摘要: 目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met对大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)迁移能力的影响及其机制。方法 提取、培养和鉴定大鼠骨髓EPCs;重组腺病毒载体介导c-Met基因转染EPCs,用real-time PCR、Western blot和CCK8分别检测c-Met的表达和细胞增值;分别用0、5、10、20和50 ng/mL HGF处理Ad-c-Met-EPCs,并通过Transwell 迁移系统检测Ad-c-Met-EPCs的迁移能力;选取适宜浓度的HGF处理EPCs、Ad-GFP-EPCs和Ad-c-Met-EPCs,并设置PBS对照组和磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002组(同时加入HGF和10 g/L的LY294002),通过Transwell 迁移系统和Western blot分别检测各组细胞的迁移能力、Akt和P-Akt的表达。结果 ①Ad-c-Met-EPCs中c-Met基因与蛋白均为高表达(P<0.05)。② c-Met基因对EPCs的增值无明显影响。③HGF在0~50 ng/mL范围内呈浓度依赖性促进Ad-c-Met-EPCs迁移。④HGF+Ad-c-Met-EPCs组的迁移能力和P-Akt的表达显著高于对照组、HGF+EPCs组、HGF+Ad-GFP-EPCs组 和HGF+ LY294002+Ad-c-Met-EPCs组(P<0.05)。结论 HGF/c-Met能够显著提高EPCs的迁移能力;HGF/c-Met可能通过PI3K/Akt信号通路促进EPCs的迁移。
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