( 960 )  
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    目的 分析宫颈小细胞癌的临床特点、治疗和预后影响因素。方法 回顾性分析自2006年4月至2012年3月间于北京协和医院治疗的14例宫颈小细胞癌患者的临床资料,记录人口统计学信息、诊断及治疗信息,并记录随访及生存资料。结果 14例患者的中位年龄为38岁(26-66岁), 其中13例患者为育龄期妇女,1例为绝经后。14例患者中FIGO分期Ib1期为5例,Ib2期3例,IIa2期1例,IIb期2例,IVb期3例。分期为Ib1—IIa2的9例患者及1例IIb期患者经先期化疗后,接受了根治性子宫切除术±双附件切除术+盆腔(和/或腹主动脉旁)淋巴结清扫术,1例IVb期患者行开腹全子宫切除术。所有患者均接受了以顺铂为主的化疗。4例Ib1—IIa2期的患者于子宫根治性手术后接受辅助盆腔放疗,1例IIb期及1例IVb期患者接受了根治性盆腔放疗。14例患者随访时间3—51个月。 Ib1—IIa2期的9例患者中,7例患者无瘤生存,2例分别于随诊10个月和9个月时发生肺转移。IIb期—IVb期的5例患者中,1例IIb期患者随访19个月时盆腔复发,另4例患者死亡,总生存期5—12个月。结论宫颈小细胞癌是一种恶性程度极高的神经内分泌癌,容易早期发生远处转移,预后极差,治疗应采用包括手术、放疗和化疗的综合治疗模式。
    妊娠合并宫颈浸润癌14例临床分析
    王巍 金滢 黄惠芳 沈铿 向阳 吴鸣 潘凌亚
    2013, 33(3):  275-280. 
    摘要 ( 870 )   PDF (652KB) ( 650 )  
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    目的 分析妊娠合并宫颈浸润癌患者的临床特点、治疗方案及母婴结局。方法 回顾性分析自2005年1月至2012年1月北京协和医院收治的妊娠合并宫颈浸润癌患者14例,总结其临床特点、治疗方案及生存情况。结果 14例患者中肿瘤诊断时早孕期4例(29%),中孕期7例(50%),晚孕期3例(21%)。所有早孕期(4/4,100%)及绝大部分中孕期(6/7,86%)患者一经诊断即放弃胎儿开始规范肿瘤治疗,1例中孕27周的ⅠB1期患者延迟治疗至孕37周行剖宫产,产后42天行宫颈锥切术;3例晚孕期患者中,1例延迟治疗3周至孕32周行剖宫产后开始肿瘤治疗,1例先期化疗1程后于孕34周剖宫产分娩后开始肿瘤治疗,1例孕33+6周的ⅡA2期患者行剖宫产分娩后直接放化疗。14例患者中2例失访,7例无瘤生存,5例复发死亡,中位无瘤生存时间为10个月(6-57),3年及5年无瘤生存率分别为70.1%及46.8%。分别计算不同孕期、肿瘤分化程度、肿瘤大小、肌层浸润深度患者5年无瘤生存率,Log-rank检验显示差异无统计学意义。本研究共分娩4例新生儿,3例存活。结论 本研究妊娠期宫颈癌的特点是虽然大部分有出血症状但仍诊断较晚,预后与国外研究相比差,应加强孕期宫颈细胞学筛查及阴道检查;采用个体化治疗方案,尝试了根治性宫颈切除、孕期NACT及延迟治疗等方法,获得了良好的母婴结局,但仍需提高早产儿的救治水平。
    研究论文
    截短ALT1蛋白的获得及其多克隆抗体的制备
    谌海兰 王鹏 黄美容 胥文春
    2013, 33(3):  281-285. 
