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2014年 第34卷 第7期    刊出日期：2014-07-05

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研究论文

T2DM患者胃转流术后人体测量学指标与胰岛素抵抗的相关性

霍宁 高宏凯 宋慧娜 张利岩

2014, 34(7):  873-876. 

摘要 ( 941 )   PDF (477KB) ( 549 )  

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目的 探讨腹腔镜胃转流手术(LGBP)后2型糖尿病（T2DM）患者人体测量学指标与胰岛素抵抗的相关性。方法 回顾分析42例行LGBP的T2DM患者，分别于术前及术后6个月用人体脂肪测量仪检测人体测量学指标，口服葡萄糖耐量实验（OGTT）检测胰岛功能指标。结果 术后半年的随访期间，T2DM达标率为78%（32/41）。术后6个月，患者空腹血糖(FPG)、体质量、体重指数(BMI)、腰围(WC)、臀围(HC)、腰臀比(WHR)、体脂、胰岛素抵抗指数(IR)、胰岛素作用指数(IAI)和胰岛素敏感性指数(ISI)均显著下降(P＜0.05）。术前IR与躯干脂肪率具有显著相关性(P＜0.05)。术后IR的下降与体质量、BMI、WC、HC和体脂呈正相关(P＜0.05)；IAI的升高与体质量、BMI、HC和臀围下降值、体脂呈负相关（P＜0.05）。结论 LGBP后，T2DM患者躯干脂肪含量显著减少；体脂含量尤其是腹部脂肪含量变化与IR改善相关。

钙敏感受体通过ERK信号通路参与低氧诱导的人气道上皮细胞黏液高分泌

杨红菊 Juliy M·Perelman Victor P. Kolosov 周向东

2014, 34(7):  877-881. 

摘要 ( 896 )   PDF (662KB) ( 978 )  

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目的 探究钙敏感受体(CaSR)在低氧诱导的气道黏液高分泌中的信号通路。 方法 低氧培养箱(37 oC,94%N2-1%O2-5%CO2）培养人气道上皮细胞16HBE复制细胞低氧模型。分为对照组、低氧组、CaSR特异性激动剂CaCl2+低氧组、对照siRNA+低氧组、CaSR-siRNA+低氧组、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路特异性抑制剂U0126+低氧组。RT-PCR检测黏蛋白（MUC）5AC的转录水平，Western blot检测CaSR、ERK1/2及磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)的蛋白相对含量，ELISA检测MUC5AC的分泌水平，四甲基偶氮唑盐法（MTT）测定细胞的活性。结果 CaSR表达于人气道上皮细胞，转染特异性的CaSR-siRNA明显抑制CaSR的表达。低氧组p-ERK1/2、MUC5AC mRNA和MUC5AC蛋白的相对含量分别为（0.63±0.11、0.51±0.03、0.56±0.07）较对照组（0.27±0.04、0.18±0.04、0.25±0.06）显著增加（P＜0.05）。CaSR的激动剂CaCl2可进一步增强低氧引起的上述作用（P＜0.05），而转染CaSR-siRNA及给予ERK信号通路特异性抑制剂U0126可抑制低氧引起的上述效应（P＜0.05）。 结论 CaSR可通过MEK/ERK1/2信号通路参与低氧诱导的气道黏液高分泌。

RAS信号途径参与干扰素-α抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖

龙向淑 吴强 宋方 黄晶 张林军

2014, 34(7):  882-885. 

摘要 ( 843 )   PDF (710KB) ( 661 )  

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目的 探讨RAS信号途径在干扰素-α（IFN-α）抑制大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖中的作用。方法 应用转染IFI204 siRNA和/或IFN-α瞬时干预体外培养的大鼠VSMCs，以非特异性siRNA转染组为对照组，用MTT法测定细胞活力，流式细胞仪分析细胞周期，RT-PCR 法和Western blot分别检测P204 mRNA、P204和Ras蛋白的表达及RAF与ERK的磷酸化水平。结果 与对照组比较，IFN-α组P204 mRNA和蛋白表达上调（P＜0.01），细胞活力和细胞周期G1/S转换下调（P＜0.01），伴RAS蛋白表达减少（P＜0.01），RAF及ERK磷酸化水平下降（P＜0.01）；转染IFI204 siRNA后再加IFN-α干预，P204 mRNA及蛋白表达下调（P＜0.01），而G0/G1期细胞增多，S期细胞减少（P＜0.01），且RAS蛋白表达和RAF及ERK磷酸化水平亦下调（P＜0.01）。结论 RAS信号途径参与IFN-α抑制大鼠VSMCs增殖。

液体负荷试验结合胃内压评价健康人近端胃功能

邓莉 柯美云 姚树坤 王智凤 陈彦文 孙晓红 方秀才 朱丽明

2014, 34(7):  886-890. 

