摘要: 目的 探讨匹诺塞林(PIN)对低氧/复氧(H/R)诱导的大鼠肝细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法 将大鼠肝细胞(BRL-3A细胞系)分为正常对照组、PIN实验组、低氧复氧损伤模型组和PIN预处理组。CCK-8检测细胞存活率;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡;检测细胞培养液中谷丙转氨酶(ALT)活性;ELISA检测TNF-α和IL-1β含量;Western blot检测细胞中TLR4、IκB-α和NF-κB p65蛋白水平;RT-qPCR检测细胞中TLR4、IκB-α和NF-κB p65mRNA表达。结果 在H/R条件下细胞存活率明显降低(P <0.01),细胞凋亡率增高(P <0.001),ALT活性升高(P <0.01),IL-1β和TNF-α含量增多(P <0.01),TLR4和NF-κB p65蛋白与mRNA表达水平显著提高(P <0.01)而IκB-α降低(P <0.05);经PIN预处理后,细胞存活率显著提高(P <0.01),细胞凋亡率显著减小(P <0.001),ALT活性降低(P <0.01),IL-1β和TNF-α含量降低(P <0.01),TLR4和NF-κB p65蛋白与mRNA表达水平明显降低(P <0.01)而IκB-α升高(P <0.05)。结论 PIN对H/R诱导的BRL-3A肝细胞的损伤具有保护作用,且该作用可能是通过TLR4 / NF-κB信号通路实现的。
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