千斤拔主产于云南和广西,是我国传统壮药,具有祛风除湿,强壮筋骨,活血解毒的功效,民间有较高的药用和食用价值。《中国药典》(2015年版)附录及地方标准虽有收载,但并没有千斤拔质量控制标准内容,对于千斤拔的多基原特性,其标准的针对性、专属性尚待完善。笔者通过文献整理,对千斤拔的性状及显微鉴定、薄层色谱、指纹图谱、分子鉴定等进行分析和归纳。结果表明,千斤拔的质量控制模式主要以多指标同步质控、总成分质控和指纹图谱为主,TLC、UV、HPLC、红外光谱(IR)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)、电感耦合等离子体光谱法(ICP-AES)等色谱光谱技术以及内部简单重复系列-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)分子标记技术在千斤拔质量控制中的应用均有了系统的研究。这些为千斤拔资源系统研究与质量控制提供参考。
目的 研究不育红(Isodon yuennanensis)的抗疟活性,为发现植物来源的新型的抗疟天然产物或先导成分奠定基础。方法 采用β-羟高铁血红素形成抑制实验对不育红粗提物及其单体化合物进行抗疟活性筛选,以IC50对其活性结果进行评价。结果 所有不育红粗提物及其部分单体化合物具有不同程度的β-羟高铁血红素形成抑制活性。结论 不育红提取物乙酸乙酯部位及其中化合物2、12和13具有较好的抗疟活性,值得进一步深入研究。
目的 建立一种能够有效保存川贝母标准品DNA指纹片段的方法。方法 采用自主研制的川贝母DNA检测试剂盒提取基因组DNA,体外进行川贝母特异DNA片段克隆,与载体结合并导入生物宿主细胞,通过宿主细胞自我复制产生大量川贝母特异DNA克隆,继而采用质粒提取试剂盒将质粒提取出来,应用PCR及酶切方法检查并鉴定插入片段是否正确。将携带正品川贝母特异DNA序列的菌落置-80 ℃冰柜保存,分别以1个月、2个月、3个月和6个月为时间点进行复苏,进行稳定性考察。结果 转入细胞内的川贝母DNA克隆经PCR扩增后,所得到的琼脂糖凝胶电泳图谱条带清晰,并且进行多次实验结果均一致。4个时间点复苏后的菌落进行PCR扩增后,其琼脂糖凝胶电泳检测图谱中,条带明亮且清晰。结论 采用分子克隆技术保存川贝母特异基因片段的方法是可行且有效的,并且稳定性良好,可作为建立中药DNA指纹鉴定数据库的有效依据,方法简单明了,且结果可靠。
目的 探讨环王巴明预处理抑制sonic hedgehog信号通路对体外氧糖剥夺/再复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤大鼠大脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖的影响。 方法 新生SD大鼠大脑皮质神经干细胞采用悬浮培养法分离纯化。 第3代神经干细胞贴壁培养后氧糖剥夺150 min,复氧培养24 h。实验分为正常组、模型组及环王巴明预处理组。细胞鉴定采用免疫荧光法,细胞活力采用CCK-8法检测,细胞增殖采用BrdU法及流式细胞周期检测,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达采用Western blot检测。 结果 悬浮及贴壁培养细胞均高表达巢蛋白。模型组及环王巴明组细胞活力较正常组显著降低。其中,环王巴明组降低更明显(P<0.05)。模型组细胞增殖明显,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达上调,而环王巴明组细胞增殖较模型组低,Ptc-1、Smo、Gli-1蛋白表达下调(P<0.05)。 结论 环王巴明预处理能抑制体外氧糖剥夺/再复氧损伤后神经干细胞的增殖,提示Shh信号可能参与损伤后神经干细胞增殖的调控。