摘要 ( 850 )   PDF (977KB) ( 509 )  

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目的 与“金标准”恒压器相比，灌注法液体营养负荷试验（PNLT）结合胃内压（IGP）测定在健康志愿者（HS）近端胃功能中的意义。方法 30例HS在不连续的2d中，分别行PNLT结合IGP测定和恒压器检查。 通过VAS评分，分别记录HS不同饱感即初始饱感、轻度饱感、中度饱感、明显饱感、最大饱感时的压力和容积。结果 不同饱感时的压力和容积在两种方法之间均有一定的相关性；另外PNLT结合IGP最大饱感时胃内压与恒压器试餐后胃容受性、容受性舒张呈一定程度的正相关（P<0.05)，最大饱感时灌注量与恒压器试餐后平均胃内容积呈一定程度的正相关（P<0.05）。结论 PNLT结合IGP测定与恒压器具有一定的可比性，具有良好的可行性，安全性和可靠性，可用于评价近端胃功能。

藻蓝素减轻大鼠脓毒症性急性肺损伤及分子机制

张大利 吴建华 谢黎明 刘双全

2014, 34(7):  891-895. 

摘要 ( 792 )   PDF (672KB) ( 617 )  

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目的 观察藻蓝素（CPC）对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用及分子机制。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组和CPC干预组。其中模型组采用盲肠结扎穿刺建立脓毒症急性肺损伤大鼠模型。CPC干预组在模型组基础上分别腹腔注射给予20, 40和60mg/kg CPC。术后72h后获取血液及肺组织标本，检测PaO2/FiO2、肺湿干重比（W/D）、支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子（TNF）-α，白介素（IL）-1β和IL-6水平，以及肺组织中丙二醛（MDA)水平及髓过氧化物酶（MPO)活性；比色法检测血红素氧合酶（HO）-1活性，用RT-PCR检测mRNA表达。结果 与对照组相比，模型组PaO2/FiO2含量显著降低（p<0. 05)，W/D比值以及MDA和MPO显著高于对照组（p<0. 05)。不同浓度CPC干预后，PaO2/FiO2进一步增高，肺湿干重、MDA和MPO水平随之降低（p<0. 05)；模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6含量，HO-1活性及其mRNA表达水平增高（p<0. 05)，而CPC能进一步降低TNF-α、IL-1β和IL-6含量含量，同时能增加HO-1的酶活性以及上调其mRNA水平（p均<0. 05)。此外，HO-1激动剂锡原卟啉（CoPP）处理后，能协同CPC降低TNF-α、IL-1β和IL-6含量，而HO-1抑制剂锌原卟啉（ZnPP）能进一步促进细胞因子产生（均p <0. 05)。结论：CPC可能通过上调HO-1表达，从而减轻脓毒症急性肺损伤大鼠肺部气体交换功能和炎性反应。

miR-29a和miR-142-3p促进髓系分化的基因调控网络

董贺 马艳妮 董磊 赵华路 张俊武 王芳 余佳

2014, 34(7):  896-903. 

摘要 ( 723 )   PDF (2577KB) ( 445 )  

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目的 深入了解miR-29a/miR-142-3p参与促进髓系分化的调控网络。方法 首先实现miR-29a和miR-142-3p在HL-60细胞中的过表达，同时使用PMA以及ATRA分别诱导HL-60细胞向单核及粒系分化。May-Grünwald-Giemsa染色方法观察核形态变化，Real-time PCR检测细胞内CD11和CD14的表达。mRNA表达谱芯片分析获得表达模式相似的基因，利用DAVID和GeneMANIA进行GO categories 和信号通路归类分析。PicTar和TargetScan进行靶基因预测，双荧光报告基因实验确定靶基因的真实性。结果 miR-29a/miR-142-3p过表达细胞与PMA/ATRA诱导分化细胞在整体基因表达模式上有较高的相似度，而表达模式相似的基因大多与细胞分化相关，且在GO分析中显著富集。同时，ZBTB5、CaMKK2、SUV420H2、TRIB2和CANX被确定为miR-29a新的靶基因。结论 miR-29a/miR-142-3p通过调节其靶基因活性，引发整个基因表达调控网络的改变，使之趋向于髓系分化过程中的基因表达变化，从而促进髓系分化进程。

人源化CDR3δ1移植性抗体对PBMC治疗肝癌的影响

高运安 姜燕 何维

2014, 34(7):  904-908. 