    摘要 ( 787 )   PDF (720KB) ( 637 )  
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    目的 原核表达、纯化截短ALT1蛋白,制备ALT1多克隆抗体。方法 利用pCold TF载体原核表达系统,IPTG诱导,表达经生物信息学分析含有两个编码ALT1抗原表位的ALT1 N端1~115个氨基酸序列的基因片段,依次经镍(Ni)离子亲和柱纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、二次镍离子亲和柱纯化和分子筛柱层析得到不带标签的截短ALT1纯蛋白,用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果 经测序证实,成功构建了截短pCold TF-ALT1表达载体。获得纯度达90%的不带标签的截短ALT1重组蛋白,制备了效价达4.0×106的ALT1多克隆抗体,经western blot鉴定,能特异性地识别ALT1抗原和肝细胞裂解液。结论 成功获得高质量的截短ALT1无标签蛋白及其特异的多克隆抗体,为ALT1的免疫学检测试剂的研发提供了依据。
    泛素连接酶LNX1促进外源PBK的泛素化和降解
    王小蓉 郭正光 高友鹤
    2013, 33(3):  286-290. 
    摘要 ( 909 )   PDF (695KB) ( 705 )  
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    目的 研究LNX1对其相互作用蛋白PBK的泛素化和降解。方法 克隆、原核表达、纯化了一系列重组人LNX1截断体蛋白和LNX1全长蛋白;在体外泛素化体系中研究其对PBK的泛素化,哺乳动物细胞内研究其对外源PBK的泛素化和降解。结果 在体外泛素化体系中LNX1泛素化PBK,并研究了不同LNX1截断体对PBK泛素化的影响;发现在哺乳动物细胞内外源LNX1促进外源PBK的泛素化,进而导致其通过蛋白酶体降解。结论 研究发现了LNX1对外源PBK的泛素化和降解,为研究LNX1的生理功能提供了重要线索。
    α-突触核蛋白与Nurr1相互作用增强致小鼠小胶质细胞系肿瘤坏死因子α表达增多
    庄颖 鲁玲玲 赵春礼 段春礼 杨慧
    2013, 33(3):  291-296. 
    摘要 ( 936 )   PDF (1772KB) ( 745 )  
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    目的 在BV2细胞中,探讨?-突触核蛋白( ?-Syn)与Nurr1之间是否存在相互作用及其对肿瘤坏死因子?( TNF-?)分泌的影响。方法 用蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)和免疫组织化学染色观察?-Syn和Nurr1之间是否存在相互作用,用免疫组织化学和蛋白印迹观察Nurr1核转位,用酶联免疫技术(Elisa)检测TNF-?的释放量。结果 ?-Syn和Nurr1存在共定位,?-Syn和Nurr1可能存在相互作用。 过表达?-Syn时Nurr1的核转位减少,单独过表达?-syn使得TNF-?分泌增加;而同时过表达Nurr1可以明显抑制TNF-?产生。结论 ?-Syn可能通过与Nurr1相互作用从而减少其核转位,导致TNF-?产生增多,这可能是?-Syn介导胶质细胞活化引起炎症的机制之一。
    亚硒酸钠通过AMPK/mTOR通路调控白血病NB4细胞凋亡
    段婧 罗慧 史可鉴 杨洋 许彩民
    2013, 33(3):  297-302. 
    摘要 ( 1542 )   PDF (1080KB) ( 958 )  
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    目的 研究亚硒酸钠对白血病NB4细胞中AMPK及其下游靶蛋白对细胞凋亡的调控作用。方法 分别用亚硒酸钠、AICAR和AMPK干扰序列处理NB4细胞。用Western blot检测细胞AMPK、mTOR及其下游蛋白P70S6K的磷酸化水平及激活和干扰AMPK后AMPK、mTOR及P70S6K的磷酸化水平、流式细胞术检测NB4细胞凋亡率;免疫共沉淀法检测AMPK和mTOR的相互作用。结果 亚硒酸钠可以上调NB4细胞中AMPK的磷酸化水平,下调mTOR及P70S6K的磷酸化水平;AICAR和亚硒酸钠单独处理具有类似的促进NB4细胞凋亡的效果;干扰AMPK后,mTOR及P70S6K的磷酸化水平上升,亚硒酸钠对NB4细胞的促凋亡作用被拮抗;AMPK和mTOR有直接相互作用。结论 亚硒酸钠可通过激活AMPK表达,抑制mTOR及P70S6K,促进NB4细胞凋亡。
    NY-ESO-1特异性TCR转导人外周血淋巴细胞及相关检测
    郭佳 田洲 顾娜 徐珩 闾军
    2013, 33(3):  303-307. 
