茯苓[Poria cocos(Schw.) Wolf] 是具有利水渗湿、健脾和胃、宁心功效的传统大宗药食同源中药材,又为云南省道地药材之一,云南茯苓种植历史源远流长、品质优良,称“云苓”。其是2002年国家首批公布的86种既是食品又是药品的真菌类物质,以其独特的药用和食用价值,在医药、食品、保健品等领域均有较广泛应用。本文通过系统检索中国知网、PubMed数据库文献及相关专利数据,对茯苓活性成分、产业研究概况及专利研究现状等进行综述,重点分析茯苓在药食同源产品开发中的专利技术现状和创新方向。研究发现,茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide,PCP)、茯苓三萜(Poria cocos triterpenes, PCTs)等活性成分的相关专利主要集中在功能性食品开发和医药应用领域,但高附加值产品的专利布局仍存在广阔发展空间。本文旨在促进茯苓资源的高值化利用,提高茯苓产业核心竞争力,助力中药大健康产业的发展和健康中国的建设。

全球范围内中药材普遍存在以黄曲霉毒素等为代表的真菌污染,涉及《中国药典》收载的多个品种,对患者用药安全及中医药产业发展造成严重影响。与传统熏蒸、辐照等破坏性方法相比,微生物防治通过微生物吸附降解、竞争抑制和代谢产物拮抗等机制,展现出绿色环保、靶向性强且能保持药材活性的独特优势。笔者系统分析了中药真菌毒素污染的现状,对微生物防治方法在真菌毒素防治方面的研究进行总结展望,以期为中药质量控制和标准提升提供理论依据。

目的 探索全切片自动成像技术和荧光成像技术在中成药显微鉴别中的应用,建立壮腰健肾丸质量控制新方法。方法 首次将全切片成像技术与传统显微鉴别相结合,针对蜜丸剂型显微鉴别中的特点与难点,优化前处理和制片方法,分别对不同厂家的壮腰健肾丸的显微制片进行全自动扫描,获取其全视野图片。同时,利用荧光成像技术,对现行标准中规定的显微特征,进行拍摄记录,挖掘该技术在中成药显微鉴别中的优势。结果 得到的全视野图片质量较高,图片中的大部分结构清晰可见,具有鉴别意义。在荧光模式下,显微结构均有自发荧光反应,且不同的显微结构颜色差异性较大。结合专业人员经验判断,发现1批次样品未检出菟丝子。结论 建立了适用于蜜丸剂型的全切片自动成像及荧光成像方法,全面、简便、快速,可用于壮腰健肾丸的显微鉴别和质量控制。

目的 探讨蒙药四红汤缓解大鼠肾纤维化以及调节能量代谢途径恢复肾功能的机制。方法 使用茜草、紫草、枇杷叶、紫草茸四味药材熬制四红汤,通过给予雄性SD大鼠200 mg·kg^-1·d^-1的腺嘌呤建立肾纤维化模型,并分别给予低、高剂量四红汤进行干预,以氯沙坦为阳性药物。通过苏木精-伊红染色(hematoxylin and eosin staining, HE)和马松三色染色法(Masson)评估肾组织病理学变化,利用酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、血肌酐(serum creatinine, Scr)和肾组织乳酸浓度,化学发光法检测肾组织三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)检测肾组织纤维化标志物的表达,以及肉碱棕榈酰转移酶1(carnitine palmitoyltransferase 1, CPT1)表达。结果 与模型组相比,四红汤处理后的大鼠肾组织结构明显改善,肾小管和肾小球的病变程度有所减轻,胶原纤维沉积显著减少,明显下调BUN和Scr浓度。同时,四红汤显著下调α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(type Ⅰ collagen, Collagen Ⅰ)的表达,提高E-钙黏蛋白(epithelial-cadherin, E-cadherin)的表达。此外,四红汤显著提高了肾组织中的ATP水平,降低了乳酸水平,并上调了CPT1的表达。结论 四红汤可有效缓解大鼠肾纤维化,同时增强肾脏脂肪酸β-氧化能力,优化能量代谢途径,促进损伤恢复。