摘要 ( 846 )   PDF (1667KB) ( 576 )  

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目的 研究人源化CDR3δ移植性抗体GTM-Fc对PBMC治疗肝癌的影响。方法 裸鼠皮下注射HepG2.2.15肝癌细胞，建立移植瘤模型，将荷瘤裸鼠分成PBS组、PBMC和PBMC+Ab 3组，每组9只，PBS组瘤内注射100μL PBS/只，PBMC组注射1×106 PBMC/100μL/只，PBMC+Ab组注射3μg GTM-Fc/1×106 PBMC/100μL。每3天给药1次并测体重和肿瘤大小，给药5次后的第3天处死裸鼠。流式细胞仪检测GTM-Fc与肝癌细胞系的结合能力，抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)检测GTM-Fc对PBMC杀伤肝癌细胞系的影响。结果 人源化CDRδ1移植性抗体GTM-Fc与肝癌细胞系有良好的结合能力。体外实验证明，它能够促进PBMC对肝癌细胞系的杀伤作用。结论 人源化CDR3δ移植性抗体GTM-Fc能够促进PBMC对肝癌的杀伤作用，为研究免疫治疗肝癌提供了新的线索。

HMGB1-TLR4促进缺氧复氧介导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡

尹金凤 刘秀娟 沈江山 周阳 尹秀英

2014, 34(7):  909-913. 

摘要 ( 946 )   PDF (855KB) ( 1044 )  

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目的 研究缺氧复氧后大鼠肾小管上皮细胞中高迁移率族蛋白1(HMGB1) 和Toll样受体4(TLR4)的表达及其在肾小管上皮细胞凋亡中的调控机制 方法大鼠原代肾小管上皮细胞(PTECs) 置于6孔培养板培养，随机分为对照组（Control）、缺氧复氧组（A/R）、HMGB1抗体处理组（A/R+HMGB1）和TLR4抗体处理组（A/R+TLR4）（每组n = 3）。用RT-PCR检测HMGB1和TLR4 mRNA的表达；Western blot法检测HMGB1、TLR4 及凋亡相关分子Bcl-2、Bax、CHOP和caspase-8的蛋白表达；流式细胞术检测细胞凋亡。结果 A/R组HMGB1和TLR4的mRNA和蛋白的表达水平较对照组均显著上调 (P<0.01)，细胞凋亡水平较对照组显著增加 (P<0.01)，凋亡相关分子Bax、CHOP和caspase-8蛋白表达水平较对照组显著增加( P<0.01)，Bcl-2蛋白表达较正常对照组下调(P<0.05)。 经抗体处理后，HMGB1抗体处理组和TLR4抗体处理组PTECs细胞凋亡水平较缺氧复氧组显著下降(P<0.05)，凋亡相关分子Bax、CHOP和caspase-8蛋白表达水平较缺氧复氧组下降( P<0.05)，Bcl-2蛋白表达变化不明显。结论 HMGB1-TLR4轴可促进缺氧复氧介导的大鼠肾小管上皮细胞凋亡。

非霍奇金淋巴瘤患者外周血单核细胞hepcidin可能导致慢性病贫血

韩潇 周道斌 段明辉 汪玄 赵永强 沈悌 武永吉

2014, 34(7):  914-920. 

摘要 ( 873 )   PDF (1203KB) ( 600 )  

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目的 探讨非霍奇金淋巴瘤患者外周血单核细胞hepcidin可能发挥的作用。方法 收集符合条件的非霍奇金淋巴瘤患者的临床资料及外周静脉血，ELISA法测定血清IL-6和TNF-α浓度，CD14+磁珠分选外周血单核细胞，实时定量PCR测定外周血单核细胞hepcidin，IL-6和TNF-α mRNA。结果 非霍奇金淋巴瘤患者血红蛋白浓度低于正常对照（113±21.7g/l），其外周血单核细胞hepcidin表达高于正常（P<0.05）。初治患者单核细胞hepcidin表达与血红蛋白浓度和血清IL-6负相关（P<0.05），但和TSAT%，SF及血清TNF-α无关联。结论 初治淋巴瘤患者外周血单核细胞升高的hepcidin可能导致慢性病贫血的发生。

胸腺素β4通过提高Akt磷酸化促进局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质eNOS和CD31表达

庞月珊 罗勇 谢宸宸 李满 陈瑞芳 汶海琪

2014, 34(7):  921-926. 