    摘要 ( 1818 )   PDF (923KB) ( 621 )  
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    目的:将具有肿瘤抗原NY-ESO-1特异性的T细胞受体(T Cell Receptor,TCR)转导至人外周血淋巴细胞(Peripheral Blood Lymphocytes,PBLs)中,提高转导后细胞表面特异性TCR表达效率,特异性增强转导后细胞识别肿瘤抗原及分泌IFN-γ的能力, 为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。方法:将实验室保存的NY-ESO-1特异性T细胞受体质粒(pCDNA3.1-ESO-TCR)体外电转入新分离的正常人PBLs中,RT-PCR法鉴定转导是否成功;通过流式细胞仪对转导后的PBLs细胞进行表型分析;用特异性NY-ESO-1b抗原肽 (p157-165) 刺激转导阳性的PBLs,ELISPOT法检测转导后PBLs细胞分泌IFN-γ的能力。结果:RT-PCR检测到电转后PBLs能够扩增出特异性TCR片段;流式检测结果显示电转pCDNA3.1-ESO-TCR质粒的PBLs细胞表面特异性TCR表达率高于未电转质粒的PBLs的表达率(P<0.05);经多肽刺激后,与未电转质粒的PBLs相比,电转质粒的PBLs分泌IFN-γ的斑点数明显增多(P<0.05)。结论:通过体外转导的方式提高NY-ESO-1特异性TCR 在PBLs表面的表达,能够特异性增强PBLs分泌IFN-γ的效率,为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。
    cPKCγ在HPC抗N2a细胞OGD损伤中作用及其分子机制
    罗宏 苏吉儿 韩松 李俊发
    2013, 33(3):  308-313. 
    摘要 ( 1204 )   PDF (1408KB) ( 1015 )  
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    目的 在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制。方法 建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、原位末端标记(TUNEL)和蛋白印迹(Western blot)几种方法,分别检测N2a细胞损伤、坏死、凋亡和自噬水平。 结果 OGD 2和4 h可使N2a细胞的生存率显著降低、死亡率明显增高(P<0.05, n=6);HPC(20 min)明显改善OGD 3 h对N2a细胞的损伤作用,而cPKCγ抑制剂Go6983(6 nmol/L)则显著解除HPC对OGD细胞的保护作用(P<0.05, n=16);OGD 3 h明显增加N2a细胞的凋亡数目(P<0.05, n=6),但HPC和Go6983+HPC均不能明显影响OGD细胞凋亡水平;OGD 3 h显著提高N2a细胞的自噬水平,Go6983和HPC+Go6983均可明显降低OGD细胞的自噬水平(P<0.05, n=6),而HPC则对OGD细胞的自噬水平无明显影响;HPC明显改善OGD 3 h致N2a细胞坏死的程度,而Go6983则可解除HPC的保护作用(P<0.05, n=16)。结论 在离体细胞水平证实了cPKCγ在HPC改善N2a细胞OGD 损伤中的作用,且这种作用主要与降低OGD细胞的坏死水平有关。
    与人遗传病相关的DNA重复序列的体外核小体定位特性
    柴荣 赵宏宇 蔡禄
    2013, 33(3):  314-319. 
    摘要 ( 830 )   PDF (931KB) ( 619 )  
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    目的 研究与人遗传病相关的DNA重复序列的体外核小体定位。方法 构建含有(GAA)42、(ATTCT)43、(GCCT)18和601序列的重组质粒,体外利用盐透析将质粒与组蛋白八聚体组装形成染色质结构,微球菌核酸酶消化后,用琼脂糖凝胶电泳分析染色质的结构。结果 含有ATTCT重复序列的质粒较含GAA重复序列质粒在体外易于形成核小体。结论 在重组质粒中,由于引入的重复序列片段形成核小体能力的不同会影响其局部染色质结构。
    当归多糖对小鼠衰老造血干细胞细胞周期蛋白的调控
    张先平 王乾兴 陈斌 刘俊 魏强 王建伟 王亚平
    2013, 33(3):  320-324. 
