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2023年 第43卷 第6期    刊出日期：2023-06-05

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研究论文

烯醇化酶1通过影响mRNA定位调节人胚胎干细胞自我更新能力

赫佳音, 杨嘉宾, 陈仲扬, 马艳妮, 余佳

2023, 43(6):  867-874.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0867

摘要 ( 171 )   PDF (5783KB) ( 344 )  

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目的 探究烯醇化酶1(ENO1)的表达对维持人胚胎干细胞(hESCs)自我更新能力的影响,并揭示其机制。方法 预测与ENO1结合的RNA和蛋白质,并进行GO富集分析。在hESCs中通过shRNA抑制ENO1内源表达,集落形成实验及碱性磷酸酶染色(AP)检测hESCs的集落形成能力,荧光定量PCR检测hESCs的多能性及分化标志基因的表达变化,RNA荧光原位杂交技术检测带有polyA尾的RNA的定位变化。 结果 抑制ENO1的内源表达后,hESCs的集落形成能力得到了显著抑制(P＜0.05),同时分化标志基因表达水平升高(P＜0.001),带polyA尾的RNA的定位由分散在细胞质中变为集中在核内(P＜0.001)。结论 ENO1通过影响mRNA在细胞内的定位调控hESCs自我更新能力。

TPX2的表达对胰腺癌预后的影响

苏靓誉, 张振西, 杜文静

2023, 43(6):  875-881.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0875

摘要 ( 124 )   PDF (5189KB) ( 114 )  

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目的 研究Xklp2靶蛋白(TPX2)在胰腺癌中的表达情况及其预测预后的潜在价值。方法 基于200个糖酵解代谢相关基因,从TCGA和GEO数据库获取胰腺患者的信息,对后者的糖酵解代谢特征进行评价,同时综合患者代谢特征及差异基因,采用Cox回归和Lasso回归分析建立风险模型,获得关键糖酵解相关基因TPX2,并用GEO数据库验证该模型的预后有效性。基于预后基因的表达分析胰腺癌患者的生存期,并分析正常胰腺组织和胰腺癌中预后基因的表达差异,最后在细胞水平验证预后基因的功能。结果 病例队列被分为高、中、低3个糖酵解代谢特征组,低速率糖酵解代谢患者存在一定生存优势,TPX2是该模型的关键基因,胰腺癌患者显示高表达TPX2,具有较差的预后。细胞水平上敲降TPX2可抑制胰腺癌细胞增殖和集落形成。结论 本研究基于糖酵解代谢模型有效地预测了胰腺癌患者的预后,TPX2有望成为胰腺癌预后预测的潜在标志性基因。

环状RNA ATP2B1靶向miR-452-5p降低胃癌细胞系的增殖和侵袭

郑彬彬, 林淑莹, 李德隆, 陈杰, 黄子成

2023, 43(6):  882-888.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0882

摘要 ( 132 )   PDF (1738KB) ( 94 )  

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目的 探讨环状RNA circATP2B1对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 收集2018年7月至2021年2月福建医科大学附属泉州第一医院胃肠肝胆外科行手术切除并病理学诊断的44例胃癌组织标本及癌旁组织标本。选取4株胃癌细胞系(SGC7901、HS-746T、MGC803、BGC823)和正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1)。RT-qPCR检测胃癌组织和细胞系中circATP2B1表达。将circATP2B1表达最低的胃癌细胞分为对照组(转染阴性对照质粒)和实验组(转染circATP2B1过表达质粒)。分别采用MTT法和Transwell小室法检测各组胃癌细胞的增殖活性和侵袭能力。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析circATP2B1可能的作用机制,RT-qPCR和Western blot检测circATP2B1下游基因的表达。结果 胃癌组织circATP2B1表达量显著低于癌旁组织(0.92±0.08 vs 3.62±0.23,P＜0.01)。胃癌细胞系circATP2B1表达量均显著低于GES-1细胞(P＜0.01),其中以HS-746T细胞的表达量最低(P＜0.01)。与对照组相比,实验组HS-746T细胞的增殖活性显著降低(P＜0.05),侵袭能力显著下降(P＜0.01)。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验显示circATP2B1可靶向结合miR-452-5p(P＜0.01),miR-452-5p可靶向结合原钙黏附蛋白9(PCDH9)(P＜0.01)。与对照组比较,实验组HS-746T细胞miR-452-5p表达显著下降(1.00±0.04 vs 0.24±0.05,P＜0.01),PCDH9基因表达显著上升(P＜0.01)。结论 circATP2B1在胃癌组织和细胞系中低表达,circATP2B1通过靶向结合miR-452-5p正调控PCDH9基因表达,进而降低胃癌HS-746T细胞增殖和侵袭能力。

