当期目录

2007年 第27卷 第1期    刊出日期：2007-01-25

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专题综述

蛋白质组学技术在泛素-蛋白酶体系统研究中的应用

陈国强 张海婧 李智立

2007, 27(1):  1-7. 

摘要 ( 493 )  

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泛素-蛋白酶体系统(ubituitin-proteasome system, UPS)是一条高效的、具有选择性并依赖能量的蛋白降解途径。目前应用蛋白质组学技术的重要研究工具之一质谱(mass spectrometry, MS)技术研究UPS系统还处于起步阶段。本综述主要介绍了应用蛋白质组学技术研究UPS系统的研究现状以及存在的问题。

泛素及其类似物的蛋白质组学研究进展

谭锋维 陆丽芳 王晖（公司） 彭小忠

2007, 27(1):  8-15. 

摘要 ( 501 )  

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作为蛋白质的翻译后修饰，泛素及其类似物（ubiquitin-like modifiers, Ubls）对底物的修饰被认为是真核细胞内一种重要的调节机制。根据以往的研究表明，泛素/ubls与各种各样的底物蛋白形成共价结合以后，通过介导蛋白降解、改变蛋白的细胞定位、改变蛋白的酶活性、改变蛋白与蛋白的相互作用等影响这些底物的功能与活性。可以想象，通过影响成百上千的不同底物蛋白，泛素和Ubls在各个细胞生理活动中都发挥着重要的调节作用。运用蛋白质组学的方法对泛素/Ubls进行研究，可以发现更多新的泛素和ubls的底物，帮助人们从整体水平上了解泛素/Ubls这个复杂的修饰系统。而利用质谱技术精确的鉴定泛素/Ubls在底物上的修饰位点则为进一步研究修饰发生的分子机制，以及对底物蛋白功能的影响提供了明确的线索和方向。到目前为止，已有越来越多的科学家们对泛素/Ubls修饰的蛋白质组学感兴趣并致力于这方面的研究，取得了很大进展。本篇文章对泛素及Ubls的蛋白质组学研究进展进行了归纳和总结。

泛素-蛋白酶体系统与心血管疾病

范永娜 李汇华

2007, 27(1):  16-20. 

摘要 ( 634 )  

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泛素-蛋白酶体系统主要由泛素激活酶（E1）、泛素交联酶（E2）、泛素连接酶（E3）和26S蛋白酶体组成，是降解细胞内蛋白的主要途径。泛素-蛋白酶体系统参与真核细胞许多生物学功能，如炎症、细胞增生、信号传导、转录调控、细胞凋亡等的调节。近年研究证实泛素-蛋白酶体系统在心血管疾病中具有重要的病理生理学意义，可调节动脉粥样硬化、缺血后再灌注损伤、家族性心肌病、心肌肥厚和心脏衰竭等重要疾病的发生和发展。本文拟泛素-蛋白酶体系统的结构、功能、调节及在心血管疾病中的作用作一简述。

研究论文

肾上腺髓质素对大鼠低氧性肺血管结构重构和肾上腺髓质素前体N端20肽的影响

丁亚光 齐建光 杜军保 唐朝枢

2007, 27(1):  21-24. 

摘要 ( 474 )  

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目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管结构重构和肾上腺髓质素前体N端20 肽(PAMP)的影响。 方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组?低氧组?低氧+ADM组，每组各8只。低氧+ADM组大鼠，通过微量渗透泵皮下持续给予ADM（300ng/h）。用放免法测定血浆中PAMP含量，用免疫组化法检测肺组织中PAMP表达。结果 低氧2周后，大鼠肺动脉平均压、右心室与左心室加室间隔的比值、肺动脉相对中膜厚度和面积较对照组均明显增高（P <0.01），超微结构也发生了明显改变。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显升高，肺动脉PAMP表达明显增强。而ADM可显著缓解上述变化。结论 ADM分子内调控参与了ADM对于低氧性肺动脉高压的干预机制。

可卡因苯丙胺调节转录肽相互作用蛋白的筛选

陈娟 赵瑛 由振东

2007, 27(1):  25-30. 