    摘要 ( 841 )   PDF (940KB) ( 926 )  
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    目的 观察当归多糖(ASP)对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨ASP调控HSC衰老的可能机制。 方法C57BL/6J小鼠随机分为对照组、衰老组、ASP干预对照组和ASP干预衰老组,衰老组采用X线全身均匀照射,建立小鼠HSC衰老模型;ASP干预衰老组在照射期间给予ASP灌胃;对照组和ASP干预对照组分别给予NS和ASP灌胃。免疫磁珠分离HSC,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色和混合集落培养(CFU-Mix)观察HSC生物学特性变化;流式细胞术分析细胞周期;Western blot检测 P16、P21、CDK2、CDK6、CyclinD及CyclinE表达。 结果 与对照组比较,X线能显著增加衰老对照组HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16、P21表达;降低CFU-Mix、S期比例及CDK6、CyclinD和CyclinE表达表达。与衰老组比较,ASP能显著抑制衰老HSC SA-β-Gal染色阳性率、G1期比例及P16和P21表达的增加; 抑制S期比例、CFU-Mix、CDK6、CyclinD及CyclinE表达的减少;而对CDK2表达无影响。结论 ASP可能通过调节P16、P21、CDK6、CyclinD及CyclinE表达延缓小鼠HSC衰老。
    HSD1蛋白在精子发生过程中的空间特异性表达
    宋伟 陈迎春 缪时英 王琳芳
    2013, 33(3):  325-329. 
    摘要 ( 939 )   PDF (1376KB) ( 621 )  
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    目的 研究HSD1蛋白在各级生精细胞中的空间特异性表达及其在细胞中的核质穿梭特性。方法 分离小鼠生精细胞,用免疫荧光法观察HSD1蛋白的内源定位。构建pEGFP-C1-HSD1融合表达质粒并转染CHO细胞,用激光共聚焦和电镜观察HSD1融合蛋白的定位及其核质分布情况。结果 HSD1蛋白在初级精母细胞和圆形精子细胞的胞质中表达;在成熟精子细胞中主要表达于顶体和尾部。HSD1蛋白在CHO细胞中存在3种分布形式:细胞核型、细胞质型和核质分布型。进一步研究发现该蛋白在细胞中呈动态分布,存在细胞核-质间的穿梭特性。结论 HSD1蛋白在生精细胞中呈空间特异性表达并且具有核质穿梭能力。
    等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型
    夏长胜 刘畅 孙媛媛 龙彦 赵晓涛
    2013, 33(3):  330-334. 
    摘要 ( 917 )   PDF (1047KB) ( 752 )  
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    目的 了解人群CYP2C19基因型的分布,评价等位基因特异荧光PCR法检测CYP2C19基因型。方法 等位基因特异荧光PCR法和金标准Sanger DNA直接测序法检测356名供者外周血CYP2C19基因型,实验采用同步盲法。结果 CYP2C19*1/*1型、CYP2C19*1/*2型、CYP2C19*2/*3型、CYP2C19*3/*3型、CYP2C19*2/*2型及CYP2C19*1/*3型的频率分布:使用PCR荧光法检测时分别为46.6%(166/356)、33.2%(118/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、10.7%(38/356)及6.7%(24/356);采用DNA测序法时分别为46.3%(165/356)、33.4%(119/356)、2.0%(7/356)、0.8%(3/356)、11.0%(39/356)及6.5%(23/356)。两种方法检测CYP2C19基因型具有一致性(P=0.392),且一致性较好(Kappa=0.987);两种方法基因型检测结果一致率为99.2%。结论 为保障医疗安全,临床需开展CYP2C19基因型检测;荧光PCR法检测CYP2C19基因型简便可靠。
    超声辅助酶切法用于溶液内蛋白质样品酶切特点分析
    成洁 邹丽莉 段进丹 孙伟
    2013, 33(3):  335-340. 
