基础医学与临床 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (10): 1137-1142.

• 研究论文 • 上一篇    下一篇

Alarelin免疫绵羊对垂体GnRHR、FSHR和LHR基因表达与生殖激素分泌的作用

魏锁成1,巩转娣1,董江陵1,谢坤2,李琼毅1,韦敏1   

  1. 1. 西北民族大学
    2. 兰州大学 基础医学院
  • 收稿日期:2011-08-08 修回日期:2012-05-02 出版日期:2012-10-05 发布日期:2012-09-28
  • 通讯作者: 魏锁成 E-mail:weisc668@163.com

Alarelin active immunization affects of GnRHR, FSHR and LHR mRNAs in the pituitary gland and reproductive hormone secretion of ewes

  • Received:2011-08-08 Revised:2012-05-02 Online:2012-10-05 Published:2012-09-28
  • Contact: Suo-cheng WEI E-mail:weisc668@163.com

摘要: 目的 探讨GnRHago主动免疫对绵羊腺垂体GnRHR、FSHR和LHR表达及生殖激素合成与释放作用,为深入研究GnRH-A调节生殖功能的机理及合理应用提供依据。方法 42只5-6月龄母绵羊(Ovis aries)随机分为6组(n =7),EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg和400μg,0d和14d各1次,共2次;EG-Ⅳ和EG-Ⅴ分别皮下注射阿拉瑞林抗原200μg、300μg,0d、7d、14d和21d各1次,共4次;对照组皮下注射药物的溶媒,0d和14d各1次,共2次。于70d在颈动脉放血处死绵羊,无菌切取腺垂体、子宫及卵巢。用ELISA测定血清GnRH抗体浓度,以激素检测试剂盒分别测定血清GnRH、FSH、LH和E2浓度。提取腺垂体总RNA,PCR扩增与反转录,实时荧光定量PCR(FQ-PCR),分析GnRHR、FSHR和LHR mRNA的表达。 结果 绵羊腺垂体中有丰富的RNA。特异性条带扩分别为2150 bp,1100bp和180bp左右。实验组GnRHR、FSHR和LHR mRNA值均低于对照组,EG-Ⅳ和EG-Ⅴ的mRNA值低于EG-Ⅰ和EG-Ⅱ。实验组血清GnRH浓度逐渐降低值谷值,之后上升,70d 时达到免疫注射前水平。实验组血清FSH浓度始终高于对照组(P<0.05)。35d时EG-Ⅳ和EG-Ⅴ低于EG-Ⅰ、EG-Ⅱ和EG-Ⅲ。实验组和对照组血清E2含量无显著差异。结论 阿拉瑞林主动免疫可抑制垂体GnRHR mRNA、FSHR mRNA和LHR mRNA的表达,促进垂体合成与释放FSH,增加血清FSH含量,降低GnRH和LH浓度,对E2浓度无明显影响。增加阿拉瑞林抗原的免疫剂量和注射次数,作用更加明显。

关键词: 促性腺激素释放激素激动剂, 受体, 表达, 生殖激素, 垂体, 绵羊