基础医学与临床 ›› 2009, Vol. 29 ›› Issue (6): 561-565.
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刘琦 段春礼 吴波 范春香 张韬 赵焕英 赵春礼 杨慧
Qi LIU, Chun-li DUAN, Bo WU, Chun-xiang FAN, Tao ZHANG, Huan-ying ZHAO, Chun-li ZHAO, Hui YANG
摘要: 目的 研究α-突触核蛋白(α-SYN) 129位点磷酸化修饰是否具有神经元保护作用。方法 应用反转录病毒感染小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D,通过实时定量PCR检测各组细胞内α-SYN过表达情况,并通过免疫细胞化学方法检测野生型α-SYN (WT/α-SYN)及129位点磷酸化α-SYN (S129D/α-SYN)过表达后α-SYN在细胞内聚集情况,应用CCK-8检测细胞活力,观察WT/α-SYN及S129D/α-SYN对MN9D的细胞毒性,从而明确S129D/α-SYN对多巴胺能神经元的影响。 结果 实时定量PCR结果显示,WT/α-SYN及S129D/α-SYN在MN9D细胞内均过表达(P<0.01)。WT/α-SYN过表达组细胞活力明显下降(P<0.01),共聚焦显微镜观察未见明显的α-SYN聚集;S129D/α-SYN过表达组细胞内可观察到明显的α-SYN聚集体,同WT/α-SYN组相比细胞活力有明显提高(P<0.01)。结论 129位点丝氨酸的磷酸化修饰在一定程度上减轻了WT/α-SYN过表达所引起的细胞毒性。