    摘要 ( 1147 )   PDF (813KB) ( 704 )  
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    目的 分析超声辅助酶切法对溶液内蛋白质样品酶切的特点。方法 分别应用超声辅助酶切法与传统酶切法对牛血清白蛋白进行溶液内酶切,通过飞行时间质谱进行分析,对数据库检索后得到的多肽进行比较分析。结果 超声辅助酶切法的酶切时间可缩短到10min,酶切后多肽的回收率比传统酶切法低8%,但飞行时间质谱鉴定评分(MASCOT评分)比传统方法高约1倍,肽段的覆盖率高10%,匹配的多肽数多40%以上。对超声辅助酶切法鉴定出的多肽进一步分析表明,这些多肽的误切率较传统方法高22%,比传统方法多鉴定出的多肽分子量主要在2~3ku之间,且大部分为含有误切位点的多肽。结论 超声辅助酶切可明显缩短蛋白质酶切时间,得到更好的多肽鉴定,但部分多肽酶切不完全,样品损失会更多。
    螺内脂降低大鼠心肌非梗死区MMP/TIMP基因转录及表达
    王全志 杨旸 陈惠军 杨廷桐
    2013, 33(3):  341-345. 
    摘要 ( 993 )   PDF (775KB) ( 620 )  
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    目的 观察螺内脂对大鼠心肌非梗死区组织中MMP/TIMP活性和基因表达的影响,为心肌梗死的防治提供理论依据和新思路。方法 建立大鼠药物干预的心肌梗死模型。用HE染色观察心肌梗死,用免疫组化及RT-PCR方法测定非梗死区心肌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2的活性及表达。结果 心梗后48h心肌梗死组非梗死区MMP-2、MMP-9和TIMP的表达明显升高,至第4周时仍维持在一个较高的水平(P<0.01)。螺内脂干预使MMP-2和MMP-9表达显著回降(P<0.01),而TIMP-2无明显下降。结论 螺内酯可以降低大鼠非梗死区组织MMP-2、MMP-9/TIMP-2的活性及转录和表达。
    CDKAL1基因rs4712523多态性与内蒙古地区汉族人群2型糖尿病相关
    李晓晶 苏燕 闫朝丽 顾丽 李彩萍 李爱珍
    2013, 33(3):  346-349. 
    摘要 ( 1091 )   PDF (578KB) ( 582 )  
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    目的 研究内蒙古地区汉族人群CDKAL1基因rs4712523单核苷酸多态性(SNP)的等位基因和基因型频率分布与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法 采用等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR),对382例内蒙古地区汉族人(其中T2DM组192例,对照组190例)rs4712523进行基因分型。结果 T2DM组中rs4712523的G等位基因频率和GG基因型频率分别为47.4%和6.3%,均显著高于对照组的35.3%和3.2%(P<0.05)。G等位基因携带者患T2DM的风险是A等位基因的1.654倍(OR=1.654,95%CI=1.237-2.212)。结论CDKAL1基因rs4712523多态性位点的G等位基因可能是内蒙古地区汉族人T2DM的易感基因之一。
    单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定
    刘红 刘宾 和骁 赵晓涛
    2013, 33(3):  350-355. 
    摘要 ( 883 )   PDF (1098KB) ( 573 )  
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    目的 原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1) 糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法 用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST?Bind 纯化试剂盒对gD MED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266~394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论 成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制奠定了基础。
    临床园地
    慢性播散型组织胞浆菌病2例
    韩潇 邹农 王澎 施举红 盛瑞媛
    2013, 33(3):  356-360. 
    摘要 ( 755 )   PDF (1495KB) ( 504 )  
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    目的 提高临床医生对慢性播散性组织胞浆菌病的认识和诊治水平,以便减少误诊,改善预后。方法 根据北京协和医院1980年~2012年诊断慢性组织胞浆菌病的2例临床和随诊资料,结合文献对该病的临床表现、组织病理学特点、诊断、治疗及预后进行分析。结果 2例患者均病程较长、首发症状缺乏特异性,多系统受累,无特殊疾病史。其中1例有消化道、肺和双肾上腺受累,另1例为肺和腹膜受累。早期均被误诊,确诊均依靠组织病理,抗真菌治疗效果好,未见复发。结论 慢性组织胞浆菌病少见且临床表现不特异,确诊依赖于典型的病理形态和特殊染色,积极治疗预后好。
    研究短文
    电离辐射对食管癌细胞系(ECA109和TE13)r-H2AX表达的影响
    史鸿云 祝淑钗 卢付河 王玉祥 何丽
    2013, 33(3):  361-362. 
