针对于白蛋白的新型核酸适配体的筛选与鉴定

基础医学与临床 ›› 2017, Vol. 37 ›› Issue (7): 935-938.

针对于白蛋白的新型核酸适配体的筛选与鉴定

李晓欧¹,胡燕²,安雅聪¹,段金虹³,杨先达¹

1. 北京协和医学院基础医学研究所
2. 中国医学科学院基础医学研究所
3. 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所

收稿日期:2017-03-06 修回日期:2017-04-20 出版日期:2017-07-05 发布日期:2017-06-23
通讯作者: 杨先达 E-mail:ayangmd@hotmail.com
基金资助:
国家自然科学基金

Identification of a novel DNA aptamer against albumin

Received:2017-03-06 Revised:2017-04-20 Online:2017-07-05 Published:2017-06-23

摘要/Abstract

摘要： 目的研发能特异结合白蛋白的DNA核酸适配体，为去除实验样品中的白蛋白提供新型技术手段。方法体外合成全长为59个碱基并含有21个随机寡核苷酸的单链DNA文库，以白蛋白为靶标，利用指数富集的配体系统进化技术（SELEX），从单链DNA文库中筛选能特异结合白蛋白的核酸适配体；用流式细胞术来检测核酸适配体的富集程度、适配体与白蛋白的结合特性；用MFold软件预测其二级结构。结果经过多轮筛选得到了能特异识别白蛋白的DNA核酸适配体A6，其Kd值为77.4 nmol/L，且基本不结合卵清蛋白、免疫球蛋白IgG等对照蛋白。结论针对于白蛋白的DNA核酸适配体A6能选择性识别白蛋白，在去除实验样品中的白蛋白方面具有应用潜能。

关键词: 核酸适配体, SELEX, 白蛋白

Abstract: Objective To develop an albumin aptamer that may potentially serve as a selective ligand for albumin removal from experimental samples. Methods A single-stranded 59nt DNA library that contains 21 random oligonucleotides was synthesized in vitro．An albumin aptamer A6 was developed by SELEX technique using bovine serum albumin (BSA) as target．The enrichment of aptamer and evaluation of its binding properties were monitored by flow cytometry. The secondary structure of A6 was predicted by MFord software. Results The aptamer A6 bound to BSA strongly with a Kd of 77.4 nmol/L, and had minimal cross reactivity with control proteins including ovalbumin, IgG, and trypsin. Conclusions Aptamer A6 may have potential in albumin removal applications.

Key words: Aptamer, SELEX, BSA

中图分类号:

R363

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