多肽Apelin减轻高糖诱导的肾脏足细胞损伤
王丽妍, 安菲, 刁宗礼, 黄红东, 刘文虎
2023, 43(12):
1771-1777.
doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.12.1771
摘要
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计量指标
目的 探讨多肽Apelin在糖尿病肾病中对足细胞线粒体的保护作用及机制。方法 体外培养人肾脏足细胞系,将细胞分为:对照组(control),高糖(HG)组(葡萄糖25 mmol/L, 48 h),Apelin干预HG组(Apelin-13 1 μmol/L, 48 h),Apelin组(Apelin-13 1 μmol/L, 48 h)。TUNEL染色观察细胞凋亡,Western blot法检测细胞线粒体膜蛋白FUNDC1的表达量,免疫共沉淀法检测线粒体分裂蛋白DRP1和FUNDC1的结合情况。将8周龄雄性小鼠分为:对照组(control),糖尿病组(DM,一次性腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg)以及Apelin干预DM组(建模成功后,每日腹腔注射Apelin-13 0.3 μmol/kg),每组5只小鼠。PAS染色和透射电镜观察肾脏形态,ELISA试剂盒检测血浆肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,计算肌酐清除率(Ccr);ELISA试剂盒检测尿液白蛋白和肌酐水平,计算尿白蛋白/肌酐(ACR)值。结果 细胞实验:与对照组相比,高糖组足细胞凋亡数量明显增多,FUNDC1表达水平升高(P<0.05),线粒体分裂蛋白DRP1和FUNDC1的结合增加。而Apelin干预HG组和高糖组相比,细胞凋亡数量减少,FUNDC1的表达量降低(P<0.05),DRP1和FUNDC1的结合减少。动物实验:对照组小鼠肾脏形态正常和足细胞结构完整,糖尿病组小鼠的足细胞数量减少,足突融合、脱落,Apelin干预DM组小鼠肾脏的病变程度轻于糖尿病组。与对照组相比,糖尿病组小鼠血浆Cr、BUN升高,Ccr水平降低,尿液ACR含量明显增加(P<0.05)。Apelin干预DM组与糖尿病组相比,上述指标有所改善(P<0.05)。结论 多肽Apelin通过抑制线粒体膜蛋白FUNDC1的表达,维持线粒体稳态,减少足细胞凋亡,具有缓解糖尿病肾病的生物学效应。