摘要 ( 508 )  

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摘要： 目的 寻找可卡因苯丙胺调节转录肽(CART)受体或与其相互作用的蛋白。 方法 建立大鼠脑cDNA文库，以CART为诱饵，应用细菌双杂交方法筛选与CART相互作用的蛋白。结果 成功构建大鼠脑pTRG-cDNA文库及诱饵质粒pBT- CART41-102。文库容量为3.37×106,重组率98.5%。筛选约5.01×106 个共转化克隆，证实为阳性克隆93个，全部DNA测序。经生物信息学方法分析得到stathmin等6个可能与CART相互作用的蛋白，并得到可能与CART相互作用的未知新蛋白，它们与22个已知膜蛋白或受体有短的极相似片段。结论 CART可能与stathmin等6个已知蛋白相互作用，并可能与一些未知蛋白相互作用，这些未知蛋白与22个膜蛋白或受体有短的相似保守结构。

MARK信号通路介导CT-1促进心肌细胞存活

符史干 董战玲 周升 翁启芳 许闽广

2007, 27(1):  31-35. 

摘要 ( 539 )  

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目的 探讨心脏营养素-1（CT-1）对培养的乳鼠心肌细胞存活中的促进作用以及丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）信号转导途径在CT-1促进心肌细胞存活中的作用。方法 差速贴壁纯化培养新生大鼠心肌细胞，MTT比色法测定各孔细胞存活率。结果 无血清DMEM培养心肌细胞24 h后，加入4个剂量组CT-1 (10-10～10-7 mol/L)，呈明显剂量依赖性增加MTT计数；培养基中加入CT-1 1×10-8 mol/L，1、2、3和4d MTT计数呈明显的时间依赖性增加；预先用MAPK抑制剂PD098059（5×10-5 mol/L），再加入CT-1，心肌细胞存活率明显低于单纯CT-1组，而单纯用PD098059则无明显影响；预先用PKC激动剂PMA 1×10-5 mol/L，再加入CT-1，MTT计数明显增加；先用PD098059，再加入PMA和CT-1，MTT计数明显降低，而PKC抑制剂Calphostin C（Cal）加CT-1，MTT计数也明显降低。结论 CT-1增加心肌细胞存活率的效应是由MAPK信号分子介导实现的；该效应的胞内信号转导通路可能是先激活PKC信号分子，然后再激活MAPK信号分子。

大鼠MSCs诱导分化为心肌样细胞时钙、钾离子通道基因的表达

王金菊 田杰 陈沅

2007, 27(1):  36-39. 

摘要 ( 489 )  

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目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外向心肌样细胞分化过程中L-型钙通道（α1C）和瞬间外向钾通道（kv4.3）基因的表达。方法 无菌条件下冲洗Wistar大鼠双侧股骨和胫骨的骨髓腔获得MSCs，体外培养传代纯化，5-氮杂胞苷(5-aza)诱导24h，显微镜下观察诱导前后形态变化，RT-PCR鉴定α1C和kv4.3基因的表达。结果 kv4.3基因诱导前有弱的表达，诱导后1、4、7和14d表达明显逐渐增强(P<0.05)；α1C基因诱导前有较强的表达，诱导后1、4、7和14d表达却明显逐渐减弱(P<0.05)。结果 α1C和kv4.3基因在维持MSCs的诱导分化过程中发挥重要作用。

SARS男性患者睾丸组织的病理改变

祁丽花 迟晓春 徐健

2007, 27(1):  40-43. 

摘要 ( 644 )  

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目的 研究严重急性呼吸综合征（SARS）男性患者睾丸组织的病理变化。 方法 对5例SARS死亡患者的睾丸组织进行常规组织学、TUNEL及免疫组化染色。结果 5例SARS患者睾丸生精小管基膜增厚、纤维化，生精上皮坏死、脱落，睾丸中几乎未见精子。生精细胞凋亡大量增加（P<0.05），间质充血，睾丸组织中有明显的白细胞浸润。CD3+T淋巴细胞、CD68+巨噬细胞较对照组明显增多（P<0.05）, 并浸润到生精小管中。结论 SARS导致男性患者并发睾丸炎。

II相酶诱导剂对选择性运动神经元损伤的保护作用

李哲（河北） 卜晖 刘晓云 李彬 孙萌萌 李春岩

2007, 27(1):  44-48. 

