摘要: 目的 探讨杨梅素(Myric)与围脂滴蛋白(PLIN1)基因沉默对3T3-L1脂肪细胞脂解通路的影响。方法 采用经典“鸡尾酒”方法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,筛选出Myric最佳干预浓度和时间。Myric联合sh-PLIN1干扰载体对成熟的脂肪细胞进行干预,实验共分为4组:对照组(control group)、转染组(sh-RNA group)、杨梅素组(Myric group)和联合干预组(Myric+sh-RNA group)。油红O染色脂滴,观察脂滴形态;Western blot检测细胞中ERK、p-ERK、MEK、p-MEK和激素敏感性脂肪酶磷酸化蛋白(p-HSL)的表达量;ELISA测定细胞中环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)和磷酸化的蛋白激酶C(p-PKC)的含量。结果 干预后,与Myric组和sh-RNA组相比,Myric+sh-RNA组脂滴形态变小,数量明显减少。与sh-RNA组和对照组相比,Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内p-PKC含量,p-ERK/ERK和p-MEK/MEK的比值以及p-HSL表达量显著升高(P<0.05)。同时,Myric+sh-RNA组和Myric组细胞内cAMP和PKA含量低于sh-RNA组和对照组(P<0.05)。结论 Myric的促脂解作用可能是通过激活PKC-MEK/ERK信号通路,增加该通路中p-HSL的表达量来实现的;Myric同时可能对cAMP/PKA信号通路中相关因子的活性有一定的抑制作用。
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