摘要: 目的 检测雷帕霉素诱导细胞后4种miRNAs的表达情况,并进一步研究miR-144与Beclin-1基因的靶向调控作用。方法 对SKOV-3细胞分别进行雷帕霉素(50 μg/L,反应2 h)及3-甲基腺嘌呤(10 nmol/L、反应12 h)处理,RT-qPCR检测各组细胞miR-17、miR-20a、miR-144及miR-155的表达;Western blot检测雷帕霉素组Beclin-1蛋白的表达;双荧光素酶报告系统、Western blot及RT-qPCR,验证miR-144与Beclin-1之间的靶向调控关系。结果 与正常对照组相比,雷帕霉素组SKOV-3细胞的miR-17、miR-144及miR-155的表达水平显著上调(P<0.05);3-MA组SKOV-3细胞的miR-17、miR-20a及miR-144的表达水平显著下调(P<0.05);雷帕霉素组Beclin-1的蛋白表达明显低于正常细胞组(P<0.05)。miR-144可靶向作用Beclin-1的3’非翻译区(3’UTR),且抑制其表达;miR-144能明显抑制Beclin-1蛋白及mRNA的表达。结论 miR-144可靶向抑制Beclin-1基因的表达,并参与调控SKOV-3细胞自噬的过程。
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