论著
王茹, 曾梦楠, 张贝贝, 张钦钦, 张宇涵, 冯卫生, 郑晓珂
目的 探究月见草对角叉菜胶诱导肺水肿模型大鼠的预防作用,为临床治疗肺水肿提供参考。方法 将50只SD大鼠随机分为正常组(CON)、模型组(FSZ,20 mg·kg-1)、地塞米松组(DEX,0.075 mg·kg-1·d-1)、低剂量月见草组(YJC-L,1.75 g·kg-1·d-1)以及高剂量月见草组(YJC-H,7 g·kg-1·d-1),每组10只,给药7 d后胸腔注射10 mg·mL-1角叉菜胶致炎建立肺水肿模型。致炎48 h后,计算肺含水量与湿干比;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肺泡灌洗液中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)、白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测肺组织细胞凋亡情况;流式细胞术检测肺组织细胞悬液活性氧(reactive oxygen species,ROS)以及巨噬细胞和中性粒细胞水平;酶活检测肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(total-superoxide dismutase,T-SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织中水通道蛋白1(aquaporin 1,AQP1)、水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素13(interleukin 13,IL-13)及白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)的mRNA表达水平;免疫组化检测AQP1的表达水平;Western blot检测肺组织中AQP1、AQP5、磷酸化核转录因子-κB(p-NF-κB p65)及核转录因子-κB(NF-κB p65)蛋白水平。结果 月见草显著降低肺水肿模型大鼠肺组织含水量和湿干比,改善肺组织病理变化;降低肺泡灌洗液中IgE、IL-4的水平及升高IFN-γ的水平,降低肺组织中TNF-α、IL-6、IL-13和升高IL-10的mRNA水平;降低肺组织细胞凋亡数目;抑制氧化应激反应;降低肺组织巨噬细胞和中性粒细胞的水平,降低p-NF-κB p65/ NF-κB p65的水平,升高AQP1和AQP5蛋白表达水平。结论 月见草可能通过发挥抗炎作用、抑制细胞凋亡、提高机体抗氧化功能及增强肺组织水液代谢来改善角叉菜胶诱导的肺水肿,其机制可能与介导核转录因子-κB(NF-κB)/AQPs信号通路有关。