芳香烃受体调控人脂肪间充质干细胞的免疫调节功能

武文婧, 高竞溪, 赵晓妍, 孙昭, 韩钦, 赵春华

2023, 43(6):  889-897.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0889

摘要 ( 168 )   PDF (2494KB) ( 164 )  

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目的 探索芳香烃受体(AHR)对人脂肪间充质干细胞(MSCs)免疫调节功能的影响。方法 RT-qPCR和免疫荧光染色法检测炎性细胞因子刺激前后,MSCs中吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、白细胞介素-4诱导基因1(IL4I1)和芳香烃受体表达水平;将si-Ctrl、si-IDO1、si-IL4I1、si-AHR转染至MSCs,阻断AHR信号通路;将MSCs的条件培养基与巨噬细胞共培养,RT-qPCR和ELISA检测巨噬细胞炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平。结果 未经细胞因子刺激的MSCs高表达AHR,几乎不表达IDO和IL4I1蛋白;不同细胞因子刺激后,代谢酶IDO1、IL4I1及AHR表达上调(P＜0.05),IFN-γ刺激后IDO1、IL4I1表达上调最为显著(P＜0.001),进入细胞核的AHR增多;下调AHR的表达削弱MSCs的免疫抑制作用(P＜0.05)。结论 AHR参与调节MSCs的免疫功能,下调AHR可以抑制MSCs的免疫调节作用。

蛋白质精氨酸残基化学修饰酶PADs与PRMTs在人肝癌细胞系中的表达

邹瑾, 何向蕾, 张欣, 陈日萍, 张宇, 胡帅悦, 应士波

2023, 43(6):  898-903.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0898

摘要 ( 156 )   PDF (4452KB) ( 83 )  

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目的 探究蛋白质精氨酸脱亚胺酶(PADs)和蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在肝癌细胞系中的表达水平,并分析PADs催化的蛋白瓜氨酸化水平是否与PRMTs表达有关。方法 通过RT-qPCR检测肝癌细胞系中PADs和PRMTs的mRNA转录水平,Western blot检测PADs、瓜氨酸化蛋白和PRMTs蛋白表达水平。利用生物信息学分析TCGA数据库中肝癌组织PADs和PRMTs的mRNA相关性,免疫组化检测肝癌组织PADs、瓜氨酸化蛋白和PRMTs表达。结果 与正常肝细胞LX-2相比,PAD2和PRMT1在Huh7细胞中mRNA转录水平升高(P＜0.001),PAD4、PRMT1、PRMT5和PRMT7在HepG2细胞中mRNA转录水平升高(P＜0.01)。PAD2和PAD4在HepG2和Huh7中的蛋白水平显著高于LX-2(P＜0.01)。瓜氨酸化蛋白在HepG2和Huh7中的水平低于LX-2。肝癌组织中PADs和PRMTs的表达强于癌旁组织,但瓜氨酸化蛋白几乎呈阴性。PAD2和所有PRMTs家族成员在临床大样本中呈显著正相关性(P＜0.05)。结论 肝癌细胞中PADs有较高的表达水平,而PADs催化的蛋白瓜氨酸化水平较低,可能是受胞内高水平表达的PRMTs酶竞争性影响。

沉默Fcgr3降低SiO₂诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达

李晓娜, 齐先梅, 张田甜, 王婧

2023, 43(6):  904-908.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0904

摘要 ( 140 )   PDF (1084KB) ( 129 )  

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目的 探讨沉默免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ)对SiO₂诱导的小鼠肺泡巨噬细胞系MH-S炎性因子表达的影响。方法 构建Fcgr3 shRNA的慢病毒质粒;人胚肾细胞系293T培养包装产生慢病毒;慢病毒感染沉默MH-S中的FcγRⅢ,并筛选稳定感染的细胞。定量多聚酶链反应(qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MH-S巨噬细胞系中FcγRⅢ的mRNA和蛋白表达。将MH-S细胞分为MH-S+sh-NC、MH-S+SiO₂+sh-NC、MH-S+sh-Fcgr3和MH-S+SiO₂+sh-Fcgr3,其中SiO₂处理条件为100 mg/L连续刺激12 h。通过qPCR检测炎性因子转录水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清中的炎性因子的含量,包括肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)。结果 包装慢病毒并感染细胞后建立稳定沉默Fcgr3的MH-S细胞系,稳定转染细胞中FcγRⅢ的转录与蛋白表达水平较对照组降低(P＜0.05)。与对照组相比,SiO₂ 刺激后Tnf、Il1b和Il6的转录水平明显升高(P＜0.05),沉默Fcgr3后炎症因子转录水平显著下降(P＜0.05);与对照组相比,SiO₂ 刺激后TNF-α和IL-6的分泌量明显升高(P＜0.05),沉默Fcgr3后炎症因子分泌水平显著下降(P＜0.05)。结论 沉默Fcgr3能够降低SiO₂诱导的肺泡巨噬细胞炎性因子的表达。

