Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础

基础医学与临床 ›› 2014, Vol. 34 ›› Issue (11): 1477-1481.

Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础

藏雨轩,方芳,朱杭飞,向国艳,张雲乔,李瑷彤,郝峰

吉林医药学院

收稿日期:2014-02-12 修回日期:2014-07-19 出版日期:2014-11-05 发布日期:2014-11-03
通讯作者: 郝峰 E-mail:haof863@126.com
基金资助:
家族性高胆固醇血症相关功能突变的组学筛查及基因敲除小鼠模型的建立;吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目;吉林省大学生创新创业训练计划;吉林医药学院大学生科研项目

Ano2 is the molecular identity of calcium-activated chloride channel

Received:2014-02-12 Revised:2014-07-19 Online:2014-11-05 Published:2014-11-03

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础。方法用RT-PCR技术扩增Ano2编码基因，将Ano2连接到真核表达载体pEGFP-N3；通过脂质体介导将Ano2转染至FRT细胞，抗生素筛选获得稳定表达Ano2的细胞株；倒置荧光显微镜下观察Ano2在FRT细胞中的表达和分布，Western blot检测Ano2的表达；全细胞膜片钳技术研究Ano2的电生理学特性。结果成功构建pEGFP-Ano2真核表达载体；Ano2表达在FRT细胞膜上；Ano2电流呈Ca2+、时间和电压依赖性，电流和电压关系呈外向整流。结论 Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础。

关键词: 关键词：Ano2, FRT细胞, 转染, 钙激活氯离子通道

Abstract: Objective To investigate that Ano2 is the molecular identity of calcium-activated chloride channels. Methods The full length coding sequence of Ano2 was amplified by RT-PCR，Ano2 and eukaryotic expression vector pEGFP-N3 were ligated；Then recombinant plasmids were transfected into FRT cells using liposome，and the stable transfection FRT cells were selected with antibiotic; the expression and location of Ano2 was observed by the inverted fluorescence microscope and its expression was detected by western blot；the electrophysiological properties of Ano2 were researched by whole-cell patch-clamp technique. Results pEGFP-Ano2 was constructed successfully，FRT cell membrane expressed Ano2；The electrophysiological properties of Ano2 was Ca2+-、time- and voltage-dependent，and an outward-rectifying I/V relationship was observed. Conclusion Ano2 is the molecular identity of calcium-activated chloride channels.

Key words: Key words：Ano2, FRT cells, transfection, calcium-activated chloride channels

中图分类号:

Q424

藏雨轩方芳朱杭飞向国艳张雲乔李瑷彤郝峰. Ano2是钙激活氯离子通道的分子基础[J]. 基础医学与临床, 2014, 34(11): 1477-1481.

[1]	李皓玥, 杜文静, 李薇. 利用不同方法将小分子NADPH 转染进入细胞的比较[J]. 基础医学与临床, 2024, 44(5): 613-618.
[2]	胡小青肖广原张鹏陈厚早刘德培. 一种提高质粒转染效率的质粒提取方法的优化[J]. 基础医学与临床, 2019, 39(5): 738-744.
[3]	张扬辛畅泰. HIF-1α转染方法的优化及其对间充质干细胞存活及分化功能的影响[J]. 基础医学与临床, 2014, 34(3): 365-371.
[4]	崔颖王月田姚梅胡晶李俊霞王宇张本. 以转染CDMP1基因的BMSCs修复软骨缺损[J]. 基础医学与临床, 2013, 33(4): 450-457.
[5]	王瑞庞希宁施萍. 磁性纳米颗粒与脂质体介导REST-siRNA转染hADSCs的比较[J]. 基础医学与临床, 2013, 33(12): 1549-1553.
[6]	王小莉李大哲胡培李东升. 体外合成修饰mRNA可转染hUC-MSCs[J]. 基础医学与临床, 2013, 33(10): 1229-1234.
[7]	滕兆刚范恒王立斌李玉奎魏军. Reg3α基因影响胰岛内皮细胞分泌胰岛素[J]. 基础医学与临床, 2012, 32(3): 241-244.
[8]	孙琰周文霞张永祥. 自分泌运动因子受体基因及其干扰RNA表达载体的构建[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(8): 868-872.
[9]	朱财林李南林王廷. 转染NDRG2基因抑制乳腺癌细胞增殖[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(1): 37-41.
[10]	宋向凤田中伟付丹丹毕新岭. 外源性FHIT 基因对人皮肤癌细胞株A431细胞增殖与凋亡的影响[J]. 基础医学与临床, 2009, 29(4): 405-408.
[11]	郑庆丰王建军应敏刚柳硕岩韩颖超. 纳米羟基磷灰石可介导转染人肺癌A549细胞[J]. 基础医学与临床, 2009, 29(3): 309-313.
[12]	刘凤君刘丽蒋智刘聪唐红. 恩替卡韦抑制乙型肝炎病毒复制型小鼠体内病毒的复制[J]. 基础医学与临床, 2009, 29(10): 1017-1020.
[13]	陈巾杰浦晓东. TIMP-3基因瞬时表达对兔血管平滑肌细胞增殖、迁移及凋亡的影响[J]. 基础医学与临床, 2008, 28(7): 756-759.
[14]	常静芦玲巧王红霞王晶马立权郑少鹏张立克. CYP2J3基因经静脉转染大鼠的组织分布[J]. 基础医学与临床, 2008, 28(12): 1251-1254.
[15]	邵月婷张灵汲坤刘亚男李扬胡嘉弟赵雪俭. GRIM-19基因的克隆及其对小鼠前列腺癌细胞株的促凋亡作用[J]. 基础医学与临床, 2008, 28(1): 13-17.