摘要: 目的 利用遗传性肺动脉高压(HPAH)患者和对照志愿者(CON)来源的诱导多能干细胞,研究其定向分化得到的内皮细胞(iPSC-ECs)表型及功能的差异,阐明BMPRII突变引起的PAH特征性内皮紊乱病理机制。方法 将CON和HPAH患者的肺动脉平滑肌细胞诱导得到的iPSCs分化为ECs,通过荧光定量PCR分析iPSC-ECs分化过程中多能性和内皮相关基因的mRNA表达水平;免疫荧光鉴定iPSC-ECs表面特征分子;检测参与调控内皮-间充质转分化(EndoMT)过程的相关基因α-SMA,HMGA1,Slug和Snail1表达;比较HPAH和CON来源iPSC-ECs成管功能,检测血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的mRNA和蛋白表达。结果 HPAH与CON多能性基因表达趋势基本一致,而ECs相关基因的表达变化存在差异;HPAH患者来源的iPSC-ECs的α-SMA和EndoMT过程的相关基因HMGA1,Slug和Snail1表达均高于CON ECs(P<0.05);与CON相比,HPAH患者来源的iPSC-ECs成管功能存在缺陷,VEGFR2的mRNA和蛋白水平均较低,VEGF165可使其得到恢复。 结论 HPAH来源的iPSC–ECs存在EndoMT现象和成管功能缺陷,HMGA1、Snail家族转录因子和VEGF通路可能参与对PAH血管重构的调控。
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