FOXL2NB在结直肠癌中的表达和临床意义

杜风, 陈翌阳, 张楠, 徐俊玄, 宁婷婷, 朱圣韬, 张澍田

2023, 43(6):  909-915.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0909

摘要 ( 135 )   PDF (3648KB) ( 114 )  

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目的 分析叉头框L2旁基因(FOXL2NB)在结直肠癌(CRC)中的表达及临床意义,探讨FOXL2NB对CRC细胞的作用。方法 RT-qPCR和蛋白免疫印迹分析CRC组织和细胞中FOXL2NB的表达;Transwell和CCK-8实验探讨FOXL2NB在SW620细胞增殖和迁移的作用;Kaplan-Meier法和多因素Cox回归分析评估FOXL2NB对CRC预后的影响;基因集富集分析比较高、低风险组间分子信号通路差异,CIBERSORT R包计算CRC组织中FOXL2NB表达与免疫细胞浸润的关系,limma R包计算与FOXL2NB表达显著相关的分子。结果 FOXL2NB在CRC组织和细胞中的表达水平显著升高(P＜0.05);敲低FOXL2NB可抑制CRC细胞的迁移及增殖;高水平的FOXL2NB与CRC患者不良预后相关(P＜0.05),可作为CRC预后的独立风险因素(HR=2.27,95% CI=1.78~2.9,P＜0.001);FOXL2NB高表达的CRC中细胞黏附分子和肿瘤免疫相关通路被显著富集,CD8⁺ T细胞和活化树突状细胞显著增多,M0巨噬细胞显著减少。FOXL2NB基因表达与SCRT2、MGAT5B、SELENOV、FOXB1、KCNA4、LRRC14B和SLC32A1基因表达正相关。结论 FOXL2NB在CRC中高表达,可能预示CRC患者不良预后。FOXL2NB可能促进结直肠癌细胞增殖和迁移。

转录因子Ikzf1促进小鼠胎肝来源红系细胞终末分化

王佳鑫, 余东林, 杨希, 刘雪会, 吕湘

2023, 43(6):  916-922.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0916

摘要 ( 151 )   PDF (3812KB) ( 147 )  

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目的 通过分析单细胞转录组数据,挖掘红系终末分化过程中潜在的转录因子Ikzf1,并探究其在终末红系分化中的功能。方法 利用SCENIC方法对人和小鼠红系细胞的单细胞转录组数据进行转录因子预测,从bulk转录组数据获取所预测因子Ikzf1在红系终末分化过程中的表达情况并在小鼠胎肝红系分化体系中进行RT-qPCR验证。在小鼠胎肝来源的红系细胞中利用短发夹RNA (shRNA)干扰技术敲低Ikzf1,流式分选GFP阳性的成功转染细胞,RT-qPCR验证其敲低效率,流式细胞术分析Ikzf1敲低后对红系分化和脱核的影响。结果 SCENIC预测Ikzf1是人与小鼠红系终末分化共同的转录因子,转录组及RT-qPCR分析显示其在终末分化较早期的原红和早幼红细胞阶段表达量较高。将小鼠胎肝来源红系细胞中Ikzf1基因的表达成功敲低,流式细胞术检测发现Ikzf1敲低导致红细胞分化阻滞在早幼红细胞时期,细胞脱核率显著降低 (P＜0.05)。结论 转录因子Ikzf1在红系终末分化早期高表达并参与促进红系终末分化和脱核。

黄连生物碱改善小鼠原代肝细胞糖异生与脂质蓄积

颜家琦, 王思齐, 王峥, 李隽

2023, 43(6):  923-930.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0923

摘要 ( 145 )   PDF (2699KB) ( 127 )  