摘要 ( 497 )  

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目的 在选择性运动神经元损伤的脊髓片培养模型上，探讨Ⅱ相酶诱导剂CPDT（5，6-二氢环戊烯并1，2-二硫杂环戊烯-3-硫酮）对运动神经元的保护作用及机制。方法 乳大鼠脊髓片分为正常对照组、模型组（100μmol/L苏-羟天冬氨酸；THA）和Ⅱ相酶诱导剂CPDT（5、15和30μmol/L）干预组。以神经元特异性抗体SMI-32组化染色，对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定、计数，并测定不同时间点培养液中乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)含量。结果 THA使脊髓片腹角α运动神经元数目明显减少（P<0.01），培养液中LDH、MDA含量明显升高。与模型组相比，CPDT提前干预（15和30μmol/ L）可使α运动神经元数目明显增多（P<0.05），突起也较为丰富，培养液中LDH、MDA含量明显下降（P<0.05）。结论 Ⅱ相酶诱导剂CPDT可能通过抑制脂质过氧化物或清除自由基来抑制脊髓选择性运动神经元损伤。

结缔组织生长因子在人及大鼠肝纤维化组织中表达增强

梁增文 张国 农兵

2007, 27(1):  49-52. 

摘要 ( 481 )  

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目的 观察结缔组织生长因子（CTGF）在人及大鼠肝纤维化组织中的表达。方法 雄性SD大鼠32只，皮下注射CCl4后1、4、8周收集肝组织标本；44例人肝组织，其中包括12例正常肝组织、32例慢性病毒性肝炎和肝硬化组织。用免疫组化方法检测CTGF的表达及分布。 结果 CTGF主要表达于大鼠肝星状细胞及肝细胞胞质中。注射CCl4后，大鼠肝组织中CTGF呈时间依赖性表达增强（P<0.01或P<0.05）。CTGF在人肝纤维化组织中的表达与大鼠相类似，表达水平显著高于正常人（P<0.01）。结论 CTGF作为一种促纤维化因子，其过表达可促进肝星状细胞的增殖活化，促进细胞外基质的形成，从而促进肝纤维化的发生、发展。

人精子膜功能完整性与精液参数的关系

郭航 郑海筝 王瑞雪 刘睿智

2007, 27(1):  53-56. 

摘要 ( 482 )  

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目的 探讨精子膜功能完整性与精液参数的关系。方法 收集503例精液样本，其中对照组149例，不育组354例。根据WHO标准分析精子密度、活率、活力、精液白细胞浓度、精子形态和精子尾部低渗膨胀（HOS）率。结果 不育组精子尾部低渗膨胀率显著低于对照组（P<0.05）。与对照组相比，HOS正常不育组和HOS异常不育组形态正常精子率、密度、活力、活率均显著降低（P<0.05），头部异常精子率、精液白细胞浓度显著增高（P<0.05）；此外，HOS正常不育组的尾部异常精子率显著高于对照组，其精子活力、活率均显著高于HOS异常不育组（P<0.05）。精子HOS与精子密度、活力、活率呈显著正相关，与精液白细胞浓度呈显著负相关（P<0.05）。结论 精子膜功能可能与精液参数密切相关，精子膜功能是评价男性生育力的重要指标。

应用基因芯片检测肝癌、肝硬化及正常肝组织中差异表达的基因

刘娟（河北） 姚树坤 殷飞

2007, 27(1):  57-62. 

摘要 ( 483 )  

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目的 探讨肝细胞癌、肝硬化及正常肝组织中差异表达的基因并对其进行生物学信息分析。　方法 用Trizol一步法提取肝癌组织、肝硬化组织及正常肝组织的总RNA。并纯化mRNA，反转录合成荧光分子（Cy3/cy5）标记的cDNA探针,与含有4096个基因的芯片杂交；用GenePix Pro3.0图像分析软件分析肝硬化组织与正常肝组织，肝癌组织与正常肝组织的基因表达情况。　结果 与肝癌关系密切的基因有141条，许多与细胞周期和信号转导方面有关，如MCM7、YWHAH等。其中23条与在肝硬化组织中的表达趋势相同。与正常肝组织比较，有2条基因在癌组织中下调而在肝硬化组织中上调，均属于金属硫蛋白基因家族成员。　结论 在肝癌的发生、发展中，抑癌基因的失活、代谢相关酶类基因活性的异常及促使细胞进入增殖周期的相关基因的活化等因素发挥了重要的作用。系统的研究这些基因将有望发现新的早期诊断指标，为建立个体化治疗方案和预后评估系统提供帮助。

慢性阻塞性肺疾病患者HO-1基因启动子微卫星多态性与iNOS表达关系的研究

马志明 张珍祥 韩泽民

2007, 27(1):  63-67. 

