卵巢癌是一种女性死亡率较高的恶性肿瘤。多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂[poly (ADP-ribose) polymerase inhibitors, PARPi]作为维持治疗的主要手段之一,可显著提高患者的生存率,然而随着PARPi的广泛使用,PARPi耐药成为治疗过程中亟待解决的问题。目前研究发现肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)的代谢重编程可能通过多种机制影响卵巢癌化疗耐药,但TME中脂代谢重编程是否参与了PARPi耐药的形成尚不明确。本文旨在探讨近年来卵巢癌TME中脂代谢对PARPi耐药的影响,并分析其与PARPi耐药之间可能存在的联系,以期为进一步理解PARPi耐药形成机制和寻找新的治疗靶点提供新视角。

长效注射剂在治疗慢性疾病方面具有优势,本文对体外评价研究、体内评价研究的相关方法和影响因素进行了梳理,总结了体外释放行为与体内药动学过程的联立和数学建模,综述长效注射剂体内外相关性(in vitro-in vivo correlation,IVIVC)的分类、实验方法、建立步骤和模型评价方法。由于长效注射剂的多样性,IVIVC研究中不存在通用的体外模型,因此IVIVC研究只能进行逐例建模。综合药物理化性质、剂型设计和药物制剂与给药部位的相互作用对建立长效注射剂IVIVC研究十分重要。

目的 研究白耙齿菌(Irpex lacteus)的次级代谢产物及其降脂活性。方法 运用硅胶柱色谱及制备液相色谱Pre-HPLC等多种色谱分离方法对白耙齿菌的次级代谢产物进行分离纯化,结合核磁共振波谱、高分辨质谱、红外光谱、紫外光谱等谱学技术对分离所得的单体化合物进行结构鉴定。 建立高脂HepG2细胞模型进行降脂活性测试。结果 从白耙齿菌中分离并鉴定了12个化合物,分别为(2α,4β,5β,7β,10α)-2,5,11-eudesmanetriol(1)、11, 12-epoxy-5, 6-secotremula-1,6 (13) -dien-5,12-olide(2)、8α,10α-di-O-acetyl-lactarorufin A(3)、(+)-(2S,3R,6S,7S)-tremul-1(10)-ene-2,12-diol(4)、conocenolide A(5)、irpexolactin G(6)、2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(7)、4′-hydroxy-5,7-dimethoxy-6-(3-methyl-2-butenyl)- isoflavone(8)、环(异亮-缬)二肽(9)、环(L-脯-L-亮)二肽(10)、环(亮-异亮)二肽(11)和环(亮-亮)二肽(12)。降脂活性结果显示,化合物1~4、8、9均具有降脂活性,其中化合物1、4的各剂量组及化合物2、3、8的高、中剂量组对甘油三酯(TG)含量的降低效果均优于阳性药组。结论 化合物1~4,7~12为首次从该菌中分离得到。化合物1~4、8和9均具有较好的降脂效果。

目的 为保证二仙汤(Erxian Decoction, EXD)传统汤剂和醇提工艺的质量一致性,采用基准关联度和层次分析法(AHP)-熵权法确定权重系数,以Box-Behnken响应面法优选EXD醇提工艺,为现代制剂研究奠定基础。方法 以黄柏碱、芒果苷、阿魏酸、小檗碱、仙茅苷、朝藿定A1,朝藿定A,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷含量、出膏率、指纹图谱相似度作为关键质量因素,以乙醇体积分数、料液比、提取时间为关键工艺参数,结合Box-Behnken响应面法得到最佳提取工艺并验证。结果 确定EXD醇提工艺的最佳条件为乙醇体积分数75%,料液比1∶14(g∶mL),提取时间62 min。验证实验结果表明,综合评分均值86.64,相对标准差(RSD)为1.02%。结论 基准关联度结合AHP-熵权法优化EXD进行醇提工艺,所拟合的模型显著,与基准汤剂质量一致度高,为后期剂型更改提供参考。

目的 建立祁紫菀超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对共有峰进行成分鉴定,测定各批次祁紫菀抗氧化活性,并探讨祁紫菀的化学成分与抗氧化活性的谱效关系。方法 采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制22批祁紫菀药材的指纹图谱并进行相似度评价,标定共有峰。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除率为抗氧化指标,考察祁紫菀的抗氧化活性。采用灰色关联度和偏最小二乘回归分析祁紫菀化学成分与抗氧化活性的谱效关系。结果 建立了22批不同批次祁紫菀药材的指纹图谱,其相似度为0.892~0.995。聚类分析可将祁紫菀母根、纯根和根茎区分开。利用对照品对比和UPLC-MS解析指认出17个共有峰。通过DPPH自由基和ABTS自由基清除实验发现,22批祁紫菀均有抗氧化能力,灰色关联分析表明,紫菀酮的关联度最高。结合偏最小二乘回归分析,初步证实芦丁、阿魏酸、异绿原酸A、astin A、槲皮素、紫苏烯和紫菀酮是祁紫菀发挥抗氧化活性的主要成分。结论 本实验成功建立了祁紫菀的指纹图谱及其抗氧化活性谱效关系,可为祁紫菀的药效物质基础研究与质量控制提供参考。