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目的 筛选能改善小鼠原代肝细胞糖异生与脂质蓄积的黄连生物碱单体并探讨其作用机制。方法 分离小鼠原代肝细胞,使用不同剂量黄连总生物碱或单体成分处理,CCK-8法检测细胞存活率。使用丙酮酸钠、乳酸钠与胰高血糖素诱导小鼠原代肝细胞糖异生模型,应用试剂盒检测培养基中葡萄糖含量,RT-qPCR检测糖异生相关基因表达,蛋白印迹检测p-AKT水平。应用棕榈酸与油酸诱导脂质蓄积模型,油红O检测细胞内脂质含量,蛋白印迹检测FAS、PLIN1、PPARγ蛋白水平。结果 低剂量(0.5、1、2 μg/mL)的黄连总生物碱处理24 h后小鼠原代肝细胞存活率在80%以上。糖异生模型组葡萄糖含量与G6PC、PCX的mRNA水平较对照组升高(P＜0.05),p-AKT蛋白水平较对照组降低(P＜0.05);黄连总生物碱(1、2 μg/mL)与小檗碱(2.5、5 μmol/L)处理后葡萄糖含量与G6PC、PCX的mRNA水平较模型组降低(P＜0.05),p-AKT蛋白水平较模型组升高(P＜0.05)。脂质蓄积模型组油红O染色较对照组增加(P＜0.01),FAS、PLIN1、PPARγ蛋白水平较对照组升高(P＜0.01);黄连总生物碱(1、2 μg/mL)、黄连碱(2.5、5 μmol/L)与小檗碱(2.5、5 μmol/L)组的油红O染色较模型组减少(P＜0.05),FAS、PLIN1、PPARγ蛋白水平较模型组降低(P＜0.05)。结论 小檗碱通过上调p-AKT水平而降低小鼠原代肝细胞糖异生,黄连碱与小檗碱通过降低FAS、PLIN1、PPARγ的表达而减少小鼠原代肝细胞脂质蓄积。

Asp基因对急性心肌梗死小鼠心功能及Erk1/2表达的影响

吕茂琳, 王存吉, 热洋尼沙·卡的, 高颖

2023, 43(6):  931-935.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0931

摘要 ( 121 )   PDF (1313KB) ( 76 )  

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目的 探讨促酰化蛋白(Asp)基因对急性心肌梗死(MI)模型小鼠心功能的影响。方法 将C57BL/6野生型小鼠及Asp^-/-小鼠各10只分为C57、Asp^-/-、C57+MI和Asp^-/-+MI组。结扎冠状动脉前降支24 h后行心脏B超检测心脏功能,留取心脏标本前测量小鼠空腹血糖及体质量。伊文思蓝-TTC染色观察存活心肌、缺血心肌和心梗心肌的面积。ELISA法测定白介素8(IL-8)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及血脂谱的表达。Western blot测定细胞外信号调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)和磷酸化p-Erk1/2蛋白的表达。结果 Asp^-/-及Asp^-/- +MI组的空腹血糖及体质量均分别高于野生型组(P＜0.05)。MI后Asp^-/-组小鼠的射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)较野生型MI组小鼠降低,左心室舒张末内径(LVEDd)及左心室收缩末内径(LVESd)增加(P＜0.05)。Asp^-/-+MI组缺血区面积明显大于C57+MI组小鼠(P＜0.05)。与C57+MI小鼠相比,Asp^-/-+MI组小鼠IL-8升高。C57及Asp^-/-+MI组小鼠eNOS较术前均降低。Asp^-/-+MI组小鼠Erk1/2及p-Erk1/2明显弱于C57+MI组。结论 Asp可能通过MAPK-Erk信号通路改善小鼠心功能、抑制心肌细胞凋亡和减轻小鼠心肌受损。

γ-氨基丁酸促进水疱性口炎病毒感染小鼠巨噬细胞

赵璐, 刘洋

2023, 43(6):  936-940.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0936

摘要 ( 145 )   PDF (1682KB) ( 80 )  

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目的 探究代谢物γ-氨基丁酸(GABA)对病毒感染RAW264.7细胞系和小鼠原代腹腔巨噬细胞的影响。方法 用0、10、30、50和70 mmol/L GABA或PBS处理RAW264.7细胞系10 h,CCK-8法检测细胞活性,用此剂量GABA预处理RAW264.7细胞系,2 h后用表达绿色荧光蛋白的重组水疱性口炎病毒(GFP-VSV)或VSV感染8 h,荧光显微镜观察细胞内GFP-VSV的含量;流式细胞术检测细胞内GFP-VSV的水平;RT-qPCR检测VSV RNA及细胞因子Ifnb1和Il-6的mRNA水平。用0、10、30、50和70 mmol/L GABA预处理小鼠原代腹腔巨噬细胞,2 h后用VSV感染8 h,RT-qPCR检测VSV RNA水平。结果 10、30、50和70 mmol/L的GABA对RAW264.7细胞系的活性没有影响,且此剂量的GABA能提高RAW264.7细胞系内GFP-VSV的蛋白水平、VSV RNA水平和细胞因子Ifnb1和Il-6的mRNA水平(P＜0.05),也能提高小鼠原代腹腔巨噬细胞内VSV RNA水平(P＜0.05),且均呈剂量依赖性。结论 代谢物GABA能以剂量依赖的方式促进VSV感染RAW264.7细胞系和小鼠原代腹腔巨噬细胞,同时细胞因子Ifnb1和Il-6的mRNA水平也升高。

E3泛素连接酶RNF138抑制溃疡性结肠炎的发生及进展

邓博雅, 路亚岚, 羽思, 张旖垚, 黄婧怡, 李玥, 刘长征

2023, 43(6):  941-947.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0941

摘要 ( 142 )   PDF (7574KB) ( 103 )  

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目的 研究E3泛素连接酶RNF138在溃疡性结肠炎(UC)中的作用。方法 利用GEO数据库分析活动期、缓解期以及经免疫抑制剂治疗后UC样本中RNF138的表达水平;利用RNF138基因敲除小鼠构建UC模型,对模型小鼠进行病理学观察及组织学分析;取小鼠结肠组织进行转录组测序,初步探究RNF138敲除促进UC进展的可能机制;利用免疫组化和Western blot检测小鼠结肠组织中RNF138和phospho-NF-κB p65(p-p65)的表达水平;通过qPCR实验检测核因子NF-кB通路靶基因的表达水平;利用免疫组化对临床样本中RNF138和p-p65的表达进行检测。结果 GEO数据库及临床样本分析显示,与缓解期相比,活动期UC组织中RNF138表达下调(P＜0.05);敲除RNF138促进DSS诱导的UC发生及进展(P＜0.05);敲除RNF138促进p-p65及其靶基因表达 (P＜0.05),提示NF-кB信号通路激活。结论 RNF138通过阻断NF-кB通路活化抑制UC发生及进展。

LncRNA CBR3-AS1在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

张永梅, 张志敏, 周洁, 潘志兰, 冯丽倩, 杨彦

2023, 43(6):  948-952.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0948

摘要 ( 135 )   PDF (941KB) ( 81 )  

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目的 检测多发性骨髓瘤患者血清中长链非编码羰基还原酶3反义RNA1(LncRNA CBR3-AS1)的表达水平,并分析其临床意义。方法 该研究纳入石家庄市人民医院2012年1月至2020年3月期间初诊的100例多发性骨髓瘤患者作为观察组,另纳入50名65岁以下的健康体检人员作为对照组。用RT-qPCR技术检测LncRNA CBR3-AS1在血清中的相对表达,分析血清LncRNA CBR3-AS1的表达水平与多发性骨髓瘤患者临床参数的关系;Kaplan-Meier(K-M)法生存曲线分析血清LncRNA CBR3-AS1表达水平与多发性骨髓瘤患者预后的关系;单因素、多因素Cox回归评估可能影响多发性骨髓瘤患者预后的因素。结果 观察组血清中LncRNA CBR3-AS1的相对表达水平显著高于对照组(P＜0.05);多发性骨髓瘤患者血清中LncRNA CBR3-AS1的相对表达水平与临床传统分期系统(D-S)分期、国际分期系统(ISS)分期有关(P＜0.05);LncRNA CBR3-AS1低表达组患者的生存率(78.0%)明显高于LncRNACBR3-AS1高表达组的患者(58.0%)(χ²=5.370,P＜0.05);单因素分析结果显示,临床D-S分期(HR=2.159;95% CI=1.323~3.524;P＜0.05)和ISS分期(HR=1.746;95% CI=1.091~2.794;P＜0.05)及血清LncRNA CBR3-AS1的表达(HR=1.975;95% CI=1.210~3.224;P＜0.05)影响多发性骨髓瘤患者的预后,多因素COX回归分析结果表明临床D-S分期(HR=2.769;95% CI=1.315~5.832;P＜0.05)、ISS分期(HR=2.495;95% CI=1.117~5.573;P＜0.05)及血清LncRNA CBR3-AS1的表达(HR=3.214;95% CI=1.206~8.564;P＜0.05)均可作为多发性骨髓瘤的独立影响因素。结论 CBR3-AS1在多发性骨髓患者中高表达,并且可能与多发性骨髓瘤患者的预后有关。

p53转录调控靶基因GGT6对人结肠癌的影响

柳子朝, 杜文静, 李莉

2023, 43(6):  953-959.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0953

摘要 ( 166 )   PDF (4562KB) ( 249 )  

