摘要: 目的:研究氢氧化钠与雷帕霉素(Rapa)单独或联合处理对Tsc2基因缺失小鼠胚胎成纤维细胞的影响。方法:将Tsc2-/- 细胞及其对照的野生型(WT)细胞按照处理方式分为:对照组,氢氧化钠处理组(NaOH),雷帕霉素处理组(Rapa)和氢氧化钠、雷帕霉素联合处理组(Combo)。使用MTT法测定细胞增殖速率;克隆形成测定细胞集落形成能力;PI染色流式细胞术检测细胞周期;免疫印迹法检测p-4EBP1、p-S6和S6蛋白表达水平。结果:与对照组相比,NaOH组和Rapa组的两组Tsc2-/-细胞均表现为增殖速率降低、克隆形成数减少(P <0.05);仅Rapa组的Tsc2-/-细胞G1期比例升高且p-S6和p-4EBP1的蛋白表达水平降低(P <0.05)。与NaOH组和Rapa组相比,Combo组的Tsc2-/-细胞在增殖速率和克隆形成数上进一步降低,G1期细胞的比例进一步升高(P <0.05),但p-S6和p-4EBP1的蛋白表达水平只显著低于NaOH组(P <0.05)。结论:氢氧化钠增强了Rapa抑制 Tsc2-/- 细胞增殖的效果。
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