摘要 ( 805 )   PDF (1505KB) ( 499 )  

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目的 探讨胸腺素β4（Tβ4）对局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质血管再生影响及其机制。方法 用线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型。将大鼠随机分为假手术组（S组）、模型组（IR组）、Tβ4组（IRT组）、Tβ4+LY294002组（IRTL组）、0.9%氯化钠注射液组（IRN组），缺血2h后把IR、IRN和IRT组分为3d和7d两亚组。Western blot检测Akt磷酸化水平和eNOS蛋白表达；免疫组化检测Tβ4和CD31蛋白表达；荧光定量PCR检测eNOS、SDF-1及CXCR4 mRNA表达；Longa法检测神经功能。结果 与IRN组相比，IRT 3d Tβ4蛋白表达显著增多（P<0.01）；与IRN组比较，IRT 3d和7d Akt磷酸化水平和eNOS蛋白显著增高（P<0.05），但IRTL组与其比较p-Akt和eNOS蛋白表达显著减少（P<0.01）；与IRN组比较，IRT 3d和7d eNOS、SDF-1和CXCR4 mRNA表达显著升高（P<0.05）；与IRN组比较，IRT 3d和7d组微血管密度显著增高（P<0.05），大鼠神经功能缺损在第7天改善最明显（P<0.05）。 结论 Tβ4可能通过提高局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质Akt磷酸化水平、eNOS基因和蛋白的表达，促进大鼠大脑皮质缺血半暗带血管再生和神经功能恢复。

异硫氰酸苯乙酯通过PI3K-NF-κB-MMP-9途径抑制结肠癌SW480 细胞的迁移和侵袭

魏付桥 谢文彪 申清香 刘昌化 罗康宁

2014, 34(7):  927-932. 

摘要 ( 716 )   PDF (998KB) ( 518 )  

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目的 观察异硫氰酸苯乙酯（PEITC）对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制。方法 体外培养结肠癌细胞系SW480，分别用10，30和50μmol/L PEITC作用24h，MTT法检测细胞的增殖；伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性，RT-PCR检测MMP-9 mRNA表达情况；Western blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、mTOR磷酸化，以及NF-κB核转位情况。荧光素酶报告基因分析NF-κB的活性。最后，建立裸鼠异种移植瘤动物模型，观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用。结果 PEITC能在不影响细胞活性的条件下显著抑制SW480细胞侵袭和迁移（P<0.05），也能抑制MMP-9的酶活性以及mRNA表达（P<0.05）。同时PEITC能抑制PI3K的表达以及抑制Akt和mTOR磷酸化（P<0.05），上调PTEN表达。PEITC也能抑制NF-κB核转位，并能降低其活性（P<0.05）。此外，PEITC也能抑制裸鼠异种移植瘤的生长（P<0.05）。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物，它可能通过影响PI3K/Akt和NF-κB通路发挥作用。

急性低剂量辐射对小鼠肝脏及骨髓DNA甲基化的影响

陈凤鸣 吴宏 张梦 关雪晶 何晓莉 蒋林

2014, 34(7):  933-938. 

摘要 ( 687 )   PDF (1013KB) ( 544 )  

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目的 观察低剂量辐射（LDR）对小鼠肝脏及骨髓单个核细胞（BMNC）DNA甲基化及甲基化转移酶的影响。方法 直线加速器一次性全身X射线1.0 Gy均匀照射C57BL/6小鼠，建立辐射损伤模型。并于照射后1、3、7和14 天取眼球血进行外周血细胞计数，处死小鼠提取肝脏及BMNC，高效液相色谱法检测全基因组DNA甲基化的水平,Western blot检测DNA甲基化转移酶1（DNMT1）、DNMT3A及DNMT3B的水平。结果 与正常组相比，辐射组白细胞及血小板计数均明显降低（P<0.05），白细胞在1 d时降至最低，而血小板在3 d时降至最低，14 d还未恢复正常。辐射组肝及BMNC全基因组DNA甲基化水平下降（P<0.05），其后均逐渐恢复正常。与正常组相比，辐射组肝脏及BMNC DNMT1及DNMT3A表达显著升高（P<0.05），14 d时还未恢复至正常，DNMT3B的表达也显著升高（P<0.05），但在7 d时已恢复至正常。结论 低剂量辐射可导致小鼠肝脏及骨髓DNA甲基化水平的降低及DNMTs表达的升高。

ChIP-seq比较分析人体心脏和脾脏的H3K9三甲基化差异

薛雯 曹翠辉 眭维国 车文体 陈洁晶 郭丽 戴勇

2014, 34(7):  939-944. 

