摘要: 目的 构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并探讨CKS2敲除对卵巢癌细胞A2780细胞增殖的影响。方法 根据siRNA原理设计2对靶向CKS2的shRNA序列(shRNA1、shRNA2)及阴性对照NC shRNA,并克隆到慢病毒表达载体PLKO.1/puro中;将上述质粒转染到293T细胞并包装出慢病毒,用慢病毒感染卵巢癌细胞A2780,实时定量PCR及Western blot检测CKS2表达;MTT法检测A2780细胞增殖;Western blot检测PARP-1的剪切; 流式细胞术检测凋亡。结果 成功构能明显降低A2780细胞中CKS2 mRNA及蛋白表达(P < 0.05);能显著抑制A2780建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;感染A2780细胞后,细胞增殖(P < 0.05);能诱导PARP-1蛋白的剪切及凋亡(P < 0.05)。结论 成功构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,能显著抑制A2780细胞增殖。