基础医学与临床 ›› 2008, Vol. 28 ›› Issue (11): 1197-1202.
步雪峰 严玉兰 刘洋 张志坚 王穆斌
Xue-feng BU, Yu-lan YAN, Yang LIU, Zhi-jiang ZHANG, Mu-bin WANG
摘要: 目的 培养和鉴定从鼠骨髓中分离的平滑肌祖细胞,观察其在体外增殖、分化过程中相关细胞表型的变化。方法 用密度梯度离心法获得鼠骨髓单个核细胞,用条件培养基进行诱导分化,免疫荧光双标技术(α-SMA、CD14)鉴定SPC。Western blot检测α-SMA蛋白,Real-time PCR法检测α-SMA mRNA表达。结果 鼠骨髓单个核细胞诱导培养4 d时开始贴壁,7 d变为梭形,14 d呈典型的"峰""谷"样形态;4 d时细胞开始出现α-SMA-CD14双荧光阳性;培养1 d 时无α-SMA蛋白表达,4 d后增强, 10 ~14 d达高峰,21 d仍持续高水平;培养1 d 的细胞α-SMA mRNA表达低(P<0.01),4 d后增强,14 d 达高峰(P<0.01),21 d 后仍持续高水平。结论 本试验成功地从鼠骨髓单个核细胞中分离培养出SPC,并在体外扩增分化成平滑肌样细胞。