摘要 ( 967 )   PDF (759KB) ( 609 )  

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目的 分析人体器官心脏和脾脏的H3K9me3的全基因图谱，发现H3K9三甲基化的修饰与组织特异性的表达、功能和发育具有相关性。方法 通过染色质免疫共沉淀的方法获取各标本DNA，通过qPCR验证ChIP结果，然后构建ChIP Sequencing文库，与目的基因组序列比对，获取比对Reads，接着进行全基因组的Peak分析，GO功能富集分析peak相关基因的生物学功能。结果 心脏和脾脏间有169个基因有显著地H3K9me3差异，其中心脏中H3K9me3的基因中有64个特殊基因，脾脏中H3K9me3的基因中有87个特殊基因。从这些基因中，挑选出8个表现H3K9me3 明显的基因，然后再从这8个基因中挑选出两个心脏和脾脏间表现H3K9me3差异最明显的基因，分别是PTPN3和RBMS。结论H3K9me3差异可作为一个潜在的生物标志物或是表观遗传疾病的治疗靶点。

塞来昔布诱导人椎间盘细胞表达神经生长因子

陈小明 周润梅 欧斌 曹奇

2014, 34(7):  945-949. 

摘要 ( 1302 )   PDF (738KB) ( 611 )  

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目的 研究环氧化酶2抑制剂塞来昔布以及前列腺素E2（PGE2）对神经生长因子（NGF）表达的影响。方法 分离培养人椎间盘(IVD)细胞，用不同浓度的塞来昔布预处理30min后，加入10ng/ml IL-1β作用6h。RT-PCR和ELISA分别检测NGF mRNA和蛋白的表达，ELISA检测PGE2的分泌。同时加入外源性PGE2以及其受体（EPs 1～4）激动剂，观察其对NGF产生的影响。结果 IL-1β作用3h即可以一定的时间依赖性诱导IVD细胞表达NGF mRNA。塞来昔布处理后能使NGF mRNA水平进一步增加1.8倍。IL-1β处理后，PGE2含量达（5.46±0.64）ng/mL。10mmol/L塞来昔布能将其降低至（1.07±0.04）ng/mL（P<0.05）。IVD细胞经100μmol/L PGE2处理后，IL-1β诱导的NGF降低了59%（P<0.05）。此外，采用EP2和EP4受体激动剂处理IVD细胞后，也得到了类似的结果，而EP1和EP3激动剂处理对NGF产生无明显影响。结论 塞来昔布能促进IVD细胞表达NGF，其机制可能与抑制PGE2的分泌有关。

地塞米松促进人甲状腺滤泡上皮原代细胞凋亡

何珂 胡蕴 郭慕红 张斌 姜鹏 毛晓明

2014, 34(7):  950-954. 

摘要 ( 865 )   PDF (856KB) ( 718 )  

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目的 研究地塞米松对人甲状腺滤泡上皮细胞凋亡的影响及其临床意义。方法 分离原代甲状腺滤泡上皮细胞，以0、10-6、10-4和10-4mol/L地塞米松刺激单层培养的甲状腺细胞，用MTT、流式细胞术及荧光定量PCR法检测刺激前后甲状腺细胞的增殖抑制率、凋亡率及凋亡相关基因mRNA的表达。结果 地塞米松在10-6~10-4mol/L浓度范围内可剂量依赖性地抑制甲状腺细胞增殖(P<0.05)，增加甲状腺细胞凋亡率(P<0.05)及凋亡相关基因mRNA的表达(P<0.05)。结论 地塞米松可抑制甲状腺细胞增殖，促进甲状腺细胞凋亡的发生。

B7-H1启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性检测

吴胜昔 陈永文 朱广倍 费蕾 吴玉章

2014, 34(7):  955-960. 

