基础医学与临床 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (12): 1400-1405.

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内源性PS1在活体HEK293和HeLa细胞膜上的定位

宁丽峰1,王慧萍1,李铁2,桑建利2,李佳慧3   

  1. 1. 国家人口计生委科学技术研究所生殖免疫研究室
    2. 北京师范大学生命科学院
    3. 中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所
  • 收稿日期:2011-11-07 修回日期:2012-09-20 出版日期:2012-12-05 发布日期:2012-11-28
  • 通讯作者: 李佳慧 E-mail:jiahuili@163.com
  • 基金资助:
    科学技术部“科技基础工作项目

Expression and location of endogenous PS1 gene incytoplamic membrane of live HEK29 and HeLa cells

  • Received:2011-11-07 Revised:2012-09-20 Online:2012-12-05 Published:2012-11-28

摘要: 目的 检测内源性PS1在活体细胞膜上的定位及其表达。方法 为防止细胞固定及通透使胞膜被破坏,在未经固定和通透的活体细胞上利用PS1抗体,通过间接免疫荧光法观察了内源性PS1在活细胞膜外表面的定位和表达;利用分子标签技术,构建GFP-PS1融合蛋白,瞬时转染细胞,检测到外源性PS1在细胞核膜的定位及在胞质中的少量分布;同时利用PS1抗体,将细胞固定及通透,用间接免疫荧光技术,检测到内源性PS1在细胞核膜中的定位及在细胞质中的少量不均匀分布。结果 内源性PS1在定位于亚细胞结构的膜同时,也定位于细胞外膜。结论 成功地在活体细胞外膜上检测到内源性PS1。

关键词: 关键词:早老素1基因, 绿色荧光蛋白(GFP), 活体细胞, 定位

Abstract: Objective To detect the membrane location of endogenous PS1 on live cells. Methods HEK293 and Hela cells were transfected with fusion proteins by attaching GFP-PS1.The cellular location of endogenous and exogenous PS1was characterized with antibody by indirect immunofluorescence technique. Results Endogenous and exogenous PS1 was found locating on the nuclear membrane and a little and inhomogeneous distribution in cytoplasm. Conclusions Endogenous PS1 located on the outer membrane of the unfixed and live cells.

Key words: Key words:Presenilin 1 gene (PS1), Green fluorescence protein (GFP), live cell, location

中图分类号: