目的 建立12批火把花根片的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,评价其批间质量一致性,并对主要化学成分进行鉴定,以明确其物质基础。方法 采用Waters CORTECS T₃色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6 μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,检测波长为260 nm,柱温为35 ℃。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行相似度分析。采用超高效液相色谱四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对火把花根片的主要成分进行鉴定。结果 建立的火把花根片UPLC指纹图谱共标定了27个共有峰,12批样品的相似度为0.992~0.999,鉴定了18个主要成分,多数为黄酮和酚苷类成分。结论 火把花根片批间质量一致性较好,所含成分的极性相对较大,与该制剂水提醇沉的生产工艺相关。本研究中建立的指纹图谱和主要成分的结构鉴定可为后期该品种的质量控制研究提供依据。

目的 建立乌司他丁中O-糖胺聚糖的鉴定与评价方法,为产品的质量一致性评价奠定基础。方法 利用化学降解与盐析法,将O-糖胺聚糖从乌司他丁糖蛋白中释放及沉淀分离,通过液相-三重四级轨道阱-高分辨质谱(UHPLC-Orbitrap-HRMS)技术,对O-糖胺聚糖进行质谱数据的采集与分析。结果 通过对3批乌司他丁溶液以及4批乌司他丁注射液中O-糖胺聚糖精确相对分子质量以及各分子离子峰响应强度比例进行解析与计算,证明企业A生产的乌司他丁产品与原研制剂中的O-糖胺聚糖的主要糖型基本一致。结论 本研究所建立的乌司他丁中O-糖胺聚糖的表征与评价方法准确、可靠、适用范围广,不仅能够实现对于乌司他丁产品中的O-糖修饰的质量评价,也能够对其他糖蛋白类药物的O-糖修饰表征与分析起到示范性作用。

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定昆明山海棠片中15种活性成分的含量。方法 采用Waters Cortecs T₃色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6 μm),以体积分数0.1%甲酸乙腈溶液(A)-体积分数0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温35 ℃,通过正负离子切换扫描,在多反应监测模式下建立昆明山海棠片中15种活性成分的含量测定方法,包括2种黄酮(儿茶素和表儿茶素)、9种二萜(雷公藤内酯三醇、雷醇内酯、雷公藤内酯二醇、雷公藤甲素、雷公藤氯内酯醇、雷公藤内酯酮、雷酚内酯、雷公藤对醌A和雷公藤对醌B)和4种三萜(去甲泽拉木醛、雷公藤红素、雷公藤内酯甲和扁塑藤素)。结果 15种待测成分分别在各自范围内线性关系良好(r² ≥ 0.999 1),加样回收率在88.36%~115.91%范围内(RSD ≤ 4.94%),含量测定结果显示,不同企业生产的昆明山海棠片中活性成分的含量存在较大差异,可能会给制剂的临床药效和安全性带来影响。结论 建立的方法灵敏、准确,可用于昆明山海棠片中活性成分的含量测定,同时测定结果可为该制剂的质量评价提供参考和依据。

目的 将高效液相色谱(HPLC)指纹图谱、抗氧化活性研究与化学计量学分析相结合,对15批蓬莪术多糖进行质量评价。方法 以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;以三氟乙酸水解蓬莪术多糖,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化-高效液相色谱法(PMP-HPLC)建立蓬莪术多糖的指纹图谱,评价指纹图谱相似度、层次聚类分析和偏最小二乘法-判别分析;使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力和Fe³⁺总还原能力为指标测定抗氧化活性,评价蓬莪术多糖的抗氧化活性。结果 蓬莪术多糖指纹图谱鉴别了6个共有峰,分别为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。基于相似度评价和聚类分析、偏最小二乘法-判别分析,选择甘露糖、葡萄糖和半乳糖醛酸作为潜在的化学标记物,DPPH自由基清除能力对应的抗氧化活性可作为辅助鉴别的候选检测指标。结论 建立蓬莪术多糖PMP-HPLC指纹图谱,结合抗氧化活性可为蓬莪术多糖质量控制提供更全面的参考。

目的 建立国家一类新药甘露特钠首批国家标准物质,对标准物质的寡糖结构进行确证。方法 采用液质联用、核磁共振等方法确证待标物的结构。液相色谱采用GE Superdex 30 Increase 10/300GL色谱柱对寡糖进行分离,采用负离子模式进行质谱检测;采用一维、二维核磁共振技术,对聚甘露糖醛酸、聚古罗糖醛酸及待标物进行结构分析。结果 通过对质谱、光谱的分析,确证了甘露特钠待标品是以2~10糖组成的寡糖混合物,分子骨架以甘露糖醛酸为主,与理论结构一致。结论 本研究建立了甘露特钠结构确证方法,并对甘露特钠首批对照品的相对分子质量、分子结构进行了确证。

目的 建立固公果根药材的超高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)指纹图谱,并研究其与自由基清除活性的谱效关系。方法 采用UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS建立固公果根的指纹图谱,评价指纹图谱相似度,结合热图分析,对其中的19个共有峰进行指认;使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法评价固公果根的抗氧化活性,结合灰色关联度分析(grey relational analysis,GRA)研究谱效关系。结果 建立了固公果根的UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS指纹图谱,选择峰面积>1%的19个色谱共有峰,通过对照品比对法、数据库、参考文献等方法鉴定前述色谱峰。19个色谱峰的热图分析和DPPH抗氧化灰色关联度结果显示,面积颜色变动较大峰为2、4、8、14、15、17,谱效关系表明11、18、17、19、8、6、16、12、1、5、7、15号峰是与抗氧化活性关联较大的正相关峰。各取排名前五相交得以下9个化学成分作为质量评价指标:峰2(儿茶素)、峰4(表儿茶素)、峰8[(+)-喹色亭酚-(4β,8)-表儿茶素]、峰11(鞣花酸)、峰14(野蔷薇苷)、峰15(刺梨苷)、峰17(委陵菜酸)、峰18(蔷薇酸)和峰19(皂皮酸)。结论 固公果根抗氧化活性是酚类和三萜皂苷类等多成分联合效应的结果,为药材质量控制提供更全面的参考。