摘要 ( 449 )  

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目的 探讨慢性阻塞性肺疾病患者（COPD）血红素加氧酶-1（HO-1）基因启动子微卫星多态性与诱导性一氧化氮合成酶（iNOS）表达的关系。方法 利用聚合酶链反应（PCR）及免疫组织化学等技术在50例肺癌合并COPD（COPD组）与30例未合并COPD（对照组）的肺组织中检测 HO-1基因启动子5'端（GT）n 重复序列不同基因型频率分布特征及其iNOS表达的关系。结果 COPD组iNOS强阳性表达率显著高于对照组（P﹤0.01）。含有L型等位基因（L/L、L/M、L/S）的样本，iNOS表达强阳性率显著性高于不含有L型等位基因（M/M、M/S、S/S）的样本（P﹤0.01）。结论 提示HO-1基因启动子（GT）n大量重复序列的个体可能存在着iNOS诱导性表达升高，而与COPD的易感性相关。

环氧合酶-2在酒精性肝炎发病机理中作用的实验研究

周俊英 姚树坤 甄真

2007, 27(1):  68-71. 

摘要 ( 497 )  

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目的 探讨环氧合酶2（COX-2）在酒精性肝病（ALD）发病机制中的作用。方法用酒精灌胃建立大鼠酒精性肝病模型，分别于4、8、12和16周取肝组织，用生化比色法检测肝匀浆6-酮－前列腺素F1α（6-K-PGF1α）、血栓素B2(TXB2)、甘油三酯（TG）、氧自由基（ORF）、抗超氧阴离子(ASOA)、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量；用HE、苏丹Ⅳ和天狼猩红染色观察肝组织病理形态； RT-PCR法观察肝组织COX-2 mRNA表达。结果 4、8、12和16周的大鼠肝组织COX-2 mRNA相对表达量分别为正常对照组的1.29、1.70、1.92、3.38倍，除4周外P<0.01；COX-2蛋白表达逐渐增强；肝组织COX-2mRNA相对表达量与肝匀浆OFR、MDA、TG、和TXB2呈正相关（P<0.01）；与ASOA、SOD、6-K-PGF1α呈负相关（ P<0.01）。结论 COX-2与酒精所致大鼠肝脏病变密切相关，是ALD 发病过程中重要因素之一。 COX-2与氧化应激密切相关，二者在ALD 发病中发挥重要作用。

大鼠急性肺栓塞DBP RET和TTR的表达变化研究

李圣青 戚好文 阙海萍

2007, 27(1):  72-75. 

摘要 ( 493 )  

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目的 研究急性肺血栓栓塞时维生素D结合蛋白(DBP)、维生素A结合蛋白(RBP)和甲状腺素转运蛋白(TTR)的表达变化及对代谢的影响。方法 用颈静脉插管注入血栓的方法制备大鼠急性肺栓塞模型。用Western blot检测DBP、RBP和TTR蛋白水平，RT-PCR法检测肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平，放免法测定FT4和25(OH)D3的血清浓度，微量荧光法测定维生素A的血清浓度。结果 急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平，肝组织中DBP、RBP和TTR的mRNA水平均逐渐降低；而血清中这三个结合蛋白的配体FT4、25(OH)D3和维生素A的水平明显升高。结论 急性肺栓塞后血清中DBP、RBP和TTR的蛋白水平降低是由于肝细胞合成减少所致，从而释放出更多的配体。升高的25(OH)D3、维生素A和FT4分子在急性肺栓塞后的一系列病理生理变化中将发挥重要作用。

蛋白激酶C及磷脂酰肌醇3激酶参与心衷患者心肌重构的机制

杨永健 朱文玲 张鑫 孙梅芹

2007, 27(1):  76-80. 

摘要 ( 443 )  

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目的 探讨蛋白激酶C（PKC）/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/ 蛋白激酶B（Akt）信号通路参与心力衰竭（CHF）患者心肌重塑的机制。方法 选择因瓣膜性心脏病接受二尖瓣置换术的CHF患者39例，正常对照38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者)。彩色多普勒超声心动仪检测心脏扩大和心功能参数，放射免疫法检测血浆及心肌组织中AngII浓度，竞争蛋白结合法检测PKC，免疫沉淀法检测MAPK活性，免疫沉淀法测心肌组织PI3K/Akt磷酸化、c-fos、α-骨骼肌动蛋白（α-skeletal-actin）的表达。结果 CHF患者心肌组织呈典型重构心肌的病理改变。血浆及心肌组织AngⅡ浓度与心功能级别呈正相关。CHF患者心肌组织PKC和MAPK活性明显高于对照组(P <0.01)，并随心功能恶化其表达逐渐增加; CHFⅡ级组患者心肌组织PI3K/Akt磷酸化明显强于正常对照组（P<0.01）和CHFⅢ、Ⅳ级组(P<0.01)。 CHFⅢ、Ⅳ级组间没有差异。 正常心肌组织中无c-fos蛋白表达，CHFⅡ级组c-fos蛋白表达明显高于Ⅲ、Ⅳ级组（P<0.01）。 CHF患者心肌组织α-skeletal-actin表达明显高于对照组(P<0.01)，并随心功能恶化其表达逐渐增加。结论 PKC/MAPK及PI3K/Akt信号通路共同参与调节CHF患者心肌重构的病理过程。