摘要 ( 1662 )   PDF (1685KB) ( 995 )  

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目的 构建含B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体，转染肝癌HepG2细胞进行活性检测。方法 PCR扩增B7-H1启动子上游区域基因片段，并插入到含有荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中构建重组子，经双酶切和测序鉴定后，将重组子转染HepG2细胞，用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶表达活性。结果 成功地构建了6种不同长度的pGL3-B7-H1-Luc荧光素酶表达质粒，分别命名为P88、P175、P203、P398、P723和P960。瞬时转染HepG2后经报告基因检测，P175、 P203、 P398、 P723和P960所含5段启动子均具有转录活性，IFN-γ作用后启动子活性明显增强，而P88转染组IFN-γ作用后，荧光素酶活性无显著变化。结论 成功构建了B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体。

分泌IL-21的白血病细胞系的建立及其抑瘤作用

朱琰 孙蕊 王春景 刘玉琴

2014, 34(7):  961-967. 

摘要 ( 985 )   PDF (2357KB) ( 528 )  

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目的 建立及鉴定稳定表达白介素21的4种白血病细胞系，并初步分析其刺激活化的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。方法 构建携带白介素21和红色荧光蛋白基因的质粒，包装慢病毒，感染4种白血病细胞系，连续传代后，通过荧光显微镜、流式细胞仪和ELISA法鉴定建立的4种细胞系。以稳定分泌IL-21白血病细胞为抗原刺激外周血单个核细胞增殖，细胞分析计数仪检测增殖倍数，流式细胞仪分析淋巴细胞的表型，细胞计数试剂盒（CCK8）检测增殖后的淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。结果 建立稳定表达IL-21的4种细胞系：K562-IL-21、THP-1-IL-21、Jurkat E6-1-IL-21和RPMI8226-IL-21。3份人PBMC在4种分泌IL-21的白血病细胞的作用下都有增殖，增殖倍数在1.147±0.057~2.725±0.345倍之间。不同数量的IL-21分泌白血病细胞都可激活淋巴细胞增殖，增殖的倍数在1.127±0.152~2.213±0.200之间。增殖后CD3+ T淋巴细胞和CD56+ NK细胞的比例降低（P<0.05），CD19+ B淋巴细胞比例增加（P<0.05）；由分泌IL-21白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞的杀伤作用明显高于对照组。由分泌IL-21白血病细胞激活后的淋巴细胞对母系白血病细胞和其他7种肿瘤细胞均有杀伤作用，杀伤率在（28.68±9.31）%~（78.45±0.61）%之间。结论 4种分泌IL-21的白血病细胞可刺激PBMC增殖并激活其对肿瘤细胞的杀伤作用。

罗格列酮减轻小鼠胆总管梗阻致小肠屏障损伤

宁强 彭大颖 高志安

2014, 34(7):  968-973. 

摘要 ( 784 )   PDF (1220KB) ( 475 )  

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目的 研究胆总管梗阻对小鼠小肠屏障的损伤作用及罗格列酮激活PPARγ对胆总管梗阻小鼠小肠屏障功能的保护作用。 方法 将小鼠随机分为假手术组、假手术+罗格列酮（PPARγ激动剂）组、模型组、模型+罗格列酮组及模型+罗格列酮+GW9662（PPARγ抑制剂）组。各模型组构建小鼠胆总管结扎（BDL）术致继发性小肠屏障损伤模型。于术前2 d至术后5 d给相应药物。第5 d末处死小鼠，检测小肠形态学、生化分析法检测小肠PPARγ通路相关氧化应激和凋亡指标及全身炎症指标；Western blot法检测小肠PPARγ、Occludin、Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达。结果 模型组小鼠较对照组发生显著肠道屏障损伤和全身炎症损伤，同时肠道PPARγ、Occludin、Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达降低（P＜0.05）；模型+罗格列酮组较模型组损伤程度较低，同时上述蛋白表达升高（P＜0.05）；模型+罗格列酮+GW9662组较模型+罗格列酮组损伤程度加重，上述蛋白表达降低（P＜0.05）。结论 罗格列酮激活PPARγ可减轻胆总管梗阻小鼠小肠屏障损伤，表现为减轻形态学损伤、PPARγ通路相关氧化应激及细胞凋亡。

siRNA沉默CD55基因对胰腺癌BxPC-3细胞增殖的影响

何政 吴慧 万荣华 郑军

2014, 34(7):  974-978. 

