基础医学与临床 ›› 2010, Vol. 30 ›› Issue (4): 389-393.
林梅 张木勋 刘永健 张建华 余毅恺 帅红霞
Mei LIN, Mu-xun ZHANG, Yong-jian LIU, Jian-hua ZHANG, Yi-kai YU, Hong-xia SHUAI
摘要: 目的 观察RNA干扰阻断胰岛β细胞系NIT-1中11β-羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)表达对细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)的影响。方法 pSuper质粒为载体,构建针对11β-HSD1基因的质粒oligo886、oligo866和乱序对照质粒oligoScr886,转染NIT-1细胞,RP-PCR和蛋白印迹法检测11β-HSD1mRNA和蛋白表达。oligo886重组质粒对25mmol/L葡萄糖培养基中NIT-1细胞进行转染,测GSIS。结果 转染oligo886和oligo866质粒NIT-1细胞11β-HSD1mRNA下降(78.1±2.9)%和(51.7±2.7)%,11β-HSD1蛋白的水平下降(82.2±2.1)%和(56.5±2.0)%。oligo866转染25mmol/L浓度葡萄糖培养基中的NIT-1细胞后,GSIS较对照组明显升高(P<0.01)。结论 11β-HSD1基因沉默能改善NIT-1细胞的葡萄糖刺激胰岛素分泌能力,提示胰岛β细胞NIT-1通过11β-HSD1调节糖皮质代谢,参与葡萄糖刺激胰岛素分泌。