目的 探究N-哌嗪氧化吲哚衍生物2G(简称2G)对胃癌细胞的增殖抑制作用及作用机制。方法 以胃癌HGC-27、AGS、MKN-45细胞和人正常胃黏膜上皮细胞GES-1作为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)法检测化合物对细胞增殖的影响;不同化合物作用HGC-27细胞后,使用活性氧(ROS)、线粒体和溶酶体探针分别检测细胞ROS、线粒体膜电位(MMP)、线粒体损伤以及线粒体和溶酶体的共定位情况;Western blot检测线粒体自噬相关通路蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ和泛素结合蛋白P62(P62)的表达。结果 与顺铂(DDP)相比,2G对胃癌HGC-27、AGS和MKN-45细胞具有更低的半数致死浓度(IC₅₀) (P<0.01)。此外,2G在AGS和MKN-45细胞上的选择性指数(SI)高于DDP(P<0.01),在HGC-27细胞上的SI与DDP无明显差异(P>0.05)。2G能够明显增加细胞ROS,降低MMP,线粒体受损且线粒体与溶酶体发生共定位。Western blot结果显示,2G明显降低 P62的表达(P<0.05),增加LC3 Ⅱ/Ⅰ比值(P<0.01)。同时,自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合2G后,可明显逆转2G对P62的下调及LC3 Ⅱ/Ⅰ比值的上调作用,降低其对胃癌HGC-27细胞的增殖抑制作用。结论 2G能够明显抑制胃癌细胞的增殖,其作用机制可能是通过损伤线粒体,下调自噬相关蛋白P62,增加LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白的比值,进而促进胃癌细胞发生线粒体自噬所致。

目的 探究地黄水提物对低氧诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)小鼠的干预作用。方法 将60只小鼠随机分为正常组、模型组、波生坦组以及地黄低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组均在10%的低氧环境中持续造模35 d,并于第21天开始给药。检测各组小鼠心功能(右心室压力、右心肥大指数、右心室与左心室的面积比),肺功能(呼吸频率、潮气量、每分钟通气量、最大吸气流速、最大呼气流速、50%潮气量时呼气流速、肺动脉血流速度、肺动脉血流加速时间与右心室射血时间比值),肺组织病理变化(苏木精-伊红染色、马松染色)氧化应激水平(丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和活性氧)、凋亡和免疫细胞的水平(巨噬细胞、中性粒细胞、Treg细胞),以评价不同剂量地黄水提物对PH小鼠的干预作用。蛋白质印迹法(WB)、免疫荧光检测各组小鼠肺组织中磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达水平。结果 地黄水提物可显著改善PH小鼠的心功能与肺功能,降低PH小鼠体内氧化应激、凋亡水平,调节免疫细胞水平,降低p-ERK和HIF-1α蛋白表达水平。结论 地黄水提物通过ERK/HIF-1α改善低氧诱导PH小鼠的心肺损伤。

目的 研究鲜百合地黄汤治疗焦虑症的作用机制。方法 通过超高效液相色谱四极杆-飞行时间质谱联用仪(UHPLC-Q-TOF/MS)和网络药理学相结合筛选鲜百合地黄汤的化学成分及抗焦虑作用靶点,构建蛋白质相互作用网络和“候选成分-作用靶点”网络;建立京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析和基因本体(gene ontology,GO)分析。采用连续4周慢性束缚(CRS)构建小鼠焦虑症模型,通过行为学检测各组小鼠焦虑样行为,酶联免疫吸附剂实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清炎症因子水平,免疫印迹及免疫荧光检测小鼠海马组织神经细胞凋亡,小胶质细胞转化标志物和EGFR信号轴相关蛋白。结果 获得鲜百合地黄汤 29个化学成分,治疗焦虑症的候选靶点69个包括蛋白激酶B(serine/threonine kinase,AKT)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)等。KEGG通路141条包含EGFR信号通路等。药理实验结果发现,小鼠焦虑症模型制备成功,鲜百合地黄汤可改善模型小鼠焦虑样行为;降低模型小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6水平;促进模型小鼠海马神经核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2蛋白(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、分化簇206(cluster of differentiation 206,CD206)蛋白表达,抑制Bcl-2相关X蛋白(bcl-2 associated X,Bax)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、离子钙接头蛋白分子1(ionized calcium binding adapter 1,Iba-1)蛋白表达。结论 结果提示,鲜百合地黄汤抗焦虑样行为的作用可能与激活EGFR信号轴,调节小胶质细胞表型转化,抑制海马神经元凋亡相关。

目的 通过分析不同厂家硝酸益康唑乳膏的原料及制剂的杂质谱对其处方进行比较,以确定生产、贮存过程中的关键工艺条件,为硝酸益康唑乳膏的质量评价提供支持。方法 采用柱切换液质联用方法对不同厂家硝酸益康唑原料及制剂进行杂质谱分析,结合降解实验确定杂质来源。结果 不同厂家硝酸益康唑原料及制剂中共检出10种杂质,包括3种辅料杂质、3种工艺杂质以及4种降解杂质。结论 硝酸益康唑乳膏中杂质来源复杂,原料制备工艺、制剂处方、内包装、生产环境控制均会影响产品质量,企业应在保证原料质量的基础上,注意避光操作以及生产过程中氧化条件的控制,以避免降解杂质的产生。