摘要 ( 952 )   PDF (920KB) ( 556 )  

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目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默衰亡加速因子(CD55)基因对胰腺癌细胞增殖的影响。方法:针对CD55基因设计3对siRNA(阴性对照siRNA由广州锐博公司直接提供)，转染胰腺癌BxPC-3细胞，用实时定量PCR和Western blot检测CD55mRNA和蛋白的表达，并用流式细胞术检测细胞生物学行为的改变。 结果 转染BxPC-3细胞48h后，3条siRNA中仅siRNA3能显著抑制CD55mRNA和蛋白的表达，细胞凋亡比率显著增加(P<0.05)；细胞增殖率显著减少(P<0.05)；细胞G1/G0期升高，G2期变化不明显，S期下降(P<0.05)。结论 使用siRNA能够有效地沉默CD55基因的表达，并显著影响胰腺癌细胞的生物学行为。

沉默信息调节因子1（SIRT1）在前列腺癌恶性生物学表型中的作用

李淑玲 王忠利 王翠瑶

2014, 34(7):  979-983. 

摘要 ( 761 )   PDF (786KB) ( 689 )  

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目的 观察SIRT1在前列腺癌组织和细胞中的表达，探讨SIRT1在前列腺癌发生中的作用。方法 收集辽宁医学院附属第一医院手术切除的8例成对前列腺癌组织和癌旁组织随机分组，体外培养PrEC、LNCap、PC3和DU145细胞，Real-time PCR和Western blot法检测SIRT1和P53在前列腺癌组织和细胞中mRNA和蛋白表达。提取细胞系中总蛋白、浆蛋白和核蛋白，Western blot法检测PC3和DU145细胞中SIRT1和P53的蛋白表达和定位。结果 前列腺癌组织中，SIRT1的mRNA和蛋白表达明显高于癌旁组织（P<0.01）；LNCap、PC3和DU145细胞中SIRT1的mRNA和蛋白表达明显高于PrEC细胞（P<0.01）；PC3和DU145细胞核SIRT1蛋白表达明显高于胞质（P<0.01）。结论 SIRT1可能通过P53不同方式促进前列腺癌发生，为探讨SIRT1在前列腺癌恶性生物学表型中的作用和机制奠定基础。

胆汁中胆固醇升高通过影响CCK-1R再分布抑制胆囊收缩

杨阳 曲强 刘卫 洪涛 徐协群 何小东

2014, 34(7):  984-989. 

摘要 ( 591 )   PDF (1778KB) ( 574 )  

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目的 分析胆汁总胆固醇含量与胆囊收缩功能的关系，并探讨其可能的机制。方法 从2013年3月至2014年1月收集73例在北京协和医院基本外科行胆系手术的胆囊结石患者（结石组）和非胆囊结石患者（非结石组）胆汁，测定胆汁中总胆固醇（TC）和总胆汁酸（TBA）含量。对胆囊结石患者术前行胆囊功能试验。用免疫组化方法测定胆囊黏膜和肌层中I型胆囊收缩素受体（CCK-1R）和细胞膜结构蛋白小窝蛋白-3（Cav-3）的表达。用免疫荧光法定位二者在胆囊黏膜和肌层中的共表达。结果 胆囊结石患者胆汁中TC及TBA含量显著高于非结石患者（P<0.05）。胆囊收缩功能较差的患者胆汁中TC含量明显高于收缩功能较好的患者（P<0.05）。结石组胆囊黏膜中Cav-3的表达量明显高于非结石组（P<0.05）。在结石组中CCK-1R和Cav-3在胆囊黏膜和肌层中均有明显共表达，而在非结石组则无明显的共表达现象。结论 胆汁中TC含量升高可抑制胆囊收缩功能，其机制与胆囊黏膜和肌层中过多的Cav-3和CCK-1R结合进而影响CCK功能有关。

临床园地

镇痛-伤害性刺激指数是一种新的用于吸入全麻手术镇痛水平的临床监测指数

许力 马璐璐 张秀华 黄宇光

2014, 34(7):  990-993. 