目的 研究珊瑚菜素在预防乳腺癌转移中的作用及机制。方法 通过CCK-8法、流式细胞术分析细胞周期和凋亡检测珊瑚菜素的细胞毒性,免疫荧光法检测珊瑚菜素对肿瘤细胞和血管内皮细胞之间黏附的影响,流式细胞术检测人静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)表面黏附分子表达的影响,Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测珊瑚菜素对肿瘤细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控蛋白表达的影响,小鼠肿瘤转移模型评估珊瑚菜素对小鼠乳腺癌肺转移的抑制作用。结果 珊瑚菜素具有较低的细胞毒性,且在几乎无细胞毒性浓度下能够通过降低炎症因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)诱导的HUVECs细胞表面血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,CAM-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和E-选择素(E-selectin)的表达;抑制肿瘤细胞在HUVECs上的黏附;抑制EMT转化相关调控因子及肿瘤细胞转移促进蛋白三联体基序蛋白22(tripartite motif protein 22,TRIM22)、血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,THBS1)和蛋白酪氨酸激酶KIT配体(KIT ligand,KITLG)的表达。小鼠肿瘤转移模型证明珊瑚菜素能够显著抑制乳腺癌肺转移,并激活小鼠外周血中抗肿瘤免疫细胞(细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞)的活性。结论 珊瑚菜素展现出较好的预防乳腺癌转移作用,具有进一步开发应用价值。

目的 观察硼替佐米相关周围神经病变(bortezomib-induced peripheral neuropathy,BiPN)常见中医证型分布规律及科室协定方归草败毒饮联合硼替佐米+地塞米松(PD)治疗BiPN患者的疗效,并初步研究其可能机制。方法 回顾性分析17名BiPN骨髓瘤患者临床资料,这些患者在2019年1月至2023年12月接受硼替佐米为基础的方案治疗后出现不同程度的周围神经病变。拟定症状积分量表以客观化BiPN辨证分型。采用美国国家癌症研究所共同毒性标准不良事件(National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events,NCI-CTCAE)对周围神经病变进行分级,口服归草败毒饮治疗。所有入组患者均治疗1个疗程,通过观察NCI-CTCAE分级、肿瘤治疗功能评估/妇科肿瘤组神经毒性亚量表(functional assessment of cancer therapy/gynecologic oncology group-neurotoxicity,FACT/GOG-Ntx)评分、视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分,检测患者神经电生理来评估疗效。随后,结合质谱分析与网络药理学方法预测归草败毒饮干预BiPN的潜在作用成分与靶点,应用基因本体论(gene ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析探索其作用机制,并通过分子对接技术验证了归草败毒饮成分与靶点之间的结合活性。最后,应用神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导的PC12细胞建立BiPN细胞模型,通过检测细胞活力、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、神经突长度、细胞凋亡水平、线粒体数量、线粒体膜电位、凋亡蛋白表达及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)相关X蛋白(BCL2 associated X protein,BAX)的线粒体转位明确归草败毒饮的治疗机制。结果 BiPN患者辨证分型以气血两虚、阳虚寒凝、瘀血内阻为主。归草败毒饮可以有效缓解BiPN,降低周围神经病变(peripheral neuropathy,PN)分级、提高FACT评分、降低VAS评分(P<0.01或P<0.05)。网络药理学分析获得归草败毒饮干预BiPN的3 541个潜在靶点,其中BAX、肿瘤蛋白P53(tumor protein P53,P53)、BCL-2、胱天蛋白酶3(caspase-3,CASP3)等凋亡蛋白为核心靶点。GO和KEGG通路富集提示线粒体凋亡是归草败毒饮干预BiPN的重要作用途径。分子对接验证了归草败毒饮多种单体与线粒体凋亡蛋白BAX、BCL-2、CASP3等具有良好的对接活性。细胞实验表明,归草败毒饮可以改善硼替佐米诱导的PC12细胞模型的活力下降,降低ROS,抑制细胞凋亡,促进PC12细胞神经突生长,并增加线粒体的数量、改善线粒体膜电位及凋亡相关蛋白水平,减少BAX线粒体易位。结论 本研究初步探究了BiPN患者中医辨证分型,揭示了归草败毒饮抑制线粒体凋亡改善BiPN的作用机制,为临床减轻化疗毒副作用提供了新的思路。