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目的 筛选出p53转录调控靶基因,并利用生物信息学分析该基因在结肠癌(COAD)中的作用。方法 对p53蛋白稳定剂Nutlin处理的结肠癌细胞系HCT116的RNA-seq数据进行基因差异分析及GO、KEGG和GSEA富集分析;在HCT116及HCT8细胞中加入Nutlin稳定或转染siRNA敲降p53的表达,利用实时荧光定量PCR检测候选靶基因的mRNA表达;双荧光素酶报告实验验证p53对靶基因的转录调控;利用TCGA数据库中的结肠癌数据分析靶基因在结肠癌组织中的表达及患者预后情况。结果 Nutlin处理结肠癌细胞系HCT116后细胞周期、DNA复制及染色体分离等生物过程基因表达发生变化,同样p53信号通路也被激活。在HCT116及HCT8细胞中γ-谷氨酰转移酶(GGT6)的mRNA水平与p53蛋白表达呈正相关。双荧光素酶报告实验确定了GGT6是p53转录调控的靶基因。TCGA-COAD数据分析表明GGT6在结肠癌组织中表达高于癌旁组织(P＜0.001),且GGT6高表达患者的总体生存时间较GGT6低表达患者更长(P＜0.01),推测GGT6是结肠癌的抑癌因素。结论 GGT6是一个p53正调控转录靶基因,在结肠癌中可能是一个抑癌因素。

人肝癌细胞系HepG2和Huh7中的基因组拷贝数变异分析

冀梦蝶, 苑赞, 卞晓翠, 杨玉容, 郭鑫, 王琦, 陈阳

2023, 43(6):  960-966.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0960

摘要 ( 196 )   PDF (4754KB) ( 182 )  

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目的 利用人肝细胞癌拷贝数变异和转录组实验,结合临床公共数据,探索肝细胞癌的拷贝数变异对肝癌发生发展的影响。方法 用光学基因组图谱技术识别肝癌细胞系HepG2和Huh7中的拷贝数变异,随后分析两种细胞系拷贝数变异基因的功能,并根据富集通路绘制蛋白质相互作用网络。选取两个细胞系核心网络中的关键基因,分析肝细胞癌拷贝数变异与基因表达之间的关系。GEPIA数据库分析基因表达与患者临床生存的关系。用RNA-seq实验和公共数据验证基因的表达水平。结果 HepG2细胞主要存在拷贝数增加,相关基因富集在雌激素信号通路、金黄色葡萄球菌感染等通路;Huh7细胞系中既有拷贝数增加又有减少,相关基因主要富集嗅觉传导、细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路。关键基因SRC、MAPK3和MAP3K7拷贝数与基因表达成正比,并且高表达这些基因的患者生存期显著降低(P＜0.05)。相比于HEK293T细胞系,SRC、MAP3K7基因在两个肝癌细胞系的表达显著升高(P＜0.001),提示了肝细胞癌的特异性变异,MAPK3无差异。结论 肝细胞癌拷贝数变异基因SRC、MAP3K7的表达与患者的预后显著相关,可能影响肝细胞癌的发生发展和异质性。

微囊藻毒素-LR处理的中性粒细胞NETs促进结直肠癌细胞迁移

张海灵, 杨玉, 周倩倩, 汪远金, 王婷

2023, 43(6):  967-973.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0967

摘要 ( 117 )   PDF (5604KB) ( 110 )  

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目的 探究微囊藻毒素-LR(MC-LR)处理的中性粒细胞外诱捕网(NETs)对结直肠癌细胞迁移的影响。方法 同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术检测经MC-LR处理的结直肠癌细胞培养上清中蛋白质的表达,GO功能富集分析差异表达的蛋白富集的生物学过程。流式细胞测量术检测MC-LR灌胃后的裸鼠皮下异种移植肿瘤组织中中性粒细胞的数量;免疫组化实验检测经MC-LR处理的BALB/c小鼠原位癌组织中CD11b,中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和瓜氨酸组蛋白3(citH3)的表达;Transwell小室法检测经MC-LR处理之后的NETs对结直肠癌细胞迁移的影响。结果 MC-LR处理之后筛选出11个差异表达的蛋白(P＜0.05),并发现与白细胞迁移过程有关的差异蛋白发生了富集;MC-LR能够增加裸鼠皮下肿瘤组织中中性粒细胞的数量(P＜0.05);灌胃MC-LR的BALB/c小鼠原位结直肠癌组织中CD11b,NE和citH3的表达较对照组增多(P＜0.05);MC-LR处理后的NETs能够增强结直肠癌细胞的迁移能力(P＜0.05)。结论 MC-LR可能通过诱导肿瘤微环境(TME)中NETs的形成进而促进结直肠癌细胞的迁移。