摘要 ( 840 )   PDF (577KB) ( 759 )  

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目的 观察一种新的临床监测指数：镇痛-伤害性刺激指数（ANI）在吸入全麻下腹腔镜胆囊切除手术中不同疼痛刺激下的变化水平，评估其对临床镇痛水平的指导意义。方法 32例ASAⅠ-Ⅱ级择期行腹腔镜胆囊切除手术患者，七氟醚吸入全麻，通过麻醉/脑电意识监测系统监测NT，使术中麻醉深度维持在D0-D2水平，采用镇痛-伤害性刺激监测仪测定麻醉诱导后无疼痛刺激（T0）、腹腔镜气腹（T1）、腹腔镜穿刺器（trocar）刺入腹腔（T2）、从胆囊床剥离胆囊（T3）、胆囊从腹腔中取出（T4）5个时间点的ANI数值，同时记录各时点血压、心率。结果 相同的麻醉深度下，与无疼痛刺激时点T0比较，疼痛刺激的不同时点T1、T2、T3、T4 的ANI数值及血流动力学均有明显的变化（p<0.05），其中以最强的疼痛刺激时点穿刺器刺入腹腔T2时间点的变化最为显著（p<0.001）。结论 在吸入全麻下腹腔镜胆囊切除手术中，ANI的数值变化与伤害性刺激密切相关，能够及时反应全麻患者的镇痛水平。

研究短文

贵州北部汉族头发和手的7项遗传性状分析

张志敏 申旭波 卢家秀 吴开娴 肖代敏

2014, 34(7):  994-995. 

摘要 ( 802 )   PDF (315KB) ( 663 )  

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STAT3信号通路与乳腺癌紫杉醇耐药相关

司方莹 李朵璐 阚全程

2014, 34(7):  996-997. 

摘要 ( 941 )   PDF (363KB) ( 569 )  

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短篇综述

肽类药物及其抗肿瘤的研究进展

赵微 白丽

2014, 34(7):  998-1001. 

摘要 ( 753 )   PDF (455KB) ( 612 )  

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在抗肿瘤治疗中，抗肿瘤肽类药物具有独特的优势：分子量小、不良反应低、抗肿瘤特异性高及免疫原性低，并且易于合成和改造，对于肿瘤的临床治疗将具有重要价值。

卵巢功能早衰中端粒及端粒酶作用的研究进展

王伟聿 唐莉

2014, 34(7):  1002-1005. 

摘要 ( 928 )   PDF (491KB) ( 893 )  

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卵巢功能与卵泡内卵细胞和颗粒细胞的分裂、增殖和分化密切相关。端粒作为细胞分裂能力的“分子钟”，在各类真核细胞的分裂增殖过程中发挥了重要的作用。

肿瘤干细胞作为胰腺癌治疗潜在靶点的研究进展

孙宇 孙宁 杨绍时 宋国栋

2014, 34(7):  1006-1009. 

摘要 ( 123 )   PDF (482KB) ( 513 )  

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胰腺导管腺癌是最具侵袭性的肿瘤之一，对目前的治疗反应差和生存率低为其特点。最近肿瘤干细胞（CSC）在肿瘤生成中作用的研究进展使人们认识到CSC可作为新的治疗靶点。CSC是肿瘤细胞中一类明确的亚群，具有分化为其他细胞类型和为了保持肿瘤扩增而自我更新的能力。通过回顾CSC的生物标记和主要路径，似应找到以CSC为靶点的新的治疗方向。

慢性阻塞性肺病Sirtuins的研究进展

陈刚

2014, 34(7):  1010-1013. 

摘要 ( 137 )   PDF (478KB) ( 597 )  

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Sirtuins是第III类组蛋白去乙酰化酶，主要成员SIRT1、SIRT6与慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病机制有密切关系。SIRT1、SIRT6在COPD患者肺部中表达下调，并通过多种机制调节炎性反应、肺部自噬与衰老。Sirtuins可能是COPD发生过程中的一个调控分子家族。

医学教育

基因组医学时代遗传病网络实践对遗传学教育的影响

刘雅萍 赵秀丽 张学

2014, 34(7):  1014-1016. 

摘要 ( 123 )   PDF (564KB) ( 490 )  

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目的 结合当前后基因组时代信息爆炸的发展现状，总结北京协和医学院基础学院医学遗传学系在临床八年制学生中进行遗传病网络实践学习对遗传学教育产生的影响。方法 回顾2008年以来遗传病网络实践学习的历程，设计问卷在学生中进行调查，总结该活动的效果。结果 该活动有助于学生理解“基因组医学”，在一定程度上拓宽了学生科学视野、增加了学生科学研究兴趣。结论 “以病例为中心”的整合式教学模式是基因组医学时代医学遗传学教育的趋势。