    摘要 ( 1077 )   PDF (393KB) ( 710 )  
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    百合多糖抑制博来霉素致肺纤维化小鼠肺组织MMP-9及TIMP-2的表达
    骆亚莉 程小丽 王雅莉 李能莲 舍雅莉 李屹
    2013, 33(3):  363-364. 
    摘要 ( 705 )   PDF (770KB) ( 711 )  
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    卵巢癌ES-2、SK-OV3和JHOS-3细胞系TSLC1基因启动子区甲基化状态与表达
    刘金英 马薇 张煦
    2013, 33(3):  365-366. 
    摘要 ( 764 )   PDF (400KB) ( 545 )  
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    短篇综述
    TACC蛋白与肿瘤
    程杉 李天薇 贺俊崎
    2013, 33(3):  367-369. 
    摘要 ( 776 )   PDF (387KB) ( 648 )  
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    TACC蛋白家族的成员是中心体主轴的组成蛋白,被认为与多种肿瘤的形成相关。TACC蛋白可能通过调节染色体的稳定性,以及细胞内相关基因的转录,从而影响了肿瘤的形成。但是现有的研究尚不能阐明TACC蛋白在肿瘤中的确切作用。本文综述了近年来关于TACC蛋白与肿瘤关系的研究,并且着重介绍了TACC蛋白调控肿瘤形成的分子机制。
    TRPM家族对细胞钙/镁平衡调控的研究进展
    张厉 杨春喜 贺石生
    2013, 33(3):  370-373. 
    摘要 ( 1036 )   PDF (527KB) ( 933 )  
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    TRPM通道是TRP通道超家族的一员。包括TRPM1至TRPM8八个成员, 除TRPM4与TRPM5外,其余成员对Ca2+和Mg2+均具有一定通透性。其中TRPM1、TRPM2、TRPM3和TRPM8主要参与调控细胞Ca2+的平衡,而TRPM6和TRPM7是调控细胞Mg2+平衡的关键通道。TRPM家族成员分布广泛,调节机制各异,对于细胞钙/镁平衡等一系列生理功能具有重要调控作用。
    线粒体对iPSC再程序化的影响
    贺文凤 曹青 洪葵
    2013, 33(3):  374-377. 
    摘要 ( 622 )   PDF (592KB) ( 676 )  
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    iPS技术的出现为研究疾病的发病机制、药物筛选以及再生医学提供了新的途径。尽管iPS技术取得了迅速的发展,但对于iPS重编程过程目前仍不清楚。线粒体是细胞的多种生理过程的重要参与者,而其与iPS再程序化过程有什么联系,起到什么样的作用仍有待研究。
    水通道蛋白在胶质细胞的表达及其意义
    章杰 芦立轩 江华
    2013, 33(3):  378-381. 
    摘要 ( 945 )   PDF (530KB) ( 752 )  
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    20世纪80年代,美国学者Peter Agre发现质膜上存在一类介导水快速跨膜转运的膜蛋白,这类膜蛋白被称作水通道蛋白。已有大量研究发现胶质细胞表达的水通道蛋白对神经系统疾病的发生有重要作用。本文综述水通道蛋白在胶质细胞的表达定位及其意义,为中枢和周围神经系统疾病的诊断和治疗提供新的靶点。
    Crizotinib在ALK基因阳性非小细胞肺癌中的临床研究进展
    唐敏 武晓楠 程刚
    2013, 33(3):  382-386. 
    摘要 ( 147 )   PDF (635KB) ( 791 )  
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    Crizotinib是小分子ATP竞争性抑制剂,对间变性淋巴瘤激酶(ALK)和肝细胞生长因子受体(c-Met/HGFR)以及它们的致癌变异体有选择性抑制作用。在临床研究PROFILE 1001和PROFILE 1005中,ALK重排阳性NSCLC患者对crizotinib有效率达50%~60%,大多数不良反应为1~2度。Vysis ALK breakapart FISH probe kit为检测ALK重排的标准方法。ALK重排更易出现在不吸烟或少吸烟的肺腺癌患者中。crizotinib的耐药机制比较复杂。