技术与方法

正常人乳腺上皮细胞的原代培养

叶媚娜 陈红风

2007, 27(1):  81-84. 

摘要 ( 483 )  

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目的 研究正常人乳腺上皮细胞原代培养的可行性，以及激素对其增殖的影响。方法 从乳房区段切除术切除组织中获取正常人乳腺组织，用胶原酶溶液消化乳腺组织分离得到较纯净的上皮细胞，用烧灼法结合酶消化法解决细胞纯化问题。细胞形态观察和电镜检测鉴定细胞。结果 正常人乳腺上皮细胞的原代培养是可行的。结论 1×10-5的雌二醇和孕酮混合液可以促进细胞增殖。

研究短文

孕鼠肝内胆汁淤积症致胎鼠心肌细胞凋亡及基因调控的实验研究

邵勇 姚珍薇 李红霞

2007, 27(1):  85-86. 

摘要 ( 414 )  

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尿Surivin 与NMP22诊断膀胱肿瘤的价值作用

罗利飞 黄月霞

2007, 27(1):  87-88. 

摘要 ( 389 )  

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小儿慢性浅表性胃炎镜下不同表现的胃电活动观察

徐辉 黄爱芬 胡伟国 程芹芹 黄开宇 朱欢 徐彰

2007, 27(1):  89-90. 

摘要 ( 452 )  

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银杏叶片对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

李绍梅 郝玉杰 傅叔霞 杨林 王建荣

2007, 27(1):  91-93. 

摘要 ( 447 )  

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短篇综述

衣原体基因组学与蛋白组学研究进展

邱昌庆

2007, 27(1):  94-99. 

摘要 ( 512 )  

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目前， 4个种衣原体：豚鼠嗜性衣原体、鼠衣原体、沙眼衣原体和肺炎嗜性衣原体基因组已有较详细的研究，揭示了衣原体基因组的紧密性和多成员的起因。多形态膜蛋白多基因家族、具有第III型分泌系统功能基因以及编码肽聚糖基因的发现，反映了该领域的重要研究成果。随着多个种株衣原体基因组完整核苷酸序列测定的完成，人们对衣原体发育过程中生产合成的多种蛋白的认识也在不断深入，主要包括外膜蛋白、外膜主蛋白、热休克蛋白、多态外膜蛋白等，这些蛋白的结构和功能不同，充分认识其特性对衣原体的致病机理、免疫发生机理的研究及高效基因工程疫苗的研制将会产生重要的影响。

细胞间粘附分子-1与肾脏缺血再灌注损伤

邱振宇 周盾

2007, 27(1):  100-104. 

摘要 ( 499 )  

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摘要：细胞间黏附分子-1（ICAM-1）与肾脏缺血再灌注损伤的病理生理密切相关。肾缺血后损伤显示，损伤不仅是血供中断后组织缺氧的结果，更有再灌注进程中引起炎症反应的激活过程。浸润的白细胞在再灌注中起有害作用，其为活性氧自由基、蛋白水解酶及细胞因子的一个潜在来源。已有证据证实，ICAM-1在白细胞粘连、募集至炎症组织起关键作用。本文着重探讨ICAM-1在肾缺血再灌注损伤中的作用和意义。

医学教育

科学史知识在生理教学中的运用

朱晓燕 倪鑫

2007, 27(1):  105-107. 

摘要 ( 483 )  

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生理学教育应该使学生理解和掌握的不仅是生理学知识本身，还有科学研究方法、科学思维能力和科学精神等重要内容。本文介绍了我们在教学实践中，通过将生理学发展历史上一些著名科学家的创造性工作引入课堂教学内容的方式，激发学生学习兴趣、发展创造性思维能力和培养求真唯实的科学精神的探索和尝试。

讲座

临床医疗和临床科研中的知情同意问题（讲座）

翟晓梅

2007, 27(1):  108-112. 

摘要 ( 387 )  

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