基础医学与临床 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (9): 916-919.
秦洁 薛兆英 郭新 桂耀庭 余振东 蔡志明
Jie QIN, Zhao-ying XUE, Xin GUO, Yao-ting GUI, Zhen-dong YU, Zhi-ming CAI
摘要: 目的 建立模拟细胞微环境、促进细胞分化的三维培养体系,以体外诱导和培养小鼠胚胎干细胞 (mES-D3)来源的心肌细胞。方法 将mES细胞通过悬浮培养获得拟胚体(EBs)后转入Matrigel? Matrix 3D培养体系中培养。用形态学观察计数收缩集落的数量和频率;用免疫组织化学和RT-PCR检测心肌细胞分化相关基因的表达。结果 在Matrigel?中培养5d左右,可观察到自发节律收缩的EBs,频率约为40~50次/min;继续培养3d左右,频率约为80~90次/min;到45d左右大部分集落最终收缩。分化为心肌细胞所表达的特异性蛋白cTnT, Desmin, Actin表达呈阳性,并表达心肌特异性基因cTnT, NKX2E, GATA-4和MLC-2v。结论 mES细胞来源的EBs在Matrigel?培养体系中能够分化为心肌细胞,籍此我们建立了一株细胞系。