基础医学与临床 ›› 2007, Vol. 27 ›› Issue (12): 1334-1338.
阮灿军 王抒 孙兰 杜冠华
Can-jun RUAN, Shu WANG, Lan SUN, Guan-hua DU
摘要: 目的 观察阿尔茨海默病致病相关基因淀粉样前体蛋白(APP)基因的高表达致高度生成,对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性及M和N胆碱受体功能的影响,探讨β-样肽(Aβ)生成增加对细胞胆碱功能的作用。 方法 采用Lipofectamine 2000试剂盒将携带野生型人APP基因的pCMV695质粒转染至人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中。以ELISA方法测定Aβ生成量。取稳定高表达Aβ细胞的克隆,用放射免疫法测定ChAT的活性;放射配基结合测定M、N乙酰胆碱受体结合。 结果 与未转染APP的SH-SY5Y细胞相比,当Aβ生成量为对照的2~2.6倍时SH-SY5Y-APP细胞中,未观察到明确的细胞毒性形态学改变;ChAT活性无明显变化,但细胞M受体结合降低18.5%~21.8 %(P<0.05);N受体结合未出现明显变化。结论 单纯Aβ产生增加就可通过影响M受体结合功能而引起脑内胆碱能功能障碍。