目的 采用微流成像颗粒分析技术(micro-flow imaging,MFI)测定在单克隆抗体注射液(简称单抗)中的不溶性微粒,探究不同工艺的单抗在不同储存条件下,不溶性微粒的粒径分布和硅油颗粒主要动态变化,提供更全面的微粒表征,为企业提升单抗药物稳定性和安全性提供参考。方法 取企业A和B的单抗产品改变其储存条件,如开封后在4 ℃下静置、在常温下震荡,将其与不作处理的对照组分别用MFI检测其中的不溶性微粒,提取微粒的图像、粒径和计数等信息用于比较。结果 比较开封4 ℃下静置和常温下振荡A和B企业单抗产品后的不溶性微粒总数和浓度,结果无统计学意义(P > 0. 05),4 ℃静置导致B企业单抗不溶性微粒的平均径粒大小分布变大,1.5~2.0 μm(t=-4.26,P=0.02)的硅油粒子含量升高;振荡导致B单抗不溶性微粒≤1 μm(t=5.45,P＜0.001)的粒子明显减少,1~10 μm(t=-5.43,P＜0.001)之间的微粒增加,以及硅油含量升高,说明不同企业的单抗对于不同储存条件的敏感度不同。结论 本研究将 MFI应用于单克隆抗体注射液不溶性微粒的检测,为探讨生化蛋白药物的不溶性微粒来源提供新思路。相较于传统光阻法或显微镜计数,本研究首次将MFI技术深度应用于解析单抗制剂中蛋白质-硅油复合物的形成机制,为微粒来源的追溯提供了直接可视化证据。在储存条件改变的情况下,B企业单抗的不溶性微粒径粒分布和硅油含量变化较明显,提示该企业可优化产品、关注内包材的材料选择以提升产品的安全性和稳定性;结合图像推测平均径粒分布变大的部分原因是由于蛋白质-硅油复合物的形成,但硅油具体的产生原因仍需进一步探究。

目的 建立一种超临界流体色谱法(SFC)分离分析磷酸西格列汀中的(S)-对映异构体杂质。方法 采用硅胶表面涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(Chiralcel OD,4.6 mm×250 mm,10 μm)色谱柱,以超临界二氧化碳-0.2%三氟乙酸-含0.2%二乙胺的甲醇(90∶10)为流动相,柱温为35 ℃,背压为18.62 MPa,进样量6 μL,流速1.5 mL·min^-1,于205 nm波长处分离测定磷酸西格列汀及其(S)-对映异构体。结果 (S)-对映异构体与磷酸西格列汀在15 min内依次出峰,分离度为3.2;两者均在0.009~0.200 mg·mL^-1内质量浓度与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0. 999 8和0.999 9,磷酸西格列汀与(S)-对映异构体线性方程斜率比值为1.0。采用峰面积归一化法和主成分自身对照法可以用于(S)-对映异构体的定量测定。磷酸西格列汀及其(S)-对映异构体的定量限均为9 μg·mL^-1(S/N≥10),检测限均为3 μg·mL^-1(S/N≥3)。结论 超临界流体色谱法相比常规正相色谱方法,平衡时间短,分离效率高,不使用烷烃类有机溶剂,绿色环保,本研究建立的SFC分析方法能够为磷酸西格列汀及其(S)-对映异构体的分离测定和质量控制提供参考。

目的 系统比较不同指南中左乙拉西坦(levetiracetam, LEV)的推荐意见,为临床合理用药提供参考。方法 本研究通过检索中国知网、万方及MEDLINE等数据库和英国国家卫生与临床优化研究所等常见指南发布组织,纳入不同国家(地区)及组织发表的指南,分析各指南关于LEV在癫痫领域用药方面的差异。结果 LEV在各指南中均推荐用于局灶性发作、全面性发作、新生儿惊厥、癫痫持续状态及多种癫痫综合征,但各指南推荐的一线、二线或添加治疗用药建议有所差别。结论 本研究对各个国家和地区发表的指南进行系统的整理,有利于临床医务工作者更好地使用指南,为LEV的临床应用提供参考。

目的 全景式探析数字孪生赋能儿童药物创新发展路径,揭示数字孪生风险挑战并提出精准治理方案,纾解儿童药物临床用药困境。方法 通过文献研究法、数据分析法和案例分析法归纳我国儿童药物创新发展困境,探索应用数字孪生技术促进儿童药物创新的破局思路。结果 数字孪生技术在儿童药物研发立项、药物设计、临床试验、智能制造、老药新用、个性化精准用药、药物警戒等多个环节能够发挥出强大的赋能作用。结论 建议应用数字孪生技术实现儿童药物创新发展,精准治理数字孪生技术风险,大力促进儿童药物产业全链条创新发展,推进儿童医疗卫生服务高质量发展。

讨中国-东盟中药(传统药)监管协调机制。方法 基于监管依赖框架,从规则依赖、路径依赖、质量依赖、资源依赖、市场依赖5个维度进行分析。结果 中国与东盟各国在中药(传统药)监管上存在依赖性,为监管协调提供了理论基础。结论 国际化是中外规则的双向融合与协调,主动借鉴东盟国家关于中药(传统药)的监管经验,也将中国方案纳入全球治理框架,为推动我国中药(传统药)产业“走出去”奠定基础。