目的 本研究旨在建立并表征来源于患者的结直肠癌类器官模型,并通过该模型进行化疗药物敏感性检测,以评估其在预测患者化疗反应中的潜在价值。方法 从接受结直肠癌根治术的3例患者手术标本中获取肿瘤组织,通过机械和酶解处理分离肿瘤细胞,将细胞悬液与基质胶混合后接种于三维培养系统中。类器官的组织病理学特征通过苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学分析进行验证,其遗传一致性则通过短串联重复序列分析确认,证明该模型能够反映患者内及患者间的肿瘤异质性。将临床常用化疗方案应用于类器官模型,通过CellTiter-Glo^® 3D细胞活力检测分析对化疗药物的敏感性。结果 所培养的结直肠癌类器官在组织病理学和遗传特征上与其来源肿瘤高度一致。药物敏感性试验结果表明,不同患者来源的类器官对常用化疗药物的敏感性存在差异。结论 本研究成功构建的结直肠癌类器官模型能够较好地再现对应来源肿瘤组织的组织学分型与遗传特征,且在体外化疗敏感性试验中具有较好的应用潜力。该模型可用于预测结直肠癌患者对化疗的反应,为个性化医疗提供了重要参考。

目的 制备一种具有温度响应特性的香荆芥酚(carvacrol,CAR)混合胶束,优化制备工艺,并对其进行质量评价。方法 以维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)和聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)为载体材料采用薄膜分散法制备CAR混合胶束。通过层次分析法(AHP)-变异系数法对各指标分别赋予权重,得出综合评分值(OD)作为评价参数,结合响应面法优化CAR混合胶束的制备工艺,并对其理化性质进行表征。结果 CAR混合胶束的最佳制备工艺条件为TPGS与PNIPAM质量比为9∶1,载体用量为11 mg,水化介质为超纯水,水化温度为50 ℃,水化体积为9.48 mL,水化时间为1 h。经验证测得CAR混合胶束的临界胶束浓度(CMC)值为0.025 mg·mL^-1,包封率为(86.36±2.29)%,载药量为(5.54±0.53)%,粒径为(19.83±1.69)nm,多分散系数(PDI)为(0.242±0.080),Zeta电位为(-0.105±0.046)mV,OD值为(87.72±1.03)%,与预测值(86.92%)接近表明结果可靠。CAR混合胶束呈类球状,分布均匀无聚集,显示出良好的稳定性。傅里叶红外光谱与差示扫描量热分析结果表明CAR存在于混合胶束内部。温敏性实验结果显示CAR混合胶束的低临界溶解温度(LCST)值为37.64 ℃,证明其具有温度响应特性。结论 经优化制备的CAR混合胶束具有良好的稳定性和温度敏感性,可为后续制剂研究提供一定的实验基础及依据。

目的 制备负载黄酮类药物木犀草素(LUT)纳米粒(NPs@LUT)的壳聚糖(CS)/海藻酸钠(SA)水凝胶(GelCA@LUT)伤口敷料,探讨其理化性质,并评价其安全性。方法 采用乳化-溶剂挥发法制备NPs@LUT,然后制备不同交联剂京尼平(genipin)用量和不同CS/SA质量比的水凝胶(GelCA)。将NPs@LUT涂布于GelCA表面,得到负载药物纳米粒的水凝胶伤口敷料(GelCA@LUT)。通过水蒸气透过率、含水性、保水性、溶胀性能、孔隙率、流变学性能对水凝胶的性能进行评价;通过傅里叶变换红外光谱检测(FTIR)、透射(TEM)以及扫描电子显微镜(SEM)对水凝胶的结构和形貌进行表征;通过在不同浓度的过氧化氢/PBS缓冲液中对NPs@LUT及GelCA@LUT中的LUT释放进行考察;通过溶血实验和细胞毒实验分别考察其血液相容性和细胞相容性。结果 NPs@LUT平均粒径为(234.3±4.7)nm,载药率为(9.54±0.10)%,包封率为(85.35±0.95)%;成功构建了CS与SA质量比1∶2、交联剂用量1.0 mg的GelCA;NPs@LUT和GelCA@LUT均可以稳定地释放木犀草素。GelCA@LUT具有良好的生物相容性。结论 GelCA@LUT可在大幅改善创面微环境的条件下,加速创面再生。

