摘要: 目的 研究表观遗传药物组蛋白去乙酰化抑制剂曲古霉素A(TSA)对microRNA-34家族(miR-34a/b/c)在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞糖酵解的分子机制。方法 在肝癌细胞系中分别转染miR-34模拟物或相应阴性对照,用real-time PCR法检测miR-34a/b/c的表达以及糖酵解途径关键酶的表达;在肝癌细胞中分别转染miR-34b模拟物、相应阴性对照,或用TSA、DMSO处理肝癌细胞,用乳酸检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒分析miR-34b及TSA对肝癌细胞HepG2、PLC/PRF/5糖酵解途径的影响;设计拯救实验在HepG2细胞中研究TSA、miR-34b与肝癌细胞糖酵解调控的关系。结果TSA可以诱导HepG2、PLC/PRF/5肝癌细胞内源性miR-34b的表达上调(P<0.01);过表达miR-34b可以抑制糖酵解关键酶LDH-A的表达(P<0.05);miR-34b可以抑制含有LDH-A 3’非翻译区的报告基因活性;敲低miR-34b的表达可以降低TSA对肝癌细胞HepG2糖酵解途径的抑制作用。结论 TSA通过诱导miR-34b表达上调,发挥抑制肝癌细胞的代谢转换。
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