摘要: 目的 探讨CCT5与γδ T细胞及自身免疫病的关系。方法 PCR扩增人CCT5的基因,表达并纯化CCT5重组蛋白;用3条CCT5蛋白的肽段免疫小鼠,制备并筛选抗CCT5的单克隆抗体;固相化CCT5重组蛋白,体外扩增人外周血单个核细胞中的γδ T细胞;用制备的单抗通过ELISA检测正常人、类风湿性关节炎(RA)及系统性红斑狼疮(SLE)病人血浆中CCT5蛋白的含量;用流式细胞技术分析不同亚型γδ T细胞的比例,并与血浆CCT5含量做相关性分析。结果 PCR扩增获得CCT5基因,目的片段长度为1 750 bp;经SDS-PAGE分析可见重组CCT5蛋白分子量约为65ku,并获得了纯化。通过筛选,获得两株抗CCT5单克隆抗体对。重组CCT5蛋白能在体外扩增外周血γδ T细胞;而血浆CCT5浓度与Vγ9和Vδ2 T细胞的比例呈显著正相关。在RA及SLE患者血浆中,可溶性CCT5的浓度显著低于正常对照(p<0.05)。结论 CCT5是与人Vγ9δ2 γδ T细胞相关的自身抗原,有助于我们深入了解Vγ9δ2 γδ T细胞在自身免疫病中的作用。
中图分类号: