ERK1/2 MAPK 通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制

基础医学与临床 ›› 2014, Vol. 34 ›› Issue (3): 345-349.

ERK1/2 MAPK 通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制

刘凤霞¹,牛淑亮²,李建勇²,郑树涛³,卢晓梅³,刘文亚³

1. 新疆医科大学基础医学院人体解剖学教研室
2. 新疆医科大学基础医学院
3. 新疆医科大学第一附属医院

收稿日期:2013-06-18 修回日期:2013-10-09 出版日期:2014-03-05 发布日期:2014-02-27
通讯作者: 刘凤霞 E-mail:liufengxia555@126.com
基金资助:
新疆自治区科技厅面上项目

The role and mechanism of ERK1/2 MPAK pathway in proliferation and migration of Eca109 cell line in vitro

Received:2013-06-18 Revised:2013-10-09 Online:2014-03-05 Published:2014-02-27
Contact: Feng-Xia LIU E-mail:liufengxia555@126.com

摘要/Abstract

摘要： 目的观察ERK1/2 MAPK通路在食管鳞状细胞癌（ESCC）Eca109细胞系增殖和迁移中的作用并探讨其作用机制。方法使用MAPK（ERK1/2）抑制剂U0126处理Eca109细胞；细胞计数检测细胞增殖；倒置显微镜下观察细胞形态；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ERK1/2 mRNA；Western blot检测总ERK1/2（t- ERK1/2）和磷酸化ERK1/2（p- ERK1/2）；MTT和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力；qRT-PCR检测MicroRNA-21（miR-21）。结果 20μmol/L浓度的U0126可抑制Eca109细胞生长（p<0.05），破话细胞正常形态，ERK1/2 MAPK通路的活化在蛋白质水平被抑制（p<0.05），Eca109细胞增殖和迁移明显减弱（p<0.05），显著下调miR-21的表达（p<0.05）。结论 ERK1/2 MAPK信号通路抑制可减弱Eca109细胞增殖和迁移，其可能的作用机制之一与其抑制miR-21表达有关。

关键词: 关键词： ERK1/2, Eca109细胞, 增殖, 迁移, MicroRNA-21

Abstract: Objective To investigate the role and mechanism of ERK1/2 MPAK pathway in regulating proliferation and migration of Eca109 cell line in vitro. Methods We treated Eca109 cells with MAPK（ERK1/2）inhibitor(U0126); cell counting method detected the cell proliferation; Cell morphology was observed under inverted microscope；qRT-PCR detected ERK1/2 mRNA level; Western blot determined the expression of ERK1/2 protein level; MTT and Wound scratch assay detected cell proliferation and migration; qRT-PCR examined miR-21 expression. Results Cell growth was inhibited by U0126 at 20μmol/L doses（p<0.05）, destroyed the normal cell morphology; inactivited ERK1/2 MPAK pathway at protein level（p<0.05）; inhibition of ERK1/2 MPAK pathway repressed cell proliferation and migration of Eca109 cells and downregulated the expression of miR-21（p<0.05）. Conclusion Inhibition of ERK1/2 MPAK pathway weakened cell proliferation and migration of Eca109 cells, one of the most possible mechanism is associated it’s inhibition role on miR-21 expression.

Key words: Key words: ERK1/2, Eca109 cell, proliferation, migration, MicroRNA-21

刘凤霞牛淑亮李建勇郑树涛卢晓梅刘文亚. ERK1/2 MAPK 通路在Eca109细胞体外增殖和迁移中的作用及其机制[J]. 基础医学与临床, 2014, 34(3): 345-349.

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