目的 构建能够区分野生品、仿野生品及栽培品黄芪的评分卡。方法 使用基于三元组的变分自动编码器(triplet-based variational autoencoder,TVAE)深度生成的600批虚拟数据作为训练集和验证集,对训练集数据进行分箱,并对分箱调整和优化,计算分箱的证据权重(weight of evidence,WOE)。对数据进行WOE编码,建立逻辑回归模型,使用训练集对逻辑回归模型进行训练,使用验证集对逻辑回归模型进行调参。以50分作为样品正负分类几率为1时的分数,根据公式和逻辑回归模型方程分别计算评分卡的基准分数和各分箱对应分数。评分时使用基准分数和样品所对应各分箱的分数相加,得出该样品的分数,以50分为阈值对样品正负类别的概率大小进行判定。构建了A卡和B卡分别实现黄芪样品是否为野生品和是否为栽培品的判别。结果 以64批真实样品数据作为测试集分别对A卡和B卡进行评估,A卡和B卡对测试集的分类判别准确率为0.86和0.80。结论 评分卡可以较准确地实现对黄芪样品来源的判别,模型稳定可靠,操作简单便捷且易推广。

目的 探讨质子泵抑制剂(proton pump inhibitors,PPIs)致严重皮肤不良反应(severe cutaneous adverse reactions,SCARs)的发生特点,为临床安全用药提供参考。方法 检索截至2024年6月收录在Pubmed、中国知网、万方和维普期刊数据库中PPIs致SCARs的病例报道,采集患者的人口学特征、药物使用情况、SCARs的发生时间、类型、临床表现、处置措施及转归等信息,并进行描述性统计分析。结果 共纳入22例患者,其中男性8例(36.4%),女性14例(63.6%),年龄23~89岁。涉及的PPIs包括奥美拉唑10例、埃索美拉唑6例、泮托拉唑3例和兰索拉唑3例。SCARs的发生时间为用药后1~45 d,其中18例(94.7%)发生于用药后3周内。10例诊断为史蒂文斯-约翰逊综合征(Stevens-Johnson syndrome,SJS)/中毒性表皮坏死松解症(toxic epidermal necrolysis,TEN),7例诊断为伴嗜酸性粒细胞增多和系统症状的药物反应(drug reaction with eosinophilia and systemic symptoms,DRESS),5例为急性泛发性发疹性脓疱病(acute generalized exanthematous pustulosis,AGEP)。18例(81.8%)患者经停药、糖皮质激素和/或球蛋白等治疗后临床症状和实验室检查指标均好转,但有3例患者最终死于多器官功能衰竭,1例患者自动出院。结论 多种PPIs可导致SCARs,以奥美拉唑和埃索美拉唑相对较多,且主要表现为SJS/TEN和DRESS。在使用PPIs的6周内应密切关注患者有无发热、皮疹等过敏症状,一旦怀疑可能为SCARs应及时停药,必要时予以糖皮质激素等药物对症支持治疗。

目的 随着我国分级诊疗制度的发布和实施,利用帕累托分析法探索不同级别医疗机构药品不良反应的特点,为不良反应监测工作和临床安全用药提供精准的数据参考,能更好地保障公众用药安全。方法 回顾性收集2021—2023年上海某辖区5家三级、7家二级、12家一级和7家民营医疗机构的药品不良反应报告,首先从时间和医疗机构级别维度分析不良反应的特点,然后利用帕累托分析法明确发生不良反应的主要药品因素和累及器官系统。结果 本研究共收集4 279份药品不良反应,一般不良反应占比85.91%,涉及化学药品的不良反应占比79.48%。从时间维度看,2021年至2023年的药品不良反应数量呈增加趋势。不良反应涉及最多的是老年人,女性多于男性。从医疗机构级别维度看,三级和二级医疗机构的药品不良反应数量远大于一级和民营医疗机构。三级和二级医疗机构的抗感染药、抗肿瘤和肿瘤辅助用药、精神类疾病用药的不良反应最多,最常累及皮肤及其皮下组织、胃肠道系统。一级医疗机构的药品不良反应主要涉及老年人占比高达81.58%,中药制剂占比29.26%、心血管药物占比23.07%,胃肠道系统症状占比34.21%,前述占比显著高于三级和二级医疗机构。结论 基于帕累托分类标准,不同级别医疗机构发生不良反应的主要药品有差异,但不良反应主要累及器官系统无明显差异。帕累托分析法是制定重点监测药品类别和不良反应症状的可靠方法,促进不良反应监测实现精准化,助力临床用药安全。