基于Logistic回归模型的5类普外科并发症预测

陈王跃, 薛芳, 韩伟, 王子兴, 姜晶梅, 于晓初

2023, 43(6):  974-980.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0974

摘要 ( 144 )   PDF (1762KB) ( 141 )  

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目的 基于一项多中心队列研究,描述普外科并发症发生情况,并建立不同类型并发症的预测模型。方法 基于《现代手术麻醉安全管理体系建设与推广项目》,选取2015年1月至6月和2016年1月至6月两阶段在4家医院实施普外科手术的患者作为研究对象,收集患者围术期资料;用多因素Logistic回归识别风险因素并进行预测。结果 19 223名患者中发生并发症的人数为830(4.32%)。其中,切口类并发症371人次(44.70%),瘘管类并发症190人次(22.89%),感染类并发症310人次(37.35%),衰竭类并发症161人次(19.40%),死亡104人(12.5%)。不同类型并发症的风险因素差异较大,切口、感染类和衰竭类并发症的风险因素覆盖整个围术期,瘘管类并发症主要集中于手术难度和术后的处理,对于死亡结局,术后因素相对术前因素风险较高。预测的曲线下面积在0.80~0.93之间。结论 在普外科中,不同类型并发症有各自的风险因素,针对性地建立预测模型可避免将并发症粗略简化而模糊各因素的影响程度,可为预防并发症提供参考。

疑难病例

经上皮准分子激光角膜切削术后角膜上皮延迟愈合1例

王天骄, 李莹

2023, 43(6):  981-984.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0981

摘要 ( 144 )   PDF (2191KB) ( 172 )  

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目的 探讨经上皮准分子激光角膜切削术(TPRK)术后角膜上皮延迟愈合原因及治疗。方法 回顾性分析1例青年女性因近视行TPRK后出现角膜上皮延迟愈合的临床资料。结果 角膜上皮延迟愈合是TPRK术后早期少见并发症。本例患者因TPRK术后角膜上皮延迟愈合出现眼部疼痛、视物模糊、眩光流泪等症状。长期配戴隐形眼镜、睑板腺功能障碍及术后使用抑制上皮生长药物是其危险因素,患者经过配戴绷带镜、玻璃酸钠滴眼液、小牛血去蛋白提取物眼用凝胶、糖皮质激素、更昔洛韦眼用凝胶、角膜上皮清创刮除术等综合治疗22 d后,角膜上皮完全愈合,延迟愈合区域角膜上皮下雾状混浊1级,半年后角膜透明无浑浊。结论 对具有TPRK术后角膜延迟愈合危险因素的患者,术前应进行全面检查以减少角膜上皮延迟愈合风险;当出现术后角膜上皮延迟愈合时应及早进行综合治疗,警惕角膜上皮下雾状混浊和单纯疱疹病毒感染。

短篇综述

痛性及非痛性糖尿病神经病变的临床研究进展

余卓颖, 杨静, 蒋烨, 李民

2023, 43(6):  985-989.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0985

摘要 ( 154 )   PDF (933KB) ( 167 )  

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13%~35%的糖尿病患者存在痛性神经病变,而痛性及非痛性糖尿病神经病变(diabetic neuropathy,DNP)在糖尿病患者中差异性临床表现的原因尚不清楚。性别、糖尿病类型、糖化血红蛋白、血脂水平等对痛性DNP有一定预测作用,临床上需关注小纤维病变引起的疼痛和感觉异常;现有的诊断方法鉴别作用有限,痛性DNP诊断明确后需积极用药治疗。后续需进一步研究痛性DNP的发病机制,以寻找新的治疗靶点。

铁超载在肝脏疾病中的研究进展

刘磊, 丁兰, 袁媛, 叶菁

2023, 43(6):  990-993.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0990

摘要 ( 168 )   PDF (750KB) ( 215 )  

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铁是生物体必需的微量元素,含铁蛋白质在细胞功能中起关键作用。铁超载可通过电子传递产生活性氧,引起DNA损伤、氧化应激,造成机体代谢紊乱、组织器官功能障碍。肝脏是机体铁存储的主要脏器,可调节铁的代谢、利用和排出,维持机体铁稳态平衡,铁超载与肝脏疾病的发生发展密切相关。

帕金森病嗅觉障碍的研究进展

任鹏, 陈雅丽, 张娴文

2023, 43(6):  994-997.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0994

摘要 ( 188 )   PDF (747KB) ( 266 )  

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嗅觉障碍是帕金森病(PD)最常见和最具特征的早期非运动症状,可作为PD诊断的重要依据之一。PD嗅觉障碍的机制非常复杂,是基础和临床研究的难点。病理性α-突触核蛋白的聚集,多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACh)、五羟色胺(5-HT)和炎性反应等神经介质的改变与PD嗅觉障碍的发生密切相关。深入研究PD嗅觉障碍的发病机制,可为治疗提供新思路及新靶点。

Klotho在心力衰竭中作用的研究进展

柴亚如, 邓玉婷, 戴红艳, 管军

2023, 43(6):  998-1002.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.0998

摘要 ( 176 )   PDF (2347KB) ( 175 )  

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Klotho是一种抗衰老蛋白,可分为全长跨膜型Klotho、可溶性Klotho 和分泌型Klotho 3种类型,其与氧化应激、炎性反应、心肌肥厚与纤维化、自噬、线粒体功能障碍等联系密切,参与抑制了心力衰竭的发生发展,有望为心力衰竭的治疗提供新的靶点和方向。

子宫内膜葡萄糖转运体在胚胎着床中作用的研究进展

张立雪, 李长兴

2023, 43(6):  1003-1007.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.1002

摘要 ( 140 )   PDF (883KB) ( 208 )  

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葡萄糖转运体是介导葡萄糖跨细胞膜转运的重要载体,分为易化扩散葡萄糖转运体(GLUTs)和钠-葡萄糖协同转运体(SGLTs)以及尚待深入研究的一类葡萄糖转运体SWEETS。胚胎着床过程中子宫内膜上皮细胞葡萄糖的摄取与利用可保障与着床相关功能活动得以正常运行。本文就葡萄糖转运体在胚胎着床中的作用进行阐述,旨在揭示胚胎着床的机制,为着床失败导致的女性不孕及早期流产的诊断治疗提供新的思路。

铁死亡在新生儿急性肺损伤中作用机制的研究进展

楚晓云, 蔡成

2023, 43(6):  1008-1011.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.1008

摘要 ( 126 )   PDF (742KB) ( 112 )  

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急性肺损伤是新生儿中常见的一种危急重症,铁死亡作为一种新型细胞程序性死亡形式,可通过调节铁稳态、氨基酸代谢和脂质过氧化反应参与急性肺损伤的进程。深入研究铁死亡在急性肺损伤中的作用机制可为其防治提供新思路。

儿童早期麻醉暴露对神经发育影响的研究进展

代子一, 马璐璐, 黄宇光

2023, 43(6):  1012-1015.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.1012

摘要 ( 147 )   PDF (747KB) ( 206 )  

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全身麻醉药物可诱导神经元凋亡,引起发育期大脑的结构性改变,导致长期的认知和行为学改变。但临床研究中早期麻醉暴露对儿童智力、行为学、影像学等结局的影响并不一致,从而提示麻醉暴露影响神经发育机制的复杂性。本文总结了近年来动物研究和临床证据,探讨麻醉对儿童神经发育影响的可能机制,旨在指导儿童患者的治疗方式和手术时机的选择。

医学教育

超声医学教学体系构建的实践

田艳, 席雪华, 陆薇丹, 周彤彤, 贾欣颖, 卢潇, 张波

2023, 43(6):  1016-1019.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.1016

摘要 ( 141 )   PDF (859KB) ( 221 )  

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超声医学科住院医师规范化培训在医学生毕业后和专科医师的继续教育中起着承上启下的关键作用。近年来随着各类医学生纳入超声医学科住院医师规范化培训,遇到了被培训医师素质参差不齐、培训目标定位缺乏个性化、实施管理手段不足等一些问题。本文探讨了中日友好医院超声医学科规范化培训体系建设的具体内容,包括文化建设、课程体系建设、过程考核建设、师资建设等实践。可通过自身优势整合课程等资源并优化利用、健全并严格执行培训考核制度、重视师资建设、科室文化建设和人文关怀并举等措施,在超声医学科住院医师规范化培训工作上创出自己的特色,以期为未来构建规范化的超声医学医师培训管理体系奠定基础和提供经验。

构建课程思政教学资源在线平台助力医学院校课程思政建设

黄付敏, 高小惠, 梁果, 闫宏宇

2023, 43(6):  1020-1022.  doi:10.16352/j.issn.1001-6325.2023.06.1020

摘要 ( 114 )   PDF (712KB) ( 96 )  

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培养具有家国情怀、人文素养、创新精神、实践能力、国际视野的高素质人才和有本领有情怀有担当的人民群众健康守护者与医疗卫生事业接班人,是新时代医学院校的重要使命。课程思政建设是医学院校提升医学生职业素养和培养具备良好医德医风的医务工作者的必然路径。本文尝试从构建课程思政教学资源在线平台的角度提出医